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Seminario 1 Introducción a la metodología científica BCM- Gabriel Scicolone — Transcript

by Biología Molecular y Genética FMED - UBA · 10,392 words · 1,796 segments · language en · Watch on YouTube

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  1. 0:02la idea de la charla de hoy Entonces es
  2. 0:05que entendamos y reconozcamos que la
  3. 0:08materia está formada por distintos
  4. 0:10niveles de organización y que distintas
  5. 0:12ciencias o especialidades estudian
  6. 0:14distintos niveles de organización de la
  7. 0:16materia utilizando metodologías
  8. 0:18específicas para tal efecto luego vamos
  9. 0:21a analizar o La idea es que comprendamos
  10. 0:24que los científicos que trabajan en la
  11. 0:26biología celular y molecular producen
  12. 0:28conocimiento a través de resultados
  13. 0:31experimentales realizando experimentos
  14. 0:33cuyos resultados luego se generalizan es
  15. 0:36decir a través de una metodología
  16. 0:37inductiva y que el equipo de salud entre
  17. 0:41ellos el médico utilice esos
  18. 0:42conocimientos científicos para resolver
  19. 0:44problemas particulares de los pacientes
  20. 0:47utilizando una metodología
  21. 0:49deductiva el tercer gran objetivo de la
  22. 0:53de la charla es que ustedes comprendan
  23. 0:57que los conocimientos científicos se
  24. 1:00adquieren a través de trabajos
  25. 1:02científicos en los cuales se realizan
  26. 1:04procedimientos o técnicas que sirven
  27. 1:06para responder a las hipótesis o
  28. 1:07preguntas que se plantean los
  29. 1:09científicos en cuarto lugar
  30. 1:11eh comprender que en los trabajos
  31. 1:14científicos se utiliza modelos
  32. 1:16experimentales en los cuales se obtienen
  33. 1:19resultados que se pueden luego
  34. 1:21transferir Y ser aplicados por ejemplo
  35. 1:24para el ser
  36. 1:25humano entender que el método que el
  37. 1:28médico utiliza esos esos conocimientos y
  38. 1:32utiliza distintas técnicas para
  39. 1:34establecer el diagnóstico y el
  40. 1:36tratamiento adecuado de los pacientes y
  41. 1:39finalmente comprender el fundamento y la
  42. 1:41utilidad de distintas metodologías tanto
  43. 1:45en el campo de la investigación
  44. 1:46científica como en el de la medicina
  45. 1:50asistencial entonces empezando con la
  46. 1:53temática específica del de la clase de
  47. 1:57hoy tenemos que tener en cuenta
  48. 2:01que ustedes pueden ponerse en el lugar
  49. 2:04de un científico
  50. 2:06y tratar de obtener un conocimiento
  51. 2:10acerca de biología celular molecular o
  52. 2:12genética a través de un método en el
  53. 2:15cual el científico diseña un experimento
  54. 2:18o varios experimentos en los cuales
  55. 2:20obtiene resultados y que esos resultados
  56. 2:23se pueden generalizar es decir
  57. 2:25transferir
  58. 2:27a todas las especies oan de especies
  59. 2:30entre ellas el ser humano por ejemplo
  60. 2:32realiza experimentos con un ratón y esos
  61. 2:35experimentos dan resultados que pueden
  62. 2:38ser aplicables a otros seres vivos como
  63. 2:40ser el ser humano a este Método en el
  64. 2:43cual a través del trabajo
  65. 2:46científico se realizan
  66. 2:49experimentos específicos con un número
  67. 2:52relativamente pequeño de individuos y
  68. 2:55que se
  69. 2:56generalizan se lo llama método inductivo
  70. 3:01por otro lado cuando nos ponemos en el
  71. 3:04lugar del equipo de salud dentro de los
  72. 3:06cuales está el
  73. 3:08médico el equipo de salud resuelve casos
  74. 3:12particulares es decir resuelve el caso
  75. 3:15de un paciente utilizando conocimientos
  76. 3:19obtenidos mediante la metodología
  77. 3:20científica es decir va de lo general a
  78. 3:24lo particular a este método se lo llama
  79. 3:26método deductivo La idea es que durante
  80. 3:28la cursada
  81. 3:30nosotros nos podamos poner en ambos
  82. 3:33lugares en el lugar del científico y
  83. 3:36poder resolver problemas aplicando el
  84. 3:38método inductivo problemas científicos y
  85. 3:41que nos podamos poner en el lugar del
  86. 3:44médico y podamos resolver problemas
  87. 3:47particulares utilizando conocimientos
  88. 3:49generales Es decir de lo general a lo
  89. 3:51particular utilizando el método
  90. 3:56deductivo continuando entonces
  91. 3:58con el conjunto de temas que íbamos a
  92. 4:01ver en la clase de hoy vamos a hablar de
  93. 4:03los niveles de organización de la
  94. 4:05materia todos ustedes saben que la
  95. 4:07materia tiene distintos niveles de
  96. 4:11complejidad desde el nivel atómico
  97. 4:14pasando por el molecular el nivel
  98. 4:16celular las células se organizan
  99. 4:19secretan matrices extracelular y se
  100. 4:21relacionan con otras células y forman
  101. 4:24los tejidos que es otro nivel de
  102. 4:27complejidad los tejidos a su vez se
  103. 4:29organizan en estructuras determinadas
  104. 4:32llamadas órganos que cumplen funciones
  105. 4:35específicas a su vez los órganos se
  106. 4:38organizan en aparatos o sistemas en las
  107. 4:41cuales los distintos órganos cumplen
  108. 4:43distintas funciones dentro de una gran
  109. 4:46función Entonces estamos en el nivel de
  110. 4:49los sistemas o aparatos de órganos y
  111. 4:52finalmente estamos en el nivel de los
  112. 4:55organismos que podemos hablar cuando
  113. 4:57hablamos de organismos desde un
  114. 4:58organismo unicelular a un organismo
  115. 5:00pluricelular como en el humano en el
  116. 5:02cual podemos estudiar los distintos
  117. 5:05niveles de organización de la materia
  118. 5:06que describimos previamente es decir
  119. 5:08podemos estudiar los sistemas o aparatos
  120. 5:11los órganos que forman esos sistemas o
  121. 5:13aparatos los tejidos que forman esos
  122. 5:16órganos las células y la matriz
  123. 5:19extracelular que forma los tejidos las
  124. 5:23moléculas que forman esas
  125. 5:27células en relación con esos niveles de
  126. 5:30organización de la
  127. 5:34materia trabajan distintas ciencias que
  128. 5:37utilizan distintos instrumentos para
  129. 5:40obtener la información de los distintos
  130. 5:42niveles de organización de la materia
  131. 5:45ustedes pueden ver en el centro de la
  132. 5:48imagen medidas de longitud estas medidas
  133. 5:51de longitud están
  134. 5:53relacionadas con los niveles de
  135. 5:55organización de la
  136. 5:57materia y con el poder de resolución de
  137. 6:00instrumentos ópticos por
  138. 6:03ejemplo a la izquierda ven que dice
  139. 6:05límite del ojo humano el poder de
  140. 6:08resolución del ojo
  141. 6:10humano nos permite diferenciar dos
  142. 6:13puntos que estén separados entre sí por
  143. 6:16100 micrones a esa distancia que separa
  144. 6:20dos puntos que un sistema óptico puede
  145. 6:22determinar como distintos se lo llama
  146. 6:25límite de resolución cuanto menor es el
  147. 6:29límite de resolución mayor es la
  148. 6:31capacidad del sistema óptico en
  149. 6:34discriminar los detalles a esa capacidad
  150. 6:36se la llama
  151. 6:38resolución
  152. 6:40Entonces el poder de resolución de los
  153. 6:43humanos y la capacidad de distinguir
  154. 6:45puntos distintos entre sí y está
  155. 6:49determinado por la distancia mínima que
  156. 6:52separa esos dos puntos y que nos permite
  157. 6:54que lo veamos como distintos Entonces el
  158. 6:58poder resolutivo la capacidad de
  159. 7:01distinguir detalles y el límite de
  160. 7:03resolución en la distancia que separa
  161. 7:06los dos puntos más cercanos que con un
  162. 7:08sistema óptico yo puedo
  163. 7:10diferenciar entonces acá Se observa que
  164. 7:13el límite de resolución del ojo humano
  165. 7:15es 100 micrones es decir 0,1 Mm qué
  166. 7:19significa esto que con el ojo humano
  167. 7:22puedo diferenciar dos puntos que estén
  168. 7:24separados por 0,1
  169. 7:27mm el empleo de los microscopios ópticos
  170. 7:31a la izquierda nos permite distinguir
  171. 7:33puntos que estén separados por 0,2
  172. 7:36micrómetros o lo que es lo mismo por 200
  173. 7:39nanómetros Ese es el límite de
  174. 7:42resolución de los microscopios
  175. 7:44ópticos los microscopios electrónicos
  176. 7:47tienen mayor poder de resolución que el
  177. 7:49ojo humano y que el microscopio óptico
  178. 7:52nos permiten diferenciar puntos
  179. 7:54separados entre sí por hasta 0,2 nanm es
  180. 7:58decir que límite de resolución del
  181. 8:00microscopio electrónico está alrededor
  182. 8:02de los 0,2 nanómetros es decir que el
  183. 8:06ojo humano nos permite ver detalles o
  184. 8:10diferenciar puntos que estén separados
  185. 8:11hasta 100 micrones el microscopio óptico
  186. 8:14hasta 0,2 micrones y el microscopio
  187. 8:17electrónico hasta 0,2
  188. 8:21electrones Qué ciencia utiliza el ojo
  189. 8:25para estudiar la organización del cuerpo
  190. 8:27humano acá pueden ver a la derecha
  191. 8:32anatomía una de las materias que ustedes
  192. 8:34cursan este año es anatomía entonces la
  193. 8:36anatomía les permite estudiar utilizando
  194. 8:40el poder de resolución de los ojos el
  195. 8:43organismo humano en su
  196. 8:45totalidad los sistemas o aparatos y los
  197. 8:49órganos que forman esos
  198. 8:51aparatos la histología es la ciencia que
  199. 8:56estudia los tejidos y para estudiar los
  200. 8:59tejidos utiliza el microscopio óptico
  201. 9:03esto le permite diferenciar dentro de
  202. 9:06los tejidos Cómo están organizadas las
  203. 9:08células y la matriz extracelular ustedes
  204. 9:11van a cursar este año histología en el
  205. 9:13primero o en el segundo cuatrimestre y
  206. 9:15para reconocer Cómo están organizadas
  207. 9:18las células y la matriz extracelular
  208. 9:20para formar un tejido van a utilizar un
  209. 9:23microscopio
  210. 9:26óptico por debajo de los 0 do
  211. 9:29micrómetros
  212. 9:31se encuentran estructuras
  213. 9:34macromoleculares como las proteínas
  214. 9:36algunas
  215. 9:38organelas pequeñas de las células que no
  216. 9:42pueden divisarse entonces con el
  217. 9:44microscopio óptico pero sí pueden
  218. 9:47observarse con la microscopía
  219. 9:48electrónica la microscopía electrónica
  220. 9:51dio inicio a la biología celular es
  221. 9:53decir la ciencia que permite estudiar
  222. 9:56las células con sus componentes entonces
  223. 9:58la copía electrónica fue la que permitió
  224. 10:01el avance de los conocimientos de la
  225. 10:03biología
  226. 10:04celular posteriormente el empleo de
  227. 10:07técnicas de biología de técnicas de
  228. 10:10biología de biología molecular y
  229. 10:12técnicas bioquímicas ha permitido
  230. 10:14estudiar a nivel macromolecular y
  231. 10:17molecular la
  232. 10:19composición y la función de las células
  233. 10:22Este es el campo entonces de la biología
  234. 10:25molecular entonces observando este
  235. 10:27gráfico nosotros podemos ver que la
  236. 10:29anatomía
  237. 10:32estudia el cuerpo humano con su sistema
  238. 10:35o aparatos y sus órganos
  239. 10:38valiéndose de la del poder resolutivo de
  240. 10:41los ojos la histología
  241. 10:46estudia los tejidos Cómo están formados
  242. 10:49los tejidos valiéndose de la microscopía
  243. 10:51óptica en sus distintas variantes la
  244. 10:54biología celular estudia las células y
  245. 10:57también a la matriz extracelular como
  246. 10:59esas células se organizan en el
  247. 11:01organismo y lo hace a través de la
  248. 11:03microscopía electrónica y de técnicas
  249. 11:07que permiten localizar con microscopía
  250. 11:10óptica macromoléculas o moléculas más
  251. 11:13pequeñas la biología
  252. 11:16molecular utiliza técnicas que permiten
  253. 11:20localizar en las células y en los
  254. 11:22tejidos determinados componentes
  255. 11:24químicos y también otro tipo de técnicas
  256. 11:27que sin respetarle estructura que
  257. 11:30estamos estudiando nos permiten
  258. 11:34estudiar la
  259. 11:36composición la función de determinadas
  260. 11:42moléculas acá
  261. 11:44tenemos arriba a la
  262. 11:46izquierda tres fotografías ópticas de
  263. 11:51tejidos observados con un microscopio
  264. 11:53óptico entonces en los cuales el tejido
  265. 11:57ha sido
  266. 12:00coloreado a la izquierda tenemos una
  267. 12:03porción de cavidad bucal donde se
  268. 12:05observa un epitelio estratificado sobre
  269. 12:07un tejido conectivo y que ha sido
  270. 12:09coloreado con hematoxilina y osina que
  271. 12:11es la técnica que ustedes van a utilizar
  272. 12:13a lo largo de toda la cursada de
  273. 12:14histología es la técnica habitual que
  274. 12:17usa un patólogo para identificar la
  275. 12:20estructura de los tejidos en la imagen
  276. 12:22del medio ven un conducto biliar donde
  277. 12:26ven un epitelio simple sobre un tejido
  278. 12:28conectivo y está coloreado con otra
  279. 12:30técnica que es un tricrómico de malori
  280. 12:33que le permite identificar componentes
  281. 12:35de la matriz extracelular como las
  282. 12:37fibras de colágeno que se ven en azul a
  283. 12:41la derecha ven otro preparado de
  284. 12:44intestino donde en color magenta se
  285. 12:47observan los
  286. 12:49componentes formados por hidratos de
  287. 12:51carbono que están en los tejidos
  288. 12:52mediante la técnica de
  289. 12:54paz Estos son cortes que se obtienen de
  290. 13:00especímenes y que pueden apreciarse en
  291. 13:02el microscopio a la derecha tenemos una
  292. 13:06fotografía que se observa también con
  293. 13:07microscopio óptico pero con otra forma
  294. 13:09de visualización llamada contraste de
  295. 13:12interferencia diferencial y con
  296. 13:13coloración que nos permite ver las
  297. 13:16células sin colorear pero también como
  298. 13:19se le ha agregado una coloración vital
  299. 13:21nos permiten ver los cromosomas durante
  300. 13:24la división
  301. 13:25celular por debajo a la izquierda
  302. 13:29tenemos una microscopía electrónica
  303. 13:30donde se observa el núcleo el retículo
  304. 13:35endoplasm las cisternas del retículo
  305. 13:38endoplasmático y en forma y coloreada en
  306. 13:40forma artificial las
  307. 13:42mitocondrias esto es una microscopía
  308. 13:44electrónica de transmisión y a la
  309. 13:47derecha Tenemos también una microscopia
  310. 13:49electrónica donde hace asombrado con
  311. 13:51metales pesados los filamentos de actina
  312. 13:54Entonces estos son ejemplos de fotos de
  313. 13:58microscopia óptica y electrónica que nos
  314. 14:01muestran ejemplos del estudio
  315. 14:04histológico arriba con el microscopio
  316. 14:05óptico y de biología celular con el
  317. 14:08microscopia electrónica en la parte
  318. 14:12inferior Entonces hasta acá vimos
  319. 14:16que los científicos utilizan un método
  320. 14:20inductivo para generalizar conocimientos
  321. 14:24el médico utiliza un método deductivo
  322. 14:27utilizando los conocimientos generales
  323. 14:28para resolver problemas puntuales vimos
  324. 14:31que la materia se organiza en distintos
  325. 14:33niveles de complejidad y que las
  326. 14:35distintas
  327. 14:36ciencias se centran en esos distintos
  328. 14:39niveles de complejidad utilizando
  329. 14:42distintos instrumentos para obtener
  330. 14:44conocimientos en esos niveles de
  331. 14:47complejidad ahora bien cómo es que esas
  332. 14:51ciencias y principalmente la biología
  333. 14:54celular y molecular que es la que nos eh
  334. 14:57atañe en esta usada obtienen esos
  335. 15:01conocimientos
  336. 15:02científicos como dijimos antes utilizan
  337. 15:05un método inductivo es decir el
  338. 15:08investigador se plantea un problema a
  339. 15:11partir de una incógnita que se tiene
  340. 15:14ante los conocimientos
  341. 15:18actuales se plantea una pregunta
  342. 15:21entonces en base a esa pregunta diseña
  343. 15:24una metodología para responder a esa
  344. 15:27pregunta a esa hipótesis
  345. 15:29Y entonces obtener resultados que puedan
  346. 15:33llevar a decir esa hipótesis es cierta o
  347. 15:36es incorrecta obteniéndose de esa forma
  348. 15:39un conocimiento ese conocimiento se
  349. 15:42adquiere a través de la realización de
  350. 15:43experimentos con un número limitado de
  351. 15:47individuos de
  352. 15:49experimentación eso se analiza
  353. 15:51estadísticamente y de acuerdo a esos
  354. 15:54resultados estadísticos uno puede
  355. 15:56generalizar a todos los individuos de
  356. 15:59esa población los resultados
  357. 16:02obtenidos y
  358. 16:04como muchos mecanismos celulares y
  359. 16:08moleculares se conservan durante la
  360. 16:11evolución esos conocimientos obtenidos
  361. 16:15en un determinado animal se pueden
  362. 16:17transferir a la especie
  363. 16:24humana Cómo es que se dan a conocer
  364. 16:29estos conocimientos y y se certifican
  365. 16:32estos conocimientos los conocimientos
  366. 16:35científicos
  367. 16:37se publican en trabajos científicos es
  368. 16:41decir la forma en la cual se obtiene el
  369. 16:46conocimiento científico de la biología
  370. 16:48celular y molecular y de otras ciencias
  371. 16:50es a través de la producción de trabajos
  372. 16:53científicos que se publican en revistas
  373. 16:56científicas las revistas científicas
  374. 16:58reciben los trabajos de los
  375. 17:03científicos estos trabajos los
  376. 17:06administra los evalúa un editor o un
  377. 17:09conjunto de Editores que evalúa si esos
  378. 17:11trabajos son adecuados para la temática
  379. 17:13de la revista si consideran que son
  380. 17:16adecuados para la temática de la revista
  381. 17:18se lo dan a pares Qué son los pares son
  382. 17:23investigadores o científicos
  383. 17:25especialistas en los temas al cual se
  384. 17:27refiere el trabajo que se ha enviado a
  385. 17:29la revista para su publicación estos
  386. 17:32pares analizan el trabajo
  387. 17:35científico y dan un veredicto si la
  388. 17:40metodología es adecuada para responder a
  389. 17:43la pregunta de la hipótesis y la forma
  390. 17:46en que está escrito el trabajo es la
  391. 17:48adecuada Entonces le informan al los
  392. 17:52científicos que enviado del trabajo y a
  393. 17:53los edit al editor que el trabajo es
  394. 17:56adecuado para su publicación
  395. 17:59si no es adecuado se puede rechazar el
  396. 18:01trabajo y no ser publicado por lo tanto
  397. 18:04no adquiere el nivel de conocimiento
  398. 18:07científico también se
  399. 18:09puede se puede pedir a los científicos
  400. 18:12que envían el trabajo que realicen
  401. 18:15modificaciones para que realmente se
  402. 18:18responda a la pregunta original o las
  403. 18:21preguntas que se hacen los
  404. 18:22investigadores a través de la
  405. 18:23metodología
  406. 18:25adecuada en base a eso entonces se
  407. 18:29publica el trabajo científico como
  408. 18:31pueden ver entonces el trabajo
  409. 18:34científico es la forma más adecuada de
  410. 18:37obtener conocimiento debido a que se
  411. 18:40basa en una
  412. 18:42metodología que es reproducible y que es
  413. 18:45crítica es
  414. 18:47de pares y en el trabajo científico se
  415. 18:51debe dar toda la información para que
  416. 18:53otros puedan Reproducir ese trabajo y
  417. 18:55demostrar que es así que realmente lo
  418. 18:59que se aporta es cierto y que permite
  419. 19:02analizar por otros para ver si realmente
  420. 19:05los conocimientos son de esa forma
  421. 19:07entonces la ciencia utiliza el método
  422. 19:10científico en el caso de las ciencias
  423. 19:13biológicas un método inductivo que
  424. 19:16permite generalizar los conocimientos y
  425. 19:18que tiene las características de ser una
  426. 19:20metodología crítica Y
  427. 19:25reproducible cómo está formado un
  428. 19:27trabajo ci
  429. 19:29un trabajo científico está formado por
  430. 19:31un
  431. 19:32título en el cual sintéticamente se dice
  432. 19:36Cuál es el descubrimiento Cuál es el
  433. 19:38conocimiento que se transfiere que se da
  434. 19:42con ese trabajo debajo del título
  435. 19:45figuran los autores que han participado
  436. 19:48en su elaboración las filiaciones es
  437. 19:51decir los lugares de trabajo de esos
  438. 19:53autores
  439. 19:55luego tiene un resumen
  440. 19:58la palabra en inglés es el abstract
  441. 20:00donde
  442. 20:02figura Cuál
  443. 20:04es el tema y la
  444. 20:07incógnita sobre la cual van a
  445. 20:10trabajar Cuáles son los objetivos del
  446. 20:12trabajo Cuál es la metodología que
  447. 20:16utilizan para resolver ese problema
  448. 20:18Cuáles son esos resultados y luego cuál
  449. 20:21es la conclusión o sea en base a esos
  450. 20:23resultados y comparándolo con otros
  451. 20:25resultados de otros trabajos Cuáles son
  452. 20:27las conclusiones que no nos aporta ese
  453. 20:29trabajo todo eso figura en el
  454. 20:33resumen luego del resumen están las
  455. 20:36palabras claves o en inglés keywords que
  456. 20:39son las
  457. 20:40palabras mediante las cuales alguien
  458. 20:43puede buscar ese trabajo y encontrarlo
  459. 20:46Por ejemplo si es un trabajo que quiere
  460. 20:50que se basa en el desarrollo del sistema
  461. 20:52nervioso dos de las palabras clave van a
  462. 20:55ser desarrollo y sistema nervioso y
  463. 20:57después van a tener otras palabras
  464. 20:59claves más específicas por ejemplo de la
  465. 21:01molécula que se está estudiando de la de
  466. 21:04la de la de la célula que se está
  467. 21:06estudiando de la parte del cuerpo que
  468. 21:08está se está estudiando las palabras
  469. 21:11claves entonces son las que nos permiten
  470. 21:13a nosotros Buscar temas en revistas
  471. 21:18científicas entonces título autores
  472. 21:21filiaciones de los autores resumen y
  473. 21:24palabras claves luego tiene una la parte
  474. 21:29de introducción donde se plantea Cuál es
  475. 21:31el conocimiento sobre el tema Cuál es la
  476. 21:33importancia de ese tema y cuál es el
  477. 21:36interrogante que se plantea el
  478. 21:39investigador Cuáles son los objetivos
  479. 21:41que se
  480. 21:44pretenden y en algunos casos se hace una
  481. 21:47breve reseña sobre los resultados
  482. 21:49obtenidos en otros casos no luego viene
  483. 21:53la parte de materiales y métodos donde
  484. 21:55se describe la metodología científica
  485. 21:57que se utiliza para responder esos
  486. 21:58problemas luego vienen los resultados
  487. 22:01donde se describen Cuáles son los
  488. 22:03resultados de la aplicación de esa
  489. 22:05metodología para resolver esos problemas
  490. 22:07que generalmente va acompañado de
  491. 22:10figuras que fundamenten esos resultados
  492. 22:13luego viene la parte de la discusión
  493. 22:16donde indica Qué significado tienen esos
  494. 22:18hallazgos Qué relevancia tienen Y si
  495. 22:21tienen consistencia o no con otros
  496. 22:23trabajos publicados referidos a ese
  497. 22:25mismo
  498. 22:26tema y luego puede tener o no
  499. 22:29conclusiones y perspectivas respecto a
  500. 22:32los hallazgos de este trabajo a
  501. 22:35continuación figura la bibliografía
  502. 22:36donde debe estar citado todas las
  503. 22:38bibliografía mencionada en el trabajo
  504. 22:41luego figuran los agradecimientos ante
  505. 22:43personas que colaboran en elaboración y
  506. 22:46finalmente la declaración de conflicto
  507. 22:48de
  508. 22:50intereses esto se refiere a que el
  509. 22:53investigador no tiene intereses en que
  510. 22:56el resultado le de de una a otra forma
  511. 22:58por ejemplo en las Ciencias básicas
  512. 23:00donde se investigan por ejemplo Cómo son
  513. 23:02los mecanismos moleculares de un
  514. 23:04determinado proceso el investigador en
  515. 23:06general no tiene interés en que el
  516. 23:08resultado de de una forma o de otra en
  517. 23:11cambio en algunos trabajos científicos
  518. 23:13donde se
  519. 23:15evalúa la utilidad de una droga quizás
  520. 23:18el investigador forma parte de la
  521. 23:20empresa farmacéutica que está probando
  522. 23:23ese medicamento entonces hay intereses
  523. 23:27hay conflictos de intereses que deben
  524. 23:30ser declarados para ser tenidos en
  525. 23:35cuenta entonces vimos que el trabajo
  526. 23:38científico es la forma en la cual queda
  527. 23:41afianzado y se da a conocer los nuevos
  528. 23:45conocimientos científicos que se
  529. 23:46obtienen mediante la metodología
  530. 23:48científica vimos Cuáles eran las partes
  531. 23:51de esos trabajos
  532. 23:53científicos hay distintos tipos de
  533. 23:55trabajos
  534. 23:57científicos lo que describimos recién es
  535. 23:59la estructura de un trabajo científico
  536. 24:01clásico de
  537. 24:04de una ciencia básica sí Pero hay otros
  538. 24:07tipos de trabajo por ejemplo estudios
  539. 24:09clínicos donde se prueban por ejemplo la
  540. 24:11utilidad de un sistema de un aparato de
  541. 24:14diagnóstico de una terapéutica
  542. 24:17hay ensayos clínicos que acá figuran
  543. 24:20como clinical trials que son los ensayos
  544. 24:23donde se prueban determinadas
  545. 24:25medicaciones también hay
  546. 24:28descripciones de casos que describen
  547. 24:30casos raros por ejemplo de una patología
  548. 24:33y que no tienen el mismo nivel de
  549. 24:36conocimiento el que aportan porque están
  550. 24:37hablando de un solo caso pero sirven
  551. 24:39como para iniciar el estudio en una
  552. 24:41determinada patología por
  553. 24:44ejemplo cómo se accede a los trabajos
  554. 24:49científicos en internet hay buscadores
  555. 24:52bibliográficos por ejemplo
  556. 24:55pavmed que depende del sistema de salud
  557. 24:57de los Estados Unidos
  558. 25:01cielo
  559. 25:03lilax son distintos buscadores donde yo
  560. 25:07puedo ir a buscar trabajos científicos
  561. 25:10uno Generalmente Busca trabajos
  562. 25:12científicos referidos a un determinado
  563. 25:13tema Entonces cómo es que puede
  564. 25:16buscarlos donde tenemos el buscador se
  565. 25:19ponen las palabras claves Por ejemplo si
  566. 25:22a mí me interesa saber el rol de la
  567. 25:26molécula p50
  568. 25:29en el desarrollo de cáncer de mama
  569. 25:32entonces pongo cáncer de mama
  570. 25:36p53
  571. 25:38evolución o por ejemplo el papel de las
  572. 25:42mutaciones de p53 en la resistencia al
  573. 25:44tratamiento de cáncer de mama entonces
  574. 25:46puedo especificar más el tema entonces
  575. 25:48puedo poner resistencia tratamiento
  576. 25:51cáncer de mama
  577. 25:53p53 pongo las palabras claves y me va a
  578. 25:56aparecer una lista de trabajo
  579. 25:58en los cuales aparecen esas palabras y
  580. 26:01yo puedo leer los resúmenes de esos
  581. 26:05trabajos acá tenemos por ejemplo un
  582. 26:09trabajo que
  583. 26:10encontramos cuyo título es que los mic
  584. 26:14el micro
  585. 26:16rn9 controla el desarrollo
  586. 26:19dendrítico teniendo como blanco Target
  587. 26:22la molécula
  588. 26:24Rest fíjense tenemos el título tenemos
  589. 26:27los
  590. 26:28autores tenemos el abstract acá arriba
  591. 26:32tenemos la revista en la cual fue
  592. 26:35publicado y abajo tenemos las palabras
  593. 26:38claves si este trabajo A mí me interesa
  594. 26:41Y yo lo quiero buscar
  595. 26:44completo puedo ir acá a la derecha e ir
  596. 26:47hacia donde está el trabajo ven acá dice
  597. 26:50dónde está el full text es el link del
  598. 26:53texto completo ahora bien los trabajos
  599. 26:57científicos punto de vista de la
  600. 26:58accesibilidad del lector son de dos
  601. 27:01tipos algunos como dice esto son de
  602. 27:04acceso libre es
  603. 27:06decir la revista publica el trabajo y da
  604. 27:10acceso libre a toda persona que quiera
  605. 27:12Acceder al
  606. 27:13mismo y cómo es que se
  607. 27:16sustenta este trabajo para poder ser de
  608. 27:19acceso libre Los investigadores pagan a
  609. 27:23la revista luego de que ha sido aceptado
  610. 27:27el trabajo para los gastos de
  611. 27:30publicación hay otro tipo de
  612. 27:34trabajos como estos que son accesibles
  613. 27:38solamente mediante suscripción es decir
  614. 27:40no son de acceso libre yo encuentro este
  615. 27:41trabajo que habla sobre la isoformas de
  616. 27:44tau desbalance de las isoformas de tau
  617. 27:47que empeoran el transporte axonal de la
  618. 27:49proteína precursora de amiloide en
  619. 27:51neuronas
  620. 27:53humanas ahora bien si yo pongo acá para
  621. 27:57ver el texto completo me va a aparecer
  622. 27:59la hoja de la revista pero no voy a
  623. 28:02tener acceso a todo el trabajo
  624. 28:05científico tengo que pagar el acceso
  625. 28:08Generalmente las bibliotecas por ejemplo
  626. 28:10las bibliotecas de las universidades
  627. 28:12están suscritas a revistas les pagan a
  628. 28:15la revista Y entonces de esa forma se
  629. 28:18mantiene la revista y el
  630. 28:22acceso de cualquier persona que quiere
  631. 28:24acceder es a través de la suscripción
  632. 28:26institucional
  633. 28:28en este caso Los investigadores no deben
  634. 28:31pagar los investigadores producen el
  635. 28:33trabajo y si es aceptado es publicado
  636. 28:37Entonces los trabajos de libre
  637. 28:39acceso son mejores para el lector pero
  638. 28:43implican un gasto para el investigador
  639. 28:45mientras que los de acceso
  640. 28:48restringido
  641. 28:49son mejores para los investigadores
  642. 28:52porque no requiere el pago de los
  643. 28:54investigadores pero limitan el acceso
  644. 28:56del lector
  645. 28:58Entonces tenemos trabajos científicos de
  646. 29:01acceso libre y de acceso a través de la
  647. 29:06suscripción un tipo de trabajo que yo no
  648. 29:09les mencioné es el de las revisiones las
  649. 29:12revisiones son trabajos donde un
  650. 29:15investigador destacado en un determinado
  651. 29:18tema analiza los trabajos científicos de
  652. 29:20los últimos años respecto a un tema y lo
  653. 29:23actualiza a eso se lo llama revisiones
  654. 29:26cuando ustedes utilizan un libro por
  655. 29:29ejemplo el libro de Biología molecular o
  656. 29:31el libro de genética van a ver que al
  657. 29:33final de cada capítulo está la
  658. 29:34bibliografía en la cual se basa lo que
  659. 29:37está escrito esa bibliografía son
  660. 29:41revisiones y trabajos científicos
  661. 29:45clásicos es decir que cada uno de los
  662. 29:48trabajos científicos que podemos Buscar
  663. 29:50Generalmente aportan uno o dos renglones
  664. 29:53de lo escrito en el capítulo de un
  665. 29:56libro cualquier libro serio entonces
  666. 29:59tiene que tener al final del capítulo
  667. 30:01las bases bibliográficas en las cuales
  668. 30:03se basó que son los trabajos científicos
  669. 30:06de esa forma pueden ver la importancia
  670. 30:08que tienen los trabajos científicos
  671. 30:10porque son la forma en la cual se aporta
  672. 30:13nuevo conocimiento Sí y la importancia
  673. 30:16que tienen los libros que tienen el
  674. 30:18sustento de los trabajos científicos en
  675. 30:21lo que están diciendo Sí por eso es que
  676. 30:24es fundamental utilizar Fuentes bibliogr
  677. 30:27prcticas veraces como son los libros que
  678. 30:31se basan en trabajos
  679. 30:34científicos pasamos entonces a un tercer
  680. 30:38punto que es la metodología científica y
  681. 30:41los modelos
  682. 30:43experimentales como dijimos
  683. 30:47antes en la investigación por ejemplo en
  684. 30:50biología celular y molecular se pueden
  685. 30:53hacer experimentos en animales y los
  686. 30:55conocimientos que se adquieren en esos
  687. 30:56animales se utiliza un número reducido
  688. 30:59de animales los conocimientos que se
  689. 31:00adquieren en ese número reducido de
  690. 31:03animales después se generalizan a toda
  691. 31:05la especie como hay determinados
  692. 31:07mecanismos celulares y moleculares que
  693. 31:09se conservan a través de la
  694. 31:12evolución realizando trabajos en otras
  695. 31:14especies se ha visto que los mismos
  696. 31:17mecanismos moleculares se conservan en
  697. 31:19distintas
  698. 31:21especies esto fundamenta en lo empleo de
  699. 31:24modelos
  700. 31:25experimentales un cular y pluricelulares
  701. 31:29Qué significa esto que para obtener
  702. 31:31conocimiento sobre por ejemplo Cómo es
  703. 31:34el proceso de migración celular yo puedo
  704. 31:37estudiar este proceso en
  705. 31:41células organismos unicelulares en
  706. 31:44organismos pluricelulares
  707. 31:46y algunas de estos resultados pueden ser
  708. 31:52similares la migración
  709. 31:54celular es bastante variable entre
  710. 31:57tintas especies Por lo cual no es el
  711. 32:00mecanismo
  712. 32:01celular más fácil de transferir de
  713. 32:03especie en especie Pero hay otros
  714. 32:05mecanismos moleculares que ustedes han
  715. 32:07estudiado en el cbc Como por ejemplo la
  716. 32:10síntesis proteica o la
  717. 32:13transcripción son procesos muy
  718. 32:15conservados en la evolución y que son
  719. 32:19similares en todos los
  720. 32:21organismos formados por células
  721. 32:24eucariontes entonces experimentos
  722. 32:26realizados con organismos unicelulares
  723. 32:29eucariontes y con organismos
  724. 32:33pluricelulares van a dar los mismos
  725. 32:36resultados y por lo tanto los resultados
  726. 32:38obtenidos en uno de ellos pueden ser
  727. 32:40transferidos a otras especies formadas
  728. 32:44por células
  729. 32:46eucariontes incluso estos mecanismos
  730. 32:49están tan conservados como la vida se
  731. 32:52originó a partir de un solo tipo celular
  732. 32:54y luego se separaron en procariontes y
  733. 32:57eucariontes estos mismos procesos son
  734. 32:59bastante similares en procariontes y
  735. 33:01eucariontes con ciertas diferencias de
  736. 33:04hecho lo que ustedes han leído en los
  737. 33:06libros de biología celular sobre la
  738. 33:09síntesis proteica se han conocido
  739. 33:11primeramente en procariontes porque son
  740. 33:14modelos más simples de estudiar y luego
  741. 33:17han sido estudiados también en
  742. 33:19eucariontes y se ha visto que tienen una
  743. 33:22base común con ciertas diferencias de
  744. 33:25mayor complejidad en los eucariontes
  745. 33:28Entonces esto es lo que permite realizar
  746. 33:32estudios de investigación en modelos
  747. 33:35experimentales luego algunos de esos
  748. 33:37conocimientos se pueden transferir a la
  749. 33:40especie humana por ejemplo se pueden
  750. 33:44probar drogas en animales una vez que
  751. 33:47han sido probadas en animales recién ahí
  752. 33:50se pueden realizar las pruebas adecuadas
  753. 33:53en seres humanos en lo que se llaman
  754. 33:56clinical trials o
  755. 33:59eh trabajos
  756. 34:03e clínicos para pruebas de estas drogas
  757. 34:07Como por ejemplo han sido los realizados
  758. 34:09por ejemplo para las vacunas para el
  759. 34:14covid acá les muestro algunos ejemplos
  760. 34:17de modelos experimentales a la izquierda
  761. 34:20arriba tenemos cultivos de colonias de
  762. 34:24bacterias las bacterias entonces son
  763. 34:27útiles como modelos experimentales para
  764. 34:29estudiar mecanismos moleculares muy
  765. 34:31básicos y conservados en la evolución
  766. 34:34como les dije antes transcripción
  767. 34:37traducción
  768. 34:41eh Y y como y tienen la ventaja de ser
  769. 34:45modelos sencillos porque son seres vivos
  770. 34:49unicelulares y en la cual la célula no
  771. 34:52tiene compartimientos es un solo
  772. 34:54compartimiento entonces es menos
  773. 34:56complejo aumentando en la complejidad
  774. 34:59podemos ver a la derecha organismos
  775. 35:01eucariontes unicelulares como son las
  776. 35:05levaduras en las levaduras por ejemplo
  777. 35:08se han realizado muchos estudios de
  778. 35:10manipulación genética que han
  779. 35:13permitido conocer los mecanismos por los
  780. 35:17cuales se regula el ciclo celular Sí en
  781. 35:21estas células han estudiado por ejemplo
  782. 35:24las ciclinas y las proteinas a cclin
  783. 35:26dependientes que básicamente tienen el
  784. 35:29mismo rol el mismo funcionamiento en
  785. 35:31estas estos organismos unicelulares y en
  786. 35:34los seres
  787. 35:35humanos yendo abajo a la izquierda
  788. 35:38tenemos invertebrados como este gusano
  789. 35:41el c legans que ya es un organismo
  790. 35:46pluricelular entonces aumentamos en
  791. 35:48complejidad con respecto a los
  792. 35:49organismos
  793. 35:51unicelulares Pero dentro de los
  794. 35:53organismos pluricelulares son bastante
  795. 35:55sencillos tien un número específico de
  796. 35:57células que están establecidos
  797. 35:58genéticamente entonces tienen una gran
  798. 36:01ventaja estos animales estos
  799. 36:02invertebrados para hacer estudios
  800. 36:04genéticos en cuanto a la determinación
  801. 36:06de Destino de las células del
  802. 36:10organismo aumentando un poco en
  803. 36:12complejidad nos podemos ir a la
  804. 36:16drosófila melanogaster que es la mosca
  805. 36:18de la fruta en la mosca de la fruta
  806. 36:20también se han realizado estudios
  807. 36:21genéticos muy importantes por ejemplo
  808. 36:24ustedes van a ver en embriología los
  809. 36:26genes ox que son un un tipo de genes
  810. 36:29somió que
  811. 36:31establecen que codifican para factores
  812. 36:34de transcripción específicos y que
  813. 36:37establecen la ubicación de determinadas
  814. 36:41células con determinadas
  815. 36:44características y permiten que
  816. 36:46participan por ejemplo en que en esta
  817. 36:49parte en la parte anterior esté la
  818. 36:51cabeza luego está el tórax Y luego el
  819. 36:53abdomen cuando estos genes están mutados
  820. 36:56por ejemplo se pueden obtener moscas que
  821. 37:00tengan dos tórax O sea que el abdomen
  822. 37:03tenga estructura de tórax Por qué Porque
  823. 37:07estructuras normales pasan a ubicar
  824. 37:09ubicaciones
  825. 37:11anormales estos genes somió tios que se
  826. 37:14descubrieron en la mosca se vio
  827. 37:16posteriormente que también tiene un rol
  828. 37:18fundamental en el en la en la
  829. 37:22adquisición de valor de posición de las
  830. 37:24células en los vertebrados incluso en el
  831. 37:27ser
  832. 37:29humano avanzando en el nivel de
  833. 37:31complejidad de los modelos
  834. 37:33experimentales tenemos a los vertebrados
  835. 37:35por ejemplo este pez llamado zebrafish
  836. 37:38tiene la ventaja de que es transparente
  837. 37:40y
  838. 37:41permite estudiar procesos de
  839. 37:44desplazamientos celulares durante el
  840. 37:46desarrollo y sus y muchos de sus
  841. 37:49hallasgos también pueden ser
  842. 37:50transferidos a los hallazgos del ser
  843. 37:53humano y a la derecha y abajo
  844. 37:57tenemos como los ratones que son junto
  845. 38:01con las ratas las especies más empleadas
  846. 38:03en experimentación porque son mamíferos
  847. 38:05como el ser humano y tienen la ventaja
  848. 38:08de que se reproducen
  849. 38:09rápidamente pueden servir de modelos
  850. 38:12experimentales por ejemplo en este caso
  851. 38:14sirve de modelo experimental el ratón
  852. 38:17para evaluar un cuadro un fenotipo
  853. 38:20llamado vitiligo en el cual hay una
  854. 38:23pérdida de pigmentación en algunas
  855. 38:25regiones del cuerpo esta pérdida de
  856. 38:27pigmentación se deben a falla en la
  857. 38:30migración de una células llamadas
  858. 38:32crestas neurales células de las crestas
  859. 38:34neurales que dan origen a los
  860. 38:36melanocitos que son los que llevan el
  861. 38:38pigmento de la piel y como pueden ver a
  862. 38:42la derecha el ratón tiene el mismo
  863. 38:44cuadro clínico que esta niñita que está
  864. 38:48a la izquierda lo que nos está mostrando
  865. 38:51que los mecanismos celulares y
  866. 38:52moleculares que participan en la
  867. 38:55producción del vitiligo durante el
  868. 38:57desarrollo son similares en el ratón y
  869. 39:00en el ser
  870. 39:02humano con esto
  871. 39:05Entonces les estoy mostrando la utilidad
  872. 39:09de los modelos experimentales para
  873. 39:11estudiar los procesos celulares y
  874. 39:14moleculares que vamos a ver a lo largo
  875. 39:16de la cursada es decir muchos de los
  876. 39:19conocimientos que nosotros vamos a
  877. 39:21discutir durante la cursada se basan en
  878. 39:24trabajos realizados en distintos modelos
  879. 39:28experimentales a su vez los trabajos
  880. 39:32realizados en cada uno de estos modelos
  881. 39:35pueden realizarse con distintos niveles
  882. 39:40de integración y de aislamiento de las
  883. 39:43variables Qué significa variable
  884. 39:46varibles son todos los factores que
  885. 39:48pueden hacer que se modifique una
  886. 39:51respuesta yo puedo por ejemplo comp
  887. 39:53quiero comparar la respuesta en un
  888. 39:55determinado proceso en un grupo Control
  889. 39:59un grupo que no es tratado contra un
  890. 40:00grupo que es tratado con una determinada
  891. 40:02droga entonces comparo ambos grupos y
  892. 40:06veo Cuál es el resultado del empleo de
  893. 40:09una determinada droga veo la diferencia
  894. 40:13comparo yo puedo comparar o investigar
  895. 40:16el efecto de esa droga en
  896. 40:18animales sometidos entonces a estas
  897. 40:21distintas condiciones experimentales
  898. 40:24estos estudios que se realizan en
  899. 40:25animales se llaman estudios inv
  900. 40:28ahora bien yo puedo para lograr
  901. 40:32controlar mejor las variables porque yo
  902. 40:34al trabajar con un animal completo Tengo
  903. 40:36la ventaja que estoy trabajando en las
  904. 40:38condiciones fisiológicas normales pero
  905. 40:40tengo la desventaja que tengo muchas
  906. 40:41variables que pueden influir en el
  907. 40:44resultado que yo estoy obteniendo
  908. 40:45entonces una forma de disminuir las
  909. 40:49variables sobre el comportamiento
  910. 40:51celular es aislar las células de ese
  911. 40:54organismo y realizar cultivos celulares
  912. 40:58entonces puedo hacer proliferar
  913. 41:02células puedo hacer proliferar células
  914. 41:05en cultivos Y tratar esas células con
  915. 41:09esa droga Entonces de esa forma Tengo la
  916. 41:13ventaja de que voy a estar separando
  917. 41:16esas células del resto de señales del
  918. 41:19organismo que pueden estar influyendo
  919. 41:21sobre el resultado y que yo no quiero
  920. 41:24que influyan en el resultado entonces de
  921. 41:27los estudios inv vitro en cultivos
  922. 41:29celulares tienen la ventaja sobre los
  923. 41:31estudios inv vivoo de que
  924. 41:35permiten aislar mejor las variables y
  925. 41:38tiene la desventaja de que me estoy
  926. 41:41alejando del Estado
  927. 41:43fisiológico ahora bien yo puedo estar
  928. 41:46estudiando un mecanismo molecular que se
  929. 41:49produzca por ejemplo en las mitocondrias
  930. 41:51por ejemplo la respiración celular
  931. 41:53entonces puede ser que esa respiración
  932. 41:55celular esté influida por las señales
  933. 41:58entre las células dentro un organismo
  934. 42:00completo o de las señales entre células
  935. 42:04vecinas que están creciendo en un
  936. 42:06cultivo celular entonces puede ser
  937. 42:08ventajoso para mí para para separar
  938. 42:12variables que puedan influir sobre cómo
  939. 42:15se produce el fenómeno el mecanismo de
  940. 42:18respiración celular puede ser útil que
  941. 42:20yo aísle las mitocondrias del resto de
  942. 42:22los componentes celulares a estos
  943. 42:25estudios se lo llama udos libres de
  944. 42:27células en los cuales se produce un
  945. 42:29fraccionamiento subcelular y yo puedo
  946. 42:32trabajar con distintas fracciones de la
  947. 42:35célula tiene la ventaja que separo mejor
  948. 42:39las variables tiene la desventaja que me
  949. 42:41voy alejando cada vez más de la
  950. 42:44fisiología del Estado
  951. 42:48real acá tenemos entonces un ejemplo
  952. 42:52varios ejemplos de estudios sin vivo la
  953. 42:55rata y el ratón como modelos mentales en
  954. 42:58trabajos o estudios inv vivo por ejemplo
  955. 43:00a la izquierda tenemos una rata que está
  956. 43:03ubicada en un lugar donde se está
  957. 43:05evaluando su conducta ante determinados
  958. 43:08estímulos pruebas
  959. 43:10conductuales en el medio arriba se Está
  960. 43:14realizando una operación de una rata
  961. 43:17preñada para extraer los fetos que los
  962. 43:20podemos ver abajo y entonces poder
  963. 43:23estudiar esos fetos por ejemplo en este
  964. 43:25caso estudiar el efecto del alcoholismo
  965. 43:27materno en el desarrollo de los fetos
  966. 43:31por ejemplo acá vemos que el etanol el
  967. 43:32alcoholismo en la rata produce en la
  968. 43:35descendencia una disminución en el
  969. 43:37tamaño de los ratones de de los de las
  970. 43:40ratas de los fetos de
  971. 43:43ratas y finalmente a la derecha tenemos
  972. 43:46ratones transgénicos los ratones
  973. 43:48transgénicos o animales transgénicos son
  974. 43:50aquellos en los cuales se producen
  975. 43:53cambios en el genoma de forma tal que
  976. 43:56este genoma que este cambio se
  977. 43:58transfiere a la descendencia es decir
  978. 43:59que afecta a todas las células o por lo
  979. 44:03menos a las células germinales de forma
  980. 44:05tal que esa modificación genética va a
  981. 44:08estar en las células germinales que
  982. 44:10participen en el proceso de fecundación
  983. 44:12y en la formación de la célula huevo del
  984. 44:15individuo que va a nacer que se va a
  985. 44:17desarrollar en este caso tenemos dos
  986. 44:20ratones en los costados en los cuales se
  987. 44:23ha insertado un gen que codifica para
  988. 44:25una proteína fluorescente verde que es
  989. 44:27inocua Entonces yo puedo ver que en los
  990. 44:31ojos donde se ha expresado esta proteína
  991. 44:34en las células de la retina se ven los
  992. 44:36ojos fluorescentes sí Entonces estos son
  993. 44:41ejemplos de trabajos utilizando modelos
  994. 44:45animales y trabajando realizando
  995. 44:47estudios en vivo yo puedo matar esos
  996. 44:52animales realizar cortes de distintos
  997. 44:55tejidos
  998. 44:57y observarlos al microscopio para
  999. 44:59observarlos al microscopio óptico como
  1000. 45:01el microscopio óptico se basa en el que
  1001. 45:03la luz atraviesa el preparado la muestra
  1002. 45:07Por ejemplo yo corto un pedazo
  1003. 45:09de acá intestino que tengo en la tercer
  1004. 45:12foto de la
  1005. 45:13izquierda tomo intestino corto en
  1006. 45:17segmentos pequeños el intestino para
  1007. 45:19poder observarlo en el microscopio Qué
  1008. 45:21debo hacer primero tengo que conservar
  1009. 45:22la estructura Entonces se utiliza un
  1010. 45:25procedimiento que se llama fijación que
  1011. 45:27mata las células y conserva la
  1012. 45:29estructura después Qué debo hacer
  1013. 45:31cortarlo en fetas chiquitas para que
  1014. 45:33poder observar el microscopio para eso
  1015. 45:35lo tengo que endurecer lo incluyo luego
  1016. 45:38lo corto con un aparato llamado
  1017. 45:40micrótomo que como una fiambrera y me da
  1018. 45:43cortes finitos luego como esos cortes
  1019. 45:47finitos si yo lo observo al microscopio
  1020. 45:49el el tejido es transparente no voy a
  1021. 45:52notar diferencias entre distintos
  1022. 45:54componentes para lograr ver diferencias
  1023. 45:56coloreo sus componentes y entonces puedo
  1024. 45:59observar distintos componentes con
  1025. 46:00distintos
  1026. 46:02colores acá entonces a la izquierda
  1027. 46:05tenemos microscopias ópticas en donde
  1028. 46:08los cortes fueron tenidos de distintas
  1029. 46:10formas donde observo tejidos de un
  1030. 46:12animal que fue sometido a una
  1031. 46:13experimentación in
  1032. 46:15vivo a la derecha tengo cultivos
  1033. 46:20celulares observados con otro tipo de
  1034. 46:23microscopía óptica que me permiten ver
  1035. 46:25como relieve las distintas partes de la
  1036. 46:28célula y que ha sido también coloreado
  1037. 46:30por observar los
  1038. 46:32cromosomas esto es un ejemplo de un
  1039. 46:34trabajo
  1040. 46:36invitro y abajo tengo microscopias
  1041. 46:39electrónicas En las cuales los cortes
  1042. 46:42del tejido han sido observados en la por
  1043. 46:45un microscopio electrónico en lugar de
  1044. 46:46un microscopio óptico lo que me permite
  1045. 46:48observar las organelas o las
  1046. 46:51macromoléculas de esa célula que no
  1047. 46:53puedo apreciar con la microscopía óptica
  1048. 46:56tenemos que tener en cuenta y lo van a
  1049. 46:57ver en histología actualmente hay
  1050. 47:00microscopios ópticos que me permiten
  1051. 47:04observar moléculas específicas y con una
  1052. 47:08gran resolución entonces la microscopía
  1053. 47:11óptica también es Útil para los estudios
  1054. 47:14de biología celular y
  1055. 47:17molecular entonces vimos ejemplos de
  1056. 47:21estudi sin vivo donde puedo observar
  1057. 47:24cortes de los tejidos en los
  1058. 47:25microscopios ópticos o
  1059. 47:28electrónicos acá tenemos los estudios
  1060. 47:30invitros fíjense se toma un pedazo de
  1061. 47:34tejido ese tejido se corta en fragmentos
  1062. 47:37se le pone una solución y
  1063. 47:41se corta ven acá arriba tenemos un
  1064. 47:45émbolo que gira Y entonces
  1065. 47:48destruye el tejido se le agregan
  1066. 47:51Generalmente enzimas que rompen las
  1067. 47:53uniones intercelulares Y entonces se
  1068. 47:56disgrega todo el
  1069. 47:57tejido esto se somete a una pequeña
  1070. 48:00centrifugación que hace que las células
  1071. 48:02vayan al fondo formen un precipitado y
  1072. 48:04arriba quede el líquido estas células
  1073. 48:07luego se pueden poner en una cápsula de
  1074. 48:09petri y se introducen en una incubadora
  1075. 48:14abajo a la derecha donde se conserva la
  1076. 48:17temperatura del cuerpo 37 gr y hay una
  1077. 48:20concentración alta de dióxido de carbono
  1078. 48:22equivalente a la que hay en el interior
  1079. 48:25de nuestro org
  1080. 48:27para realizar este procedimiento debe
  1081. 48:29mantenerse la esterilidad para que no se
  1082. 48:32contaminen con organismos procariontes Y
  1083. 48:35eso se realiza en flujos laminares que
  1084. 48:38está la foto arriba a la derecha donde
  1085. 48:42se mantiene la esterilidad Y entonces se
  1086. 48:45permite favorece el desarrollo de los
  1087. 48:47cultivos los cultivos Entonces se
  1088. 48:49mantienen en las estufas en las
  1089. 48:51incubadoras permitiendo que las células
  1090. 48:54proliferen una vez que proliferan y
  1091. 48:55abarcan todas las superficie pueden otra
  1092. 48:58vez disgregarse y hacerse un cultivo
  1093. 49:00secundario sobre estas células del
  1094. 49:03cultivo primario o del cultivo
  1095. 49:05secundario se pueden realizar
  1096. 49:07experimentos y obtenerse
  1097. 49:09resultados también hay algunas células
  1098. 49:12modificada genéticamente que tienen la
  1099. 49:14capacidad de proliferar indefinidamente
  1100. 49:16y que yo las puedo congelar en un tubo
  1101. 49:19de nitrógeno líquido como el que está
  1102. 49:21abajo a la derecha abajo de la
  1103. 49:24incubadora lo pueden apreciar abajo ese
  1104. 49:27tubo grande donde en nitrógeno líquido A
  1105. 49:30menos 160 gr se pueden conservar por
  1106. 49:33mucho tiempo estas células estas líneas
  1107. 49:36celulares luego cuando quiero
  1108. 49:38utilizarlas de nuevo las descongelo y
  1109. 49:39las cultivo nuevamente Esto me permite
  1110. 49:42entonces realizar experimentos
  1111. 49:45invitro o sea en cultivos celulares Este
  1112. 49:50es un
  1113. 49:51microscopio es invertido se llama
  1114. 49:53invertido porque tiene los objetivos
  1115. 49:54abajo en lugar de tenerlos arriba como
  1116. 49:56de los trabajos prácticos de histología
  1117. 49:58que tienen ustedes que tien los
  1118. 49:59objetivos arriba este tiene los
  1119. 50:01objetivos abajo para poder ver en la
  1120. 50:03parte inferior de la cápsula de petri a
  1121. 50:06las células en cultivo esto es un
  1122. 50:09microscopio óptico invertido que nos
  1123. 50:11permite observar a las células en
  1124. 50:14cultivo y acá tenemos la muestra de dos
  1125. 50:16cultivos celulares arriba a la izquierda
  1126. 50:18un cultivo celular que se observa sin
  1127. 50:20que las células estén
  1128. 50:22tenidas observándola con una
  1129. 50:25modificación de los rayos llamada
  1130. 50:28contrast de interferencia diferencial
  1131. 50:29que me permite observar las células como
  1132. 50:32con relieve Sí y me permite reconocerlas
  1133. 50:36sin necesidad de colorearlas en la
  1134. 50:39imagen que tenemos abajo a la derecha
  1135. 50:41observamos células en un cultivo celular
  1136. 50:44observadas con el mismo tipo de técnica
  1137. 50:46pero las cuales además tienen color yo
  1138. 50:48estoy observando estas células en un
  1139. 50:49microscopio invertido de
  1140. 50:52epifluorescencia es decir que emite
  1141. 50:54radiaciones que al impactar con un
  1142. 50:57fluorocromo hacen que ese fluorocromo
  1143. 51:01emita luz en el en el margen visual de
  1144. 51:07esta forma yo puedo apreciar en estas
  1145. 51:09células en
  1146. 51:12verde el núcleo porque estas células
  1147. 51:17fueron se les ha
  1148. 51:19introducido
  1149. 51:21ADN que codifica para un gen que se
  1150. 51:25transcribe y se traduce en una proteína
  1151. 51:27fluorescente verde Entonces cuando yo lo
  1152. 51:30veo con el microscopio de fluorescencia
  1153. 51:32veo que el núcleo florece porque ahí
  1154. 51:36está esta proteína fluorescente verde
  1155. 51:38que es inocua para el desarrollo para la
  1156. 51:41vida de la célula y por otro lado en
  1157. 51:43rojo veo en el citoplasma un colorante
  1158. 51:46vital vital es que no daña la célula que
  1159. 51:51se une a las mitocondrias Entonces yo en
  1160. 51:54este cultivo celular Estoy Ob and la
  1161. 51:57fluorescencia de una proteína verde y la
  1162. 52:02fluorescencia de un marcador de
  1163. 52:05mitocondrias entonces puedo observar los
  1164. 52:09resultados de la experimentación en
  1165. 52:11estas células en cultivo que pueden
  1166. 52:14haber
  1167. 52:15sido sometidas un
  1168. 52:18grupo al tratamiento con una droga y
  1169. 52:21otro ser un control es decir no se lo
  1170. 52:23somete a la acción de nada y se los
  1171. 52:25compara para ver cuál es el efecto de la
  1172. 52:27droga que estoy
  1173. 52:30estudiando entonces hemos visto estudios
  1174. 52:33sin vivo estudi sin vitro y nos queda
  1175. 52:36por ver los estudios libres de células
  1176. 52:38que se obtienen a través del método de
  1177. 52:40fraccionamiento subcelular el
  1178. 52:42fraccionamiento subcelular es el
  1179. 52:44conjunto de métodos y técnicas que
  1180. 52:46tienen como objetivo obtener fracciones
  1181. 52:48puras o enriquecidas de un determinado
  1182. 52:50componente celular Por ejemplo si vemos
  1183. 52:52a la izquierda vesículas del retículo
  1184. 52:54endoplasmático y ribosomas en el segundo
  1185. 52:57gráfico vesículas de retículo
  1186. 52:59endoplasmático rugoso llamadas
  1187. 53:02microsomas más abajo mitocondrias y
  1188. 53:05lisosomas más abajo
  1189. 53:07núcleos y acá está representado el
  1190. 53:10procedimiento en forma sintética que lo
  1191. 53:13vamos a ver en la diapositiva siguiente
  1192. 53:16Entonces el fraccionamiento
  1193. 53:18subcelular Busca purificar o separar
  1194. 53:21distintos componentes celulares para
  1195. 53:24poder trabajar luego con algún uno de
  1196. 53:26ellos en la etapa uno se produce la
  1197. 53:29ruptura mecánica del tejido por ejemplo
  1198. 53:31a la izquierda tenemos hígado se cortan
  1199. 53:34las porciones de hígado y se la pone en
  1200. 53:36un tubo Y luego se lo tritura en forma
  1201. 53:40mecánica Con este aparato que funciona
  1202. 53:43como émbolo que gira y lo va triturando
  1203. 53:45se puede agregar también enzimas o
  1204. 53:48soluciones con detergentes para
  1205. 53:50facilitar esa disgregación y se forma
  1206. 53:54entonces lo que se llama homogeno que lo
  1207. 53:56vemos en marrón en este tubo de la
  1208. 53:59derecha el homogeno como muestra el
  1209. 54:03gráfico de la derecha tiene mezclados
  1210. 54:07todos los componentes de ese tejido los
  1211. 54:10componentes de la matriz extracelular y
  1212. 54:11los componentes de las células que si
  1213. 54:14fueron tratadas con detergentes se
  1214. 54:15rompieron porque destruyeron las
  1215. 54:17membranas Entonces en ese mismo homogeno
  1216. 54:20tenemos núcleos mitocondrias microsomas
  1217. 54:23que son las vesículas que se forman a
  1218. 54:24partir de la ruptura del ret
  1219. 54:26endoplasmático rugoso y liso tenemos
  1220. 54:28ribosomas Y tenemos componentes del
  1221. 54:31citosol y acá no los dice pero también
  1222. 54:33de la matriz extracelular es decir que
  1223. 54:36hemos realizado el primer paso que es la
  1224. 54:38ruptura del tejido y tenemos todos los
  1225. 54:41componentes del tejido disueltos en un
  1226. 54:44homogeno El Paso siguiente es separar
  1227. 54:48esos componentes Cómo se separan esos
  1228. 54:52componentes mediante un proceso llamado
  1229. 54:54centrifugación diferenci
  1230. 54:57la centrifugación consiste en someter a
  1231. 55:00estos componentes del homogeno
  1232. 55:04a presiones de fuerza gravitatoria mayor
  1233. 55:08que la fuerza gravitatoria normal varias
  1234. 55:12veces mayor de forma tal que los
  1235. 55:14componentes que están en este homogeno
  1236. 55:17se van a ir moviendo hacia el fondo los
  1237. 55:20que tengan mayor densidad los que tengan
  1238. 55:22menos densidad van a quedar flotando
  1239. 55:24entonces la centrífuga hace que gire a
  1240. 55:27gran velocidad el tubo que tiene el
  1241. 55:31homogeno de forma tal que los
  1242. 55:34componentes más densos vayan al fondo
  1243. 55:36los menos densos queden
  1244. 55:42flotando de forma tal que vamos a tener
  1245. 55:44un precipitado pelet que se ve en el
  1246. 55:47fondo de color blanco y un
  1247. 55:52sobrenadante Entonces tenemos el homogen
  1248. 55:55lo sometemos a 1000 fuerzas de gravedad
  1249. 55:581000g durante 10 minutos Entonces
  1250. 56:02obtenemos un pelet de células enteras y
  1251. 56:05núcleos separamos esa porción y nos
  1252. 56:08quedamos con el sobrenadante y a ese
  1253. 56:10sobrenadante lo sometemos a 20.000 g
  1254. 56:13durante 20 minutos y obtenemos otra vez
  1255. 56:16un pellet y un sobrenadante en este caso
  1256. 56:19el Pet que está representado en Rosa va
  1257. 56:22a estar formado por los componentes más
  1258. 56:24pesados de las células que han quedado
  1259. 56:26luego de que se separaron las células
  1260. 56:28enteras y los núcleos que son las
  1261. 56:31mitocondrias los lisosomas y los
  1262. 56:33peroxisomas me quedo con ese pelet
  1263. 56:36entonces ya separé las mitocondrias los
  1264. 56:38lisosomas y los peroxisomas en ese Pet
  1265. 56:40en el pelet anterior me quedé con
  1266. 56:42núcleos y algunas células enteras y
  1267. 56:45ahora me quedo con el sobrenadante y ese
  1268. 56:47sobrenadante lo someto nuevamente a
  1269. 56:49ultracentrifugación Pero esta vez a
  1270. 56:5280,000 ge por más tiempo por una hora y
  1271. 56:54obtengo un pelet que está representado
  1272. 56:56en celeste
  1273. 56:58que en el cual obtengo a los microsomas
  1274. 57:01es decir a las vesículas que se
  1275. 57:02rompieron a partir de los del retículo
  1276. 57:04endoplasmático liso y
  1277. 57:06rugoso me quedo otra vez separo los
  1278. 57:09microsomas para trabajar con ellos y el
  1279. 57:12sobrenadante lo someto a otro periodo de
  1280. 57:15ultracentrifugación esta vez de 100,000
  1281. 57:17G durante 3 horas y entonces voy a
  1282. 57:19obtener un Pet con ribosomas y grandes
  1283. 57:22macromoléculas y un sobrenadante donde
  1284. 57:24tenga otros componentes de del citosol
  1285. 57:27que tenga menor densidad de esta forma
  1286. 57:30obtengo distintas fracciones
  1287. 57:33celulares y Puedo trabajar con esas
  1288. 57:36fracciones celulares en forma
  1289. 57:38aislada cómo sé que esas fracciones
  1290. 57:41celulares son Realmente las que yo
  1291. 57:44busqué lo puedo determinar por ejemplo
  1292. 57:48evaluando la actividad enzimática de
  1293. 57:50alguna enzima que yo sé que está en en
  1294. 57:51una determinada organela por ejemplo si
  1295. 57:53yo quiero saber si la fracción
  1296. 57:54mitocondrial mía Es realmente la
  1297. 57:56fracción mitocondrial puedo agregar un
  1298. 57:59sustrato de la enzima citocromo oxidasa
  1299. 58:04que está en las
  1300. 58:05mitocondrias y el sustrato que le agrego
  1301. 58:08es un sustrato tal que cuando es
  1302. 58:11procesado por esa enzima me va a dar un
  1303. 58:14producto que es
  1304. 58:16insoluble y que lo voy a poder
  1305. 58:18identificar con un determinado color
  1306. 58:19entonces si yo a la fracción la someto a
  1307. 58:22la acción de esta enzima le agrego el
  1308. 58:25sustrato acción de le agrego un sustrato
  1309. 58:28si está la enzima es decir si están las
  1310. 58:30mitocondrias me va a dar el producto
  1311. 58:32coloreado y lo voy a ver si no es la
  1312. 58:35fracción mitocondrial o Hay pocas
  1313. 58:37mitocondrias no voy a obtener o voy a
  1314. 58:40obtener poca cantidad del producto y por
  1315. 58:42lo tanto menor cantidad del color y voy
  1316. 58:45a saber que esa fracción está menos
  1317. 58:47enriquecida en mitocondrias si quiero
  1318. 58:49saber si son los microsomas puedo hacer
  1319. 58:51lo mismo con otra enzima que se
  1320. 58:52encuentra en los microsomas si quiero
  1321. 58:54saber si es el citosol puedo utilizar un
  1322. 58:57sustrato de otra enzima que se encuentre
  1323. 58:59en el citosol otra forma de evaluar si
  1324. 59:02realmente ob
  1325. 59:03obtuve la fracción indicada es observar
  1326. 59:06al microscopio electrónico las
  1327. 59:08fracciones subcelulares por ejemplo a la
  1328. 59:10izquierda tengo fracciones nucleares que
  1329. 59:12yo las reconozco por la
  1330. 59:14morfología en el medio tengo fracciones
  1331. 59:17mitocondriales y a la derecha la
  1332. 59:20fracción microsomal con vesículas con
  1333. 59:22ribosomas del retículo endoplasmático
  1334. 59:24rugoso y otras sin os somas del retículo
  1335. 59:27endoplasmático liso de esa forma
  1336. 59:29entonces confirmo mediante una técnica
  1337. 59:32bioquímica o de microscopía electrónica
  1338. 59:34que realmente he purificado la fracción
  1339. 59:36que quiero y puedo trabajar estudiando
  1340. 59:38una determinada reacción en cualquiera
  1341. 59:41de esas fracciones utilizando entonces
  1342. 59:44una metodología libre de células que he
  1343. 59:48obtenido esos componentes a través del
  1344. 59:49fraccionamiento
  1345. 59:51subcelular otra forma de separar
  1346. 59:55componentes
  1347. 59:57disgregado en la homogeneización es
  1348. 1:00:00utilizar centrifugacion pero con
  1349. 1:00:01gradientes de densidad es decir
  1350. 1:00:06tengo distintas concentraciones por
  1351. 1:00:08ejemplo de sacarosa Y
  1352. 1:00:11entonces los elementos que se
  1353. 1:00:13centrifugan se van a separar dependiendo
  1354. 1:00:17de densidad Entonces por ejemplo los
  1355. 1:00:19microsomas van a quedar más abajo que
  1356. 1:00:23los ribosomas sueltos y las onas más
  1357. 1:00:26abajo todavía Y de esa forma las puedo
  1358. 1:00:28separar o también lo puedo utilizar para
  1359. 1:00:31separar macromoléculas entre
  1360. 1:00:34sí por ejemplo por ultracentrifugación
  1361. 1:00:36con gradientes de sacarosa puedo Separar
  1362. 1:00:39en un tejido
  1363. 1:00:41nervioso las sinapsis los componentes
  1364. 1:00:44pre y postsinápticos de una sinapsis
  1365. 1:00:50química Entonces de esa forma hemos
  1366. 1:00:54terminado de analizar
  1367. 1:00:56la metodología científica en cuanto a
  1368. 1:00:59qué utiliza un método en el cual a
  1369. 1:01:02partir de experimentos con pocos
  1370. 1:01:05animales se puede generalizar a todos
  1371. 1:01:07los animales de la especie Y
  1372. 1:01:11cómo muchos de los mecanismos
  1373. 1:01:13moleculares se conservan en la evolución
  1374. 1:01:16muchas veces se ha visto que esos
  1375. 1:01:18mecanismos se pueden transferir a otras
  1376. 1:01:22especies pluricelulares eso es lo que
  1377. 1:01:25nos permite entonces emplear modelos
  1378. 1:01:27experimentales para adquirir
  1379. 1:01:29conocimientos por ejemplo sobre la
  1380. 1:01:31fisiología del cuerpo humano Entonces
  1381. 1:01:34tenemos distintos modelos desde
  1382. 1:01:37organismos unicelulares a pluricelulares
  1383. 1:01:39que varían en su complejidad y a su vez
  1384. 1:01:42esos modelos los puedo utilizar y
  1385. 1:01:44analizar en distintos niveles de
  1386. 1:01:47complejidad puedo utilizar experimentos
  1387. 1:01:49inv vivo experimentos inv vitro en
  1388. 1:01:52cultivos celulares y experimentos con
  1389. 1:01:55con componentes que separad de las
  1390. 1:01:57células es decir libres de
  1391. 1:02:01células pasamos entonces a ubicarnos
  1392. 1:02:05ahora en la última parte de la clase en
  1393. 1:02:07la posición del Médico hasta ahora nos
  1394. 1:02:10hemos ubicado en la posición del
  1395. 1:02:11científico y hemos hablado de la
  1396. 1:02:13metodología científica ahora Vamos a
  1397. 1:02:16ponernos en el lugar del Médico el
  1398. 1:02:18médico puede solicitar estudios
  1399. 1:02:22complementarios para llegar a un
  1400. 1:02:24diagnóstico sobre la patología que tiene
  1401. 1:02:26el paciente o para también Establecer un
  1402. 1:02:30una predicción sobre la evolución del
  1403. 1:02:34paciente y que pueden ayudar para
  1404. 1:02:37definir Cuál es el tratamiento adecuado
  1405. 1:02:39para ese
  1406. 1:02:41paciente entonces para realizar esos
  1407. 1:02:44estudios se obtienen
  1408. 1:02:46muestras que pueden tener distintos
  1409. 1:02:49orígenes la muestra más común que
  1410. 1:02:52ustedes saben que se utiliza es la
  1411. 1:02:54muestra de sangre arriba tiene Cómo se
  1412. 1:02:56obtiene con una jeringa y una aguja la
  1413. 1:02:58muestra de sangre esa muestra de sangre
  1414. 1:03:00se puede dejar que precipite si se pone
  1415. 1:03:02un anticoagulante se permite que
  1416. 1:03:04precipite entonces abajo van a quedar
  1417. 1:03:05los glóbulos y arriba el plasma o
  1418. 1:03:11puede trabajarse con esa muestra antes
  1419. 1:03:13de que se separen pero en general se
  1420. 1:03:15permite la separación entre los glóbulos
  1421. 1:03:17y el plasma y se puede trabajar con los
  1422. 1:03:18glóbulos o con el
  1423. 1:03:23plasma también se pueden obtener
  1424. 1:03:25muestras para realizar estudios de otras
  1425. 1:03:28ubicaciones Por ejemplo si tenemos algún
  1426. 1:03:32problema relacionado con la sangre con
  1427. 1:03:35los elementos formes de la
  1428. 1:03:37sangre se puede tomar una muestra de
  1429. 1:03:40médula ósea la médula ósea es donde se
  1430. 1:03:41forman los elementos sanguíneos los
  1431. 1:03:43elementos forma de la sangre Entonces se
  1432. 1:03:45puede
  1433. 1:03:46punzar la médula ósea que está en el
  1434. 1:03:50hueso coxal por ejemplo se puede obtener
  1435. 1:03:53una muestra por aspiración en la cual se
  1436. 1:03:55obtienen solas o se puede obtener una
  1437. 1:03:58muestra en la cual se saca un bocado y
  1438. 1:04:00en la cual se puede cortar y observar al
  1439. 1:04:02microscopio Qué diferencia tienen estas
  1440. 1:04:04dos muestras Si obtengo solo células
  1441. 1:04:06pierdo la organización del tejido y
  1442. 1:04:08obtengo las células por separado
  1443. 1:04:10mientras que si saco un tubito de tejido
  1444. 1:04:12yo puedo cortarlo y observar como esas
  1445. 1:04:15células están organizadas en el tejido
  1446. 1:04:17es decir conservo la organización
  1447. 1:04:20tisular se puede hacer por ejemplo si
  1448. 1:04:23hay una persona que tiene acidez se
  1449. 1:04:25puede hacer una endoscopía alta Sí a la
  1450. 1:04:28derecha estamos viendo y se si hay
  1451. 1:04:30alguna lesión se puede obtener una
  1452. 1:04:32muestra de esa lesión una biopsia para
  1453. 1:04:36también poder estudiarlas en el
  1454. 1:04:38microscopio o puedo también obtener
  1455. 1:04:40muestras para hacer
  1456. 1:04:42cultivos cultivos para ver si crecen
  1457. 1:04:45bacterias o cultivos celulares y abajo
  1458. 1:04:47tenemos otro ejemplo de biopsia biopsia
  1459. 1:04:50es una muestra de
  1460. 1:04:52tejido que conserva la estructura
  1461. 1:04:54tisular y entonces permite que ser
  1462. 1:04:56estudiada al microscopio abajo entonces
  1463. 1:04:59tengo la forma en la cual se obtiene una
  1464. 1:05:00muestra de piel para ser estudiada
  1465. 1:05:03también el microscopía
  1466. 1:05:06entonces acá tenemos un esquema
  1467. 1:05:09conceptual sobre distintas técnicas y
  1468. 1:05:13formas de obtención de las muestras
  1469. 1:05:16tanto en el trabajo científico en
  1470. 1:05:19modelos experimentales como a partir de
  1471. 1:05:23pacientes en la consulta Mica
  1472. 1:05:26entonces este esquema conceptual nos
  1473. 1:05:28muestra
  1474. 1:05:30qué se pueden obtener muestras de
  1475. 1:05:32distintas formas de modelos
  1476. 1:05:34experimentales animales que se utilizan
  1477. 1:05:37en un trabajo científico o se pueden
  1478. 1:05:39obtener muestras de un paciente por
  1479. 1:05:42ejemplo obtención de plasma o obtención
  1480. 1:05:44de tejido sí mediante una
  1481. 1:05:47biopsia ahora bien esas muestras que yo
  1482. 1:05:51obtengo yo puedo querer analizarlas
  1483. 1:05:54conservando su forma por ejemplo quiero
  1484. 1:05:57analizar las células la forma los
  1485. 1:06:01componentes celulares o cómo están
  1486. 1:06:04organizadas las células formando tejidos
  1487. 1:06:05y comoo esos tejidos están organizados
  1488. 1:06:07formando las distintas capas de un
  1489. 1:06:09órgano entonces esa muestra puedo tener
  1490. 1:06:12que conservarla por ejemplo biopsias o
  1491. 1:06:15elementos formes de la sangre o células
  1492. 1:06:18de cultivo entonces las tengo que
  1493. 1:06:20obtener fijarlas para conservar su
  1494. 1:06:23estructura si son células
  1495. 1:06:26de la sangre o células de cultivo las
  1496. 1:06:29puedo fijar y observarlas directamente
  1497. 1:06:31al microscopio con o sin coloración si
  1498. 1:06:34son porciones de tejido necesito
  1499. 1:06:37cortarlas para verlas en el en el
  1500. 1:06:39microscopio y las puedo colorear o no
  1501. 1:06:42entonces conservo la estructura para
  1502. 1:06:45observarlas al microscopio es lo que
  1503. 1:06:48tenemos a la izquierda en este gráfico
  1504. 1:06:50donde dice biopsia elementos formes de
  1505. 1:06:52la sangre o células en cultivo
  1506. 1:06:56ahora bien la muestra puede ser que yo
  1507. 1:06:59la quiera utilizar para hacer estudios
  1508. 1:07:01bioquímicos o estudiar alguna molécula
  1509. 1:07:03sin que me importe la localización
  1510. 1:07:06Entonces yo puedo obtener plasma que es
  1511. 1:07:09líquido o obtener un tejido y
  1512. 1:07:11homogeneizar para estudiar la cantidad
  1513. 1:07:15de una proteína la cantidad de una
  1514. 1:07:17enzima o la actividad de una enzima
  1515. 1:07:21entonces a ese material puedo realizarle
  1516. 1:07:24estudios a la homogeno o realizar un
  1517. 1:07:27fraccionamiento subcelular y luego
  1518. 1:07:29estudiar el
  1519. 1:07:30homogeno entonces a la izquierda del
  1520. 1:07:33gráfico tenemos muestras que conservan
  1521. 1:07:36la estructura y las observo al
  1522. 1:07:38microscopio puedo observarlas realizando
  1523. 1:07:41técnicas histológicas o citológicas de
  1524. 1:07:43rutina donde con coloraciones habituales
  1525. 1:07:46puedo obtener poder discernir Cuáles son
  1526. 1:07:49los distintos componentes celulares por
  1527. 1:07:51ejemplo núcleo y citoplasma y la matriz
  1528. 1:07:54extracelular o puedo realizar estudios
  1529. 1:07:57para obtener la ubicación de proteínas
  1530. 1:08:00dentro del
  1531. 1:08:02tejido por ejemplo utilizando la técnica
  1532. 1:08:05de inmunohistoquímica o
  1533. 1:08:07inmunofluorescencia
  1534. 1:08:08mediante estas técnicas yo puedo
  1535. 1:08:10localizar en el tejido la ubicación de
  1536. 1:08:13la proteína que yo quiero estudiar y
  1537. 1:08:17esto lo puedo aplicar para muestras
  1538. 1:08:18provenientes de animales de experimentos
  1539. 1:08:21o de cultivos celulares de trabajos
  1540. 1:08:23experimentales o muestra de tejido de
  1541. 1:08:26humano que se obtuvieron para hacer un
  1542. 1:08:30diagnóstico Por ejemplo yo puedo
  1543. 1:08:33utilizar también técnicas para detectar
  1544. 1:08:35la ubicación de arenes mensajeros en el
  1545. 1:08:38tejido por ejemplo utilizando la técnica
  1546. 1:08:40de hibridación INS situ o
  1547. 1:08:45puedo localizar la ubicación de
  1548. 1:08:47proteínas si yo a un cultivo celular por
  1549. 1:08:50ejemplo o un organismo pluricelular
  1550. 1:08:53sometido a experimentación le agrego los
  1551. 1:08:56genes que codifican para proteínas
  1552. 1:08:58fluorescentes y entonces yo en el
  1553. 1:09:00microscopio de epifluorescencia que es
  1554. 1:09:03un tipo de microscopio óptico puedo
  1555. 1:09:05visualizar la ubicación de esas
  1556. 1:09:06proteínas fluorescentes Entonces el
  1557. 1:09:09esquema en la parte izquierda me muestra
  1558. 1:09:11como conservando el tejido y
  1559. 1:09:13sometiéndolo a distintas técnicas yo
  1560. 1:09:15puedo observar las características de
  1561. 1:09:17las células como están organizadas en
  1562. 1:09:19los tejidos o de las células con sus
  1563. 1:09:22componentes celular celulares como el
  1564. 1:09:24núcleo y el asma o cómo puedo ubicar
  1565. 1:09:27dentro del tejido proteínas o ácidos
  1566. 1:09:32nucleicos y por otro lado a la derecha
  1567. 1:09:36tengo que puedo obtener material que no
  1568. 1:09:39conserve su estructura puedo obtener
  1569. 1:09:42plasma es líquido o puedo hacer un
  1570. 1:09:45homogen y ese
  1571. 1:09:47homogen a partir del homogen puedo hacer
  1572. 1:09:49un fraccionamiento subcelular lo que no
  1573. 1:09:51es muy frecuente en la práctica médica
  1574. 1:09:53es más frecuente en la investig
  1575. 1:09:55o de ese homogeno puedo purificar
  1576. 1:09:58determinadas moléculas por ejemplo ADN
  1577. 1:10:00ARN o
  1578. 1:10:01proteínas Y entonces después puedo hacer
  1579. 1:10:04estudios para analizar esas proteínas o
  1580. 1:10:08esos ácidos nucleicos o puedo estudiar
  1581. 1:10:11por ejemplo funciones enzimáticas
  1582. 1:10:13entonces a partir de esa purificación yo
  1583. 1:10:16puedo realizar técnicas de análisis que
  1584. 1:10:19me permita por ejemplo mediante la
  1585. 1:10:21técnica de electroforesis separar por
  1586. 1:10:24carga eléctrica por tamaño distintas
  1587. 1:10:27proteínas o distintas moléculas de
  1588. 1:10:29ácidos
  1589. 1:10:31nucleicos puedo realizar luego de
  1590. 1:10:34electroforesis otros estudios que me
  1591. 1:10:37permitan
  1592. 1:10:38identificar la presencia y la cantidad
  1593. 1:10:40relativa de ADN mediante la técnica de
  1594. 1:10:43Southern Blood de ARN mediante la
  1595. 1:10:45técnica de Northern Blood o de proteínas
  1596. 1:10:48mediante la técnica de Western Blood o
  1597. 1:10:51puedo utilizar el ADN y amplificar lo
  1598. 1:10:56mediante la técnica de la reacción en
  1599. 1:10:58polimerasa en cadena o puedo purificar
  1600. 1:11:01ARN y mediante una transcriptasa reversa
  1601. 1:11:04producir ADN complementario y luego ese
  1602. 1:11:06ADN amplificar lo mediante la técnica de
  1603. 1:11:08pcr y poder estudiar la presencia o no
  1604. 1:11:12de una determinada
  1605. 1:11:13molécula con estas moléculas purificadas
  1606. 1:11:16Yo también
  1607. 1:11:18puedo puedo manipularla puedo manipular
  1608. 1:11:21por ejemplo los ácidos nucleicos y
  1609. 1:11:23producir moléculas combinantes es decir
  1610. 1:11:26que tengan distintas porciones de
  1611. 1:11:28ADN y que yo puedo después fíjense la
  1612. 1:11:32flecha hacia arriba a la izquierda puedo
  1613. 1:11:34introducir esas moléculas modificadas
  1614. 1:11:37esos ácidos nucleicos modificados en
  1615. 1:11:39modelos experimentales y ver qué efecto
  1616. 1:11:41tiene esas moléculas modificadas en los
  1617. 1:11:44modelos
  1618. 1:11:46experimentales también puedo utilizar
  1619. 1:11:48una técnica que vamos a ver en la
  1620. 1:11:50tercera en la segunda clase que es la
  1621. 1:11:53técnica de Cris parcas que me permite
  1622. 1:11:55producir mutaciones en el ADN de
  1623. 1:11:58individuos o de células para evaluar Por
  1624. 1:12:00ejemplo cuáles son las consecuencias de
  1625. 1:12:02esas mutaciones Entonces en este esquema
  1626. 1:12:06conceptual ustedes pueden ver que en el
  1627. 1:12:09trabajo científico como en la consulta
  1628. 1:12:12médica se obtienen muestras de tejidos
  1629. 1:12:15yo puedo conservar la estructura de esas
  1630. 1:12:17muestras o puedo
  1631. 1:12:19destruirlas en el primer caso puedo
  1632. 1:12:22observar en el microscopio
  1633. 1:12:25la organización del tejido la forma y la
  1634. 1:12:29estructura de las células de la matriz
  1635. 1:12:31extracelular incluso la ubicación y la
  1636. 1:12:34distribución de proteínas o ácidos
  1637. 1:12:37nucleicos a la
  1638. 1:12:39derecha mediante puedo utilizar ese
  1639. 1:12:42homogen o ese plasma para purificar ADN
  1640. 1:12:45ARN o proteínas y realizar estudios de
  1641. 1:12:48esas proteínas esos arns o Esos adns sí
  1642. 1:12:53Y también puedo ular los ácidos
  1643. 1:12:56nucleicos y volver a introducirlos en
  1644. 1:12:59modelos experimentales e incluso
  1645. 1:13:01actualmente se pueden introducir en
  1646. 1:13:04humanos para realizar
  1647. 1:13:08tratamientos por último si nosotros
  1648. 1:13:12analizamos el flujo de la información
  1649. 1:13:15genética Cómo se expresa la información
  1650. 1:13:18genética podemos ir si observamos la
  1651. 1:13:20parte central del gráfico desde el ADN
  1652. 1:13:23pasando por los ARN a las
  1653. 1:13:26proteínas y tenemos distintas técnicas
  1654. 1:13:29que nos permiten
  1655. 1:13:32analizar las moléculas en esos distintos
  1656. 1:13:36niveles de expresión génica por ejemplo
  1657. 1:13:40hay técnicas que nos permiten analizar
  1658. 1:13:42el
  1659. 1:13:43ADN por ejemplo técnicas que nos
  1660. 1:13:45permiten amplificar el ADN tener muchas
  1661. 1:13:48muestras pcr
  1662. 1:13:51qpcr secuenciar es decir obtener la del
  1663. 1:13:57ADN
  1664. 1:13:58reconocer moléculas de ADN mediante la
  1665. 1:14:02unión de dos moléculas distintas por
  1666. 1:14:04complementaridad de bases mecanismo que
  1667. 1:14:06se llama hibridación o puedo modificar
  1668. 1:14:09el ADN mediante técnicas de edición todo
  1669. 1:14:12eso lo pueden ver a la
  1670. 1:14:13izquierda las técnicas que ven a la
  1671. 1:14:15izquierda actúan sobre el ADN y me
  1672. 1:14:18permiten analizar el ADN a nivel de
  1673. 1:14:22genes o porciones de ADN individuales si
  1674. 1:14:25vamos a la derecha en el gráfico donde
  1675. 1:14:28dice
  1676. 1:14:30genoma hay técnicas que me permiten
  1677. 1:14:32analizar todo el genoma o trabajar sobre
  1678. 1:14:35todo el genoma por ejemplo hibridación
  1679. 1:14:37en micromatrices técnicas que mediante
  1680. 1:14:40la hibridación me permiten reconocer
  1681. 1:14:42distintas porciones de todo el genoma Es
  1682. 1:14:44decir de todo el ADN de una célula o de
  1683. 1:14:46un tejido o técnicas de secuenciación
  1684. 1:14:49masiva es decir que me permiten saber la
  1685. 1:14:51secuencia de todo el ADN de todo el
  1686. 1:14:54genoma de una célula o de un tejido
  1687. 1:14:56entonces a la izquierda tenemos las
  1688. 1:14:59metodologías que me permiten trabajar
  1689. 1:15:02sobre el ADN sobre porciones de ADN y a
  1690. 1:15:05la derecha sobre todo el ADN si vamos
  1691. 1:15:08hacia abajo tenemos arns a la izquierda
  1692. 1:15:11técnicas que me permiten trabajar sobre
  1693. 1:15:13moléculas individuales de RN y a la
  1694. 1:15:15derecha transcriptoma que significa el
  1695. 1:15:19análisis del conjunto de ARN de una
  1696. 1:15:22célula o de un tejido Entonces tenemos
  1697. 1:15:25distintas técnicas que me permiten a la
  1698. 1:15:27izquierda analizar
  1699. 1:15:29arns individuales Como por ejemplo RT
  1700. 1:15:33qpcr hibridación insitu nn Blood o
  1701. 1:15:36evitar modificar arns mediante ARN de
  1702. 1:15:40interferencia y a la derecha técnicas
  1703. 1:15:43que me permiten mediante la mediante la
  1704. 1:15:45hibridación o la secuenciación
  1705. 1:15:48masiva seguidas de la retrotranscripción
  1706. 1:15:51es decir Yo puedo purificar ar
  1707. 1:15:53rn utilizar una transcriptasa inversa
  1708. 1:15:56que me convierta ese ARN en ADN y luego
  1709. 1:15:59por hibridación reconocer todos los ARN
  1710. 1:16:03de la célula o del tejido o por
  1711. 1:16:05secuenciación masiva reconocer la
  1712. 1:16:08secuencia de todos los ARN de esa célula
  1713. 1:16:11o de ese tejido por último si vamos a
  1714. 1:16:13las proteínas a la izquierda tenemos las
  1715. 1:16:15técnicas de inmunohistoquímica o
  1716. 1:16:18inmunofluorescencia que me permiten
  1717. 1:16:20detectar una proteína específica en el
  1718. 1:16:22tejido ver su distribución la técnica de
  1719. 1:16:25Western Blood que me permite detectar
  1720. 1:16:27por la reacción antígeno anticuerpo la
  1721. 1:16:31cantidad relativa y el peso molecular de
  1722. 1:16:34una proteína la citometría de flujo que
  1723. 1:16:37me permite separar por ejemplo células
  1724. 1:16:39dependiendo de la presencia de una
  1725. 1:16:41proteína específica la cristalografía de
  1726. 1:16:43rayos x que me permite ver la estructura
  1727. 1:16:46tridimensional de una proteína y la
  1728. 1:16:49espectrometría de resonancia magnética
  1729. 1:16:50nuclear que también me permite reconocer
  1730. 1:16:53la estructura de una proteína eso a la
  1731. 1:16:56izquierda Me permite trabajar sobre
  1732. 1:16:57proteínas individuales a la derecha
  1733. 1:17:00tenemos una técnica que me permite
  1734. 1:17:03investigar el proteoma es decir el
  1735. 1:17:05conjunto de proteínas de una célula o de
  1736. 1:17:07un o de un tejido que básicamente tiene
  1737. 1:17:11dos pasos la electroforesis o
  1738. 1:17:13cromatografía que me permite separar las
  1739. 1:17:15proteínas de un tejido y
  1740. 1:17:18luego de romperlos esas proteínas se
  1741. 1:17:22puede analizar mediante una técnica
  1742. 1:17:24llamada espectrometría de masas que me
  1743. 1:17:26permite analizar y tener el conocimiento
  1744. 1:17:28de todas las proteínas de una célula o
  1745. 1:17:30de un tejido entonces este esquema nos
  1746. 1:17:33muestra que hay técnicas que me permiten
  1747. 1:17:36analizar y manipular el ADN hay técnicas
  1748. 1:17:40que me permiten analizar y manipular los
  1749. 1:17:42arns y hay técnicas que me permiten
  1750. 1:17:45analizar y manipular las proteínas a la
  1751. 1:17:47izquierda tenemos las técnicas que nos
  1752. 1:17:50permiten trabajar a nivel de una sola
  1753. 1:17:52molécula detectar
  1754. 1:17:55sobre una sola molécula de o una porción
  1755. 1:17:57de ADN una rn o una proteína y a la
  1756. 1:18:02derecha aquellas técnicas que me
  1757. 1:18:04permiten Tener información del
  1758. 1:18:08conjunto de las moléculas en una célula
  1759. 1:18:11o en un tejido es decir del genoma del
  1760. 1:18:14transcriptoma o del proteoma sobre
  1761. 1:18:17algunas de estas técnicas es que vamos a
  1762. 1:18:19hablar en la clase siguiente
  1763. 1:18:25entonces para sintetizar los contenidos
  1764. 1:18:28de los cuales hablamos en la clase de
  1765. 1:18:30hoy primero hablamos sobre los niveles
  1766. 1:18:32de organización de la materia y como las
  1767. 1:18:35distintas ciencias utilizan distintos
  1768. 1:18:39instrumentos para estudiar los distintos
  1769. 1:18:41niveles de organización de la materia
  1770. 1:18:44luego hablamos de la metodología
  1771. 1:18:47científica hablamos del método inductivo
  1772. 1:18:50y de los trabajos científicos hablamos
  1773. 1:18:52de los modelos experimentales y de los
  1774. 1:18:55estudios inv vivo invitro y libres de
  1775. 1:18:57células En tercer lugar hablamos de la
  1776. 1:19:00metodología deductiva que utiliza el
  1777. 1:19:03equipo médico para emplear conocimientos
  1778. 1:19:06generales obtenidos por la ciencia para
  1779. 1:19:07resolver casos particulares de los
  1780. 1:19:10pacientes
  1781. 1:19:13y un esquema global de las metodologías
  1782. 1:19:16de estudio de los tejidos células y
  1783. 1:19:20macromoléculas según la forma de
  1784. 1:19:22obtención y procesamiento de las
  1785. 1:19:23muestras
  1786. 1:19:25según el nivel la relación con el nivel
  1787. 1:19:27de expresión génica y en relación al
  1788. 1:19:30número de moléculas
  1789. 1:19:32analizadas Esto entonces resume lo que
  1790. 1:19:35hemos hablado hoy y para la clase
  1791. 1:19:38próxima es decir la segunda clase vamos
  1792. 1:19:40a trabajar sobre las algunas las
  1793. 1:19:43principales técnicas que nos permiten
  1794. 1:19:45estudiar proteínas y ácidos nucleicos en
  1795. 1:19:48forma individual o en forma
  1796. 1:19:52global Muchas gracias a hasta la próxima

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