YT YouTube2Text

YouTube2Text → Transcripts → Precipitacion 1

Precipitacion 1 — Transcript

by Omar Gonzalez Ortega, PhD · 5,864 words · 1,011 segments · language en · Watch on YouTube

Open in transcriber Summarize with AI Download SRT/VTT

Full transcript

0:00[Música]
0:01con esto empiezan
0:04será la unidad 2 del curso que tiene que
0:06ver con precipitación
0:10y está muy centrada está en
0:13precipitación de proteínas
0:18algunas conceptos generales pues se
0:20aplican para atrás vimos la paz
0:22antes de entrar en la presentación y
0:25aquí partimos de la siguiente situación
0:28tenemos
0:30por ejemplo una solución de proteínas
0:37tenemos proteínas están disueltas
0:39solamente después a curso
0:43y lo que queremos es generar un sólido
0:49de proteínas que por lo que parezca
0:53sólida
0:56la flecha al hacer la derecha pues es lo
0:58que se llama precipitación
1:02acá a la derecha pues
1:05sigue aplicando el concepto de
1:06equilibrio se acaba si éstas eran las
1:08moléculas de proteína
1:11a lo mejor te quedan 2
1:13en solución y las otras cinco pues son
1:17las que formaron en soledad
1:20reconociendo pues que
1:23y se sigue teniendo este concepto de
1:25equilibrio
1:27hay una reacción en seco y una
1:30más que el sol
1:33entonces en esta lo que se busca es
1:36tienes una sola fase busca generar la
1:38otra fase
1:41y tener un sistema en equilibrio
1:44eventualmente tomarás el sólido y si no
1:46está completamente puro pues seguirá
1:48avanzando
1:50en el proceso de purificación la ventaja
1:53específicamente proteínas la ventaja de
1:55precipitación es que tú puedes tener
1:56concentraciones muy bajas de proteínas
1:58aquí
2:00pero precipitada así es generar un
2:02sólido que no puedo yo tomar separar y
2:05disolverlo en un móvil en un volumen más
2:07pequeño es decir yo aquí pudiera tener
2:09100 litros de solución
2:13y una vez que yo tomé este sólido pues
2:15yo puedo disolverlo en el volumen que yo
2:17quiera podía resolverlo
2:18en 10
2:223
2:24aumenta rápidamente la pureza de la
2:27proteína aún cuando se estuvieran
2:29precipitando otras proteínas entonces es
2:32muy utilizada
2:34y la precipitación de proteínas
2:37la otra cosa pensar desde el punto de
2:39vista termodinámico como mandamos acá en
2:41dos fases estimó una especie que esta
2:44partición a da entre dos fases
2:47aquí más bien lo que se busca es
2:50necesitamos alcanzar la solubilidad para
2:52que se genere
2:54sólido
2:56y lo otro que sabemos es en general muy
3:00pues todo disminuir la solubilidad si
3:03bajas
3:05y bajas la temperatura entonces una
3:07opción para curar este proceso de
3:09precipitación sería pues baja la
3:11temperatura eso disminuye la solubilidad
3:13o la constante de equilibrio de este
3:15sistema
3:18sin embargo no es práctico como decía en
3:21algún vídeo anterior si tienes
3:23mililitros o 10 mililitros de la
3:25solución pues tendrás que invertir
3:28muchísimo dinero en energía para
3:30disminuir la temperatura y que
3:32precipitará la proteína
3:36eso no es opción entonces desde el punto
3:39de vista económico
3:40recuerden que el agua pues tiene una
3:42capa sea pública gigantesca entonces eso
3:45implica que vas a tener que extraerle
3:48mucha energía
3:50para que baje su temperatura de manera
3:52considerable
3:56bueno entonces en aquí específicamente
3:59vamos a hablar de otra opción que vamos
4:03a descartar esta no que no se puede
4:05hacer si se puede hacer en un producto
4:06pues vale si es económicamente rentable
4:09pues enfría
4:10y aquí no vamos a hablar de ese caso
4:12vamos a hablar de otro caso que tiene
4:14que ver con vas a lograr esta
4:16precipitación pero porque vas a agregar
4:18un agente precipitante
4:22algo que también al final baja la
4:25solidez el concepto del américa no va a
4:27desaparecer tienes que bajar la
4:28sensibilidad de que en este caso de tu
4:30proteína en el líquido
4:32pero entonces aquí lo que voy a estar
4:34hablando en precipitación es esta parte
4:35de vamos a agregar un agente
4:38precipitante
4:40en la mayoría de los casos que revise
4:41tienen que ver con ese principio de
4:43agrego algo y ese algo va a provocar que
4:46la proteína se precipite
4:48veamos ejemplos de eso
4:51como digo está centrado en
4:54en proteínas sin embargo los conceptos
4:57generales siguen aplicando por ejemplo
4:59tú pudieras tener
5:04no va a ser aquí mismo tú pudieras tener
5:09con ácido
5:13con ácido en solución
5:16y el ph pudiera ser tal que ésta
5:19despertó nada podríamos tener nuestra
5:22solución donde está disuelto ese ha sido
5:24un planche 7 y entonces la mayoría de
5:27las especies de ese ácido o la media de
5:29las moléculas tienen esa forma la des
5:31por tomada la que tiene carga por la
5:34especiación tú sabes que también debe
5:36existir la otra especie se lo que a ph 7
5:39pues el número de moléculas que tiene
5:40esa forma es despreciable
5:44que aprendimos en la parte introductoria
5:46del curso o en el cuestionario que
5:48hicimos lo que aprendimos es que el agua
5:50tiene afinidad por lo que tenga dipolos
5:54o por el exceso de electrones entonces
5:57como saben estos dos estas líneas verdes
6:00pues son dos electrones adicionalmente
6:02el oxígeno pues tiene un montón de
6:04electrones ahí libres
6:06lo mismo pasa acá
6:09entonces la molécula de agua
6:12ellas saben que puede interactuar
6:14mantener el tener un dipolo les puede
6:17interactuar
6:22estos pueden interactuar con estos
6:24electrones oeste pueden tratar con éste
6:27lo mismo pasa acá esto este producto
6:30puede interactuar con éste
6:32con el oxígeno
6:34de esa manera es que el agua disuelve a
6:37las dos especies
6:39lo otro que aprendimos también es si
6:41algo tiene carga el agua y si estamos
6:44viendo esta molécula de agua
6:47esta molécula va a tener que decidir con
6:49quién interactuar de estas dos especies
6:5212 de manera preferencial y lo que va a
6:56ocurrir es el agua apreciar interactuar
6:58con la molécula que tiene carga
7:00verdadera sino que en un tracto con la
7:02otra pero en el en el azar en la
7:05probabilidad va a ser mayormente
7:06probable que esté disolviendo a la
7:08especie que tiene cargo
7:12la otra como digo sí sí sí puede
7:14interactuar con lago pero inter actual
7:16de menor manera y ese va a traducir en
7:19en lo siguiente en el concepto de este
7:21de solubilidad de acá
7:24es si tú tienes un ácido si tienes la
7:27especie 1
7:29es muy soluble en agua vas a poder
7:31disolver un montón al de ese material en
7:33agua siempre que el ph este en 7 que
7:35tengas esa especie la solubilidad sube
7:38por la presencia de la carga
7:40y por encontrar la especie 2 que no
7:42tiene cargando
7:44pues también es soluble en agua pero es
7:46sus habilidades menos
7:48el agua es interactúa con ella pero esa
7:52poca afinidad o esa disminución de
7:54afinidad con respecto a la otra especie
7:55detrás se traduce en tiene baja
7:59solubilidad
8:01entonces pensemos que empezamos con este
8:05ph 7 lo que vamos a bajar pues es el ph
8:09vamos a arreglar protones a mi solución
8:12que tiene esta especie mayormente y lo
8:15que sabemos que va a pasar por
8:16especiación es que unas moléculas que
8:18tiene esta forma pues se protón han
8:20toman a esos protones que yo agrego y se
8:22transforman en la otra
8:23entonces lo que estoy haciendo es a la
8:25hora que bajó el platges nos estamos
8:27moviendo a tener esta especie que
8:29llegamos a ph
8:32y por especiación ya sabemos entonces
8:34ahora que esta especie predomina y está
8:37pues prácticamente es despreciar
8:40qué es lo que va a pasar entonces qué es
8:42posible que a la hora que se protón
8:45en el este ha sido que inicialmente
8:47tenía carga se genera la especie
8:50personal que es menos salud y es posible
8:52que se alcance el concepto o se alcance
8:54la solubilidad y se precipiten
8:57entonces un ácido lo puedes precipitar
9:00bajando el ph y ese sería el efecto del
9:04agente precipitante en este caso pues
9:06son los protones que yo estoy
9:07adicionando
9:10a eso se refiere en la parte de arriba
9:15voy a seguir haciendo raya de lo aquí
9:17pero no cambiarme de moxos
9:23se suponga que ahora que tenemos una
9:25mina
9:30ahora tengo algo que es una mina
9:35están
9:36examina esta proto nada
9:42rh 3 más
9:51y lo que implica pues que tenemos un ph
9:53pensemos
9:55que tiene que tener una solución con
9:57esta mina y el ph 11 para que la especie
9:59que predomine sea esa la otra especie
10:01que existe pues es la que no está
10:0612
10:08pero ph 11 pues predominan ésta
10:12y aquí está otra vez el problema de cómo
10:15esa especie tiene carga el agua tiene
10:17mucha afinidad por ella y entonces la
10:19solubilidad es muy alta si quieres
10:20precipitar es quita esa carga y pues
10:23aquí lo que vamos a hacer ahora pues es
10:25bajar
10:26el ph
10:31pensemos que llegamos a h 7
10:35al tenerlo en ph 7 ahora la especiación
10:38establece que la especie que domina es
10:40esta de acá abajo
10:41que ya no tiene que ya no tienen carga
10:46y es posible que si se alcanza esa
10:48habilidad ésta precipite
10:51como esta especie
10:54y entonces sería es igual el concepto es
10:57el mismo elimina afinidad de las
10:59moléculas por el agua y tienes
11:01posibilidad de que se forme un sólido
11:04que alcance la subida de solubilidad y
11:06se precipite esto lo voy a trasladar a
11:09proteínas también pero esto aquí está el
11:10concepto general si tú puedes si la
11:12molécula quieres precipitar tiene carga
11:15y tú se lo puedes quitar una opción es
11:17con esto del ph cortada más adelante
11:19vemos
11:21vemos que otras opciones hay pero
11:23pensamos que responde al ph es pues
11:25quitarle su carga especial el sistema
11:28para que desaparezca esa carga
11:30tenemos probabilidad de que precipiten
11:33entonces ahora sí no
11:37empezamos con esto de precipitación
11:49y aquí está la definición en la primera
11:51viñeta pues lo que decía
11:53las olvidad sabemos que depende la
11:55temperatura pero adicionalmente por lo
11:57que estamos estableciendo que es también
11:58depende del ph de la fuerza y única como
12:01vamos a ver de la constante eléctrica
12:03como vamos a ver también
12:07una situación con las proteínas es que a
12:11la hora que se forman
12:14a la hora que se genera el precipitado
12:17y pudiera pasar que la proteína se
12:20desnaturalice entonces eso no va a pasar
12:23con ácidos orgánicos simples o a minas
12:26simples tú puedes mover el parche al
12:28valor que tú quieras por ejemplo en este
12:29ejemplo del break y puedes generar un
12:31sólido con una proteína la cual es lo
12:34que estamos diciendo esa posible
12:35quitamos si le bajamos si lo vamos al ph
12:38también pudiéramos precipitar
12:42ese proceso de precipitación no puede
12:44ser severo porque
12:48posible que la proteína se desnaturalice
12:52que pierda su estructura terciaria y
12:54forme un sólido que es lo que tú quieras
12:56pero en ese sólido ya se perdió la
12:58estructura parcial
13:00qué implica eso que si tú tomas ese
13:03sólido y quiere seguir procesando ya no
13:06lo vas a poder disolver en agua o en un
13:08solvente acuoso y entonces tú tienes que
13:10poder generar el sólido que no se
13:12desnaturalice la proteína porque
13:13entonces vas a poder tomar el sólido y
13:16disolverlo en otro solvente acosó y
13:18seguir avanzando en la purificación y
13:20eso es lo que está pues aquí en esta
13:22última villa viñeta la gente
13:24precipitante no debe desnaturalizar
13:27y la proteína lo absoluto de interés
13:32las ventajas de la presentación es que
13:34es relativamente sencilla de realizar
13:37se puede hacer de forma continua el
13:39equipo pues es sencillo bastaba con
13:41tener un tanque ahí y estar agregando la
13:43gente precipitante y ahí hay muchas
13:46formas de precipitar hay muchos agentes
13:48aquí están los principios de
13:51precipitación de las proteínas los voy a
13:54revisar todos
13:56el primero del que he estado hablando
13:58ahorita pues es disminuye solubilidad y
14:01tienes estas cuatro opciones agrega
14:04sales cambio el ph agregas ambiente
14:06orgánicos o agrega polímeros no únicos
14:14en esta parte de disminución de la
14:17solubilidad la proteína de interés es la
14:20que se precipita
14:28las contaminantes se buscan que no
14:33las contaminantes permanecen entonces en
14:35solución
14:37de tal manera que cuando separamos la
14:40solución del precipitado del sólido ahí
14:44l en el líquido descartamos el líquido
14:46porque ahí van las proteínas
14:47contaminantes disueltas
14:51en el otro que está acá
14:53desnaturalización selectiva aquí el
14:56concepto de sal revés es
15:00proteínas contaminantes
15:03se precipitan
15:12y la de interés no
15:17el interés permanece en solución
15:20y entonces aquí ahora sigue siendo
15:22precipitación nada más que ahora
15:24precipitamos a las proteínas
15:26contaminantes y como no nos interesan
15:28como son contaminantes por las vamos a
15:30precipitar y las vamos a desnaturalizar
15:31no nos interesa ese sólido sólo nos
15:33interesa eliminarla y en solución va a
15:36permanecer la proteína de interés
15:38entonces cuando separamos la solución de
15:40este sólido pues nos quedamos aquí ahora
15:42con la solución en el caso de arriba es
15:44nos quedamos con el sólido y finalmente
15:48en la afinidad precipitación por
15:50afinidad que tiene que ver con el
15:51reconocimiento molecular que veíamos en
15:53el vídeo anterior
15:55entonces les voy a escribir todos voy a
15:56empezar con un disminución de de
15:58solubilidad
15:59aquí está la representación general de
16:01una proteína
16:04en donde los parches negros que ven ahí
16:08pues son regiones hidrofóbicas
16:10todo esto son residuos región una región
16:15es hidrofóbicas
16:21que como aprendimos son residuos
16:26no ácidos hidrofóbicos
16:29o de cadena lateralidad robótica
16:32ya establecimos que la proteína se
16:34pliega porque tiene que interactuar con
16:37el solvente que es acuoso y tiene que
16:39responder entonces a eso y trata de
16:42exponer los residuos hidrofílicos esta
16:45carga positiva que está aquí o acá pues
16:48representa alicina con residuos de
16:50lisina o arginina
16:53mientras que las negativas
16:57esta vuelta pues son
17:02aspártico glutámico residuos de ácido
17:05aspártico
17:07o ha sido habló tanto
17:10entonces en la superficie de la proteína
17:12están las dos regiones
17:13obviamente estas estas son hidrofílicas
17:15las que son las que tienen carga
17:18lo que está como parches negros son
17:20regiones heroicas todas las proteínas
17:22tienen estas características o esta gran
17:26característica general de existen las
17:27dos regiones en su superficie
17:30también ya aprendimos que si por si hay
17:34otra molécula de proteína acá y también
17:37tiene sus parches hidrofóbicos
17:40y podemos hidrofílicos está mente
17:45el problema es
17:47y éste quiere interactuar con esta
17:50región por efecto hidrofóbico favorecido
17:53por la termodinámica y ahí es donde
17:55entonces se precipitan
17:59entonces
18:03bueno aquí está la instrucción general
18:05específicamente lo que necesitamos es
18:08bajar la solubilidad generar un sólido y
18:12ese sólido se empezaron lo que vamos a
18:14favorecer nosotros es el efecto y de los
18:16fóbicos
18:18para que esas proteínas se empiecen en
18:20un mismo
18:23entonces aquí es no quiero prevenir
18:25porque no quiero que estén en solución
18:27quiero que formen un sólido y que estoy
18:29favoreciendo el efecto ideológico todo
18:32todo eso está relacionado con
18:34disminución de la solubilidad
18:39por otro lado si una proteína tiene más
18:42regiones hidrofóbicas es decir si esta
18:45proteína tuviera más parches
18:50eso se va a traducir en que es más fácil
18:52o se aumenta la probabilidad de
18:56interacción con las otras proteínas
18:59porque tienes más regiones donde
19:01interactuar entonces de manera general
19:04si la proteína es mas hidrofóbica que
19:06hidrofílica se precipita más fácil que
19:08viceversa si tiene muchos residuos
19:10hidrofílicos en superficie y poquita de
19:12ciencia heroicas es más complicado
19:14precipitar
19:17qué es algo de lo que dicen que lo que
19:20dicen está positiva
19:22los métodos para disminuir la
19:24solubilidad son estos cuatro que están
19:26abajo precipitación gonzález
19:28precipitaciones eléctrica y conservante
19:31orgánicos y con polímeros no únicos
19:36en el libro pueden ver diversas teorías
19:41para precipitación qué es lo que está
19:43pasando
19:46voy a describir de manera general las va
19:49a escribir todas por separado
19:54antes de eso entonces podemos aquí a
19:56resistir
19:58ya establecimos que
20:01estamos hablando de proteínas tienen
20:03regiones
20:06y hidrofóbicas misiones hidrofílicas
20:09tiene sacapunta proteína y quieres que
20:12interactúen
20:19ya aprendimos también el concepto de
20:21potencial z
20:22entonces si en él en él
20:24[Música]
20:26si en el conjunto
20:29pensamos que el ph es mayor al punto es
20:32eléctrico de tal manera que en la carga
20:35neta las proteínas tienen carga negativa
20:38neta
20:42y eso favorece que se mantengan
20:44separadas lo que están haciendo porque
20:47el efecto que ya sabemos que está
20:49latente
20:51qué pasa si empezamos a bajar el pecho
20:56si empezamos a bajar el pecho
20:58empieza a disminuir esta carga negativa
21:02cuando el ph es igual al colectivo como
21:05ya sabemos ahora la carga neta
21:08es cero
21:10entonces ya no vamos a tener aquí correo
21:12negativo
21:14ahora la carga neta de 0
21:19y
21:20ya no hay repulsión entonces ahora si
21:23entra el efecto hidrofóbico y se
21:25empiezan a unir entonces en el punto iso
21:28eléctrico la solubilidad de la proteína
21:31es mínima voy a escribir aquí
21:34en el punto iso eléctrico
21:39la solubilidad de la proteína es mínima
21:43no que no pueda ser soluble
21:47si es el doble por qué
21:49sigue teniendo regiones hidrofílicas
21:52hidrofóbicas no se olvide que aunque la
21:54carga de metal sea cero pues suena más
21:56implica que un core box y lo está
21:57negativo y una mina
21:59esta oportunidad
22:02y entonces el agua el agua sigue pueden
22:04interactuar
22:09con este por fuentes de hidrógeno por
22:11ejemplo con la mina
22:13entonces la proteína sigue siendo
22:15soluble en agua pero la solubilidad es
22:18menor en el punto es eléctrico
22:21lo mismo pasa si el ph está por debajo
22:25del punto eléctrico
22:27ahora la carga es positiva
22:37se repelen
22:40pero siento ahora si subimos el ph
22:44hasta alcanzar la misma situación pues
22:47representa lo mismo no importa por donde
22:50llegues si haces que el ph de la
22:52solución sea igual con tus eléctrico
22:54puede provocar precipitación de la
22:56proteína
22:58bueno eso por un lado
23:01por otro lado la siguiente
23:07no vamos a cambiar el ph vamos a hacer
23:10otra cosa entonces tenemos
23:13tenemos nuestras proteínas
23:18disueltas en agua
23:25y como están disueltas pues debe haber
23:26moléculas de agua y cerca e
23:29interactuando con las regiones
23:30hidrofílicas entonces va a representar
23:34como círculos entonces alguna manera
23:36esto va a representar la molécula
23:41y pues están interactuando con residuos
23:45que son hidrofílicos que si tienen
23:47y tienen carga no interactúan con la
23:51región y el folk entonces ahí están las
23:52moléculas de agua disolviendo a la
23:54proteína
23:57si todo este sistema le agregas algo no
24:01está no voy a decir que nada más muy
24:02bien
24:04y luego a representarlos
24:06los rectángulos y perdón por cuadrados
24:10y agregó esas moléculas a la solución
24:14la cosa es que ellas también pueden
24:16interactuar con el agua qué es lo que
24:19ocurre que si eso las moléculas de agua
24:23van a tener que tomar una decisión
24:27o siguen donde están interactuando
24:35cambian su interacción y se vienen
24:37baratas y cancelan está
24:40cancelan esta y prefieren desarrollar a
24:43interactuar con esas moléculas que estoy
24:45agregando
24:47lo que va a ocurrir entonces eso va a
24:49estar favorecido por la termodinámica
24:50porque si esas moléculas de agua tenían
24:53restringido su movimiento a la hora que
24:56se van con las moléculas estás en azul
24:58que en general luego llamar a gente
24:59precipitante
25:04pues está favorecido otra mitad mente y
25:06el problema es que entonces
25:10las moléculas de agua se van a ellos
25:14y voy a aumentar la probabilidad
25:15entonces de que haya otra proteína por
25:18aquí
25:20que también pierda moléculas de agua
25:23porque se fueron a disolver y entonces
25:25éstos ya tienen libertad de interactuar
25:27por efecto hidropónico
25:29entonces los otros los otros principios
25:32de seguridad tienen que ver con este
25:33principio de el agua tiene que decidir a
25:36quién disuelve
25:38y lo que vamos a hacer es agregarle
25:40cosas que sabemos que tienen mucha
25:42afinidad por el agua para que la
25:44proteína salga perdiendo
25:46y se precipite y entonces disminuimos su
25:49seguridad pero bajo este esquema como
25:52dije en el libro hay muchas teorías de
25:54esto lo único que medio me hace sentido
25:57porque es que funciona la precipitación
26:00entonces hablé de esta manera general y
26:04las otras tres tienen que ver con ésta
26:10donde se agrega algo que compite
26:15bueno entonces la primera vez
26:18gonzález lo que vamos a agregar ya
26:20sabemos que el agua tiene mucha afinidad
26:22por cosas que tienen carga y que son
26:24pequeñas entonces si tenemos una
26:26solución de proteína y le empezamos a
26:28agregar sales
26:30pues vamos a hacer que se precipite que
26:32alcance la solubilidad y se precipiten y
26:35aquí en esta gráfica en el eje
26:39en el eje y está la solubilidad de
26:42alguna proteína
26:43y aquí está la concentración de sal que
26:46yo agrego en la parte inicial de la
26:50de la cuerda no me interesa
26:54la sólida no se te olvide que es un
26:56concepto de equilibrio termodinámica tu
26:59concentración real de proteína pues es
27:01menor porque no en tu solución origen
27:04alguno tienen salida entonces vamos a
27:06pensar que aquí está esta es mi
27:08concentración de proteína
27:11en solución
27:14t
27:17yo no además tengo una fase
27:20entonces no hay pudiera disolver más
27:23proteína en esa solución
27:27hasta alcanzar pues este límite que
27:29sería la suní bilidad además que no
27:31puede hacerlo que la proteína producida
27:33iba a ser la concentración que sea iba a
27:35ser su alumno
27:37entonces que lo que persigue es tú la
27:39quieres precipitar
27:41pero estás muy vez estás muy lejos de la
27:43solubilidad
27:46entonces lo que vamos a hacer vamos a
27:47empezar a desplazarnos aquí tenemos 0
27:49sal y vamos a empezar a agregar sal
27:53no me interesa esta parte donde va
27:55subiendo locura pensemos lo que va a
27:57pasar es como ven empieza sobre la
27:59seguridad no voy a explicar bourguet lo
28:01que me interesa es de esa línea cortada
28:03que está ahí ya cuando llegas a este
28:05nivel de sal y sigues aumentando sigue
28:08desplazándose acá la solubilidad empieza
28:11a disminuir
28:14sigues aumentando y sigue bajando
28:17más a la más baja por esta competencia
28:20de la sal por las moléculas de agua y
28:22llegamos aquí exactamente donde la
28:25solubilidad es la concentración de mi
28:27proteína por entonces alcance de
28:29condiciones de equilibrio o de
28:31saturación agregando un agente
28:33precipitante
28:36en ese punto a lo mejor se genera un
28:38cristal de proteína pero queremos que se
28:42genere más seguimos agregando conseguido
28:45y la solubilidad entonces sigue bajando
28:50entonces pensemos que llegamos aquí es
28:53la salud qué implica eso que en solución
28:56ya nada más tengo este nivel de
28:58concentración
29:00llenos de concentración final pero es en
29:03la solución es decir
29:07la diferencia entre estas dos líneas
29:10pues representa proteína que se tiene
29:13que precipitar
29:17concentración de proteína en solución
29:20empezó en este valor aquí y lo bajaste
29:24hasta acá es forzosamente implica que se
29:27tuvo que haber precipitado sino como
29:28diablos bajamos la concentración
29:31mientras más sal agregues pues más
29:33material precipita
29:36si sigues avanzando pues más material si
29:41llegas hasta acá pues más material
29:42precipita
29:44y así funciona la precipitación con
29:46sales
29:52y aquí está lo del potencial z que busca
29:56explicar qué es lo que está pasando
29:57desde ese punto de vista esta positiva
30:00ya la vimos dijimos que la proteína
30:02puede tener cierta carga que le dé
30:04estabilidad pero también ya vimos que se
30:07genera este algo
30:09de protección
30:11que está representado acá donde hay todo
30:13este desbalance que hay en la región con
30:16un desbalance de cargas o con un voltaje
30:19pero también en la presentación anterior
30:21de introducción pues establecida de
30:24establecía que si empiezas a agregar un
30:26exceso de iones
30:29pues esta región empieza a disminuir
30:31se hace cada vez más pequeña
30:35y más pequeña y más pequeña hasta que
30:37desaparece y entonces ahora si entra el
30:40efecto hidrofóbico
30:41también desde el punto de vista este
30:43potencial se está se puede explicar cómo
30:46es que funciona o por qué funciona la
30:48precipitación con sales
30:50aun cuando las proteínas puedan seguir
30:53teniendo cal
30:54el mecanismo no voy a hablar
30:57el efecto hidrofóbico ya lo lo
31:00establecimos en la introducción tampoco
31:02lo voy a hablar
31:05aquí trata de explicar cosas no voy a
31:07entrar en estos detalles esto todo está
31:09en el libro
31:12lo que sí vamos a ver es como
31:14representamos matemáticamente
31:17el proceso este de precipitación
31:20y lo que vamos a utilizar es la ecuación
31:22de con que faltan cosas desde el
31:25logaritmo de las unidades a menos
31:28una
31:31una constante por la concentración de
31:34sal esta curva o este modelo de con
31:38representa
31:42aquí no
31:45representa esta parte de la cueva donde
31:48la seguridad empieza a disminuir
31:53este acuerdo está representado por el
31:55modelo de com
31:59el que es logaritmo de las unidades un
32:02parámetro a un parámetro n por la
32:04concentración de sal que está acá
32:07elige logarítmicas serías estos son
32:11parámetros de ajuste del modelo de corte
32:16que tendrás que terminar
32:18experimentalmente como siempre o alguien
32:20más ya lo hizo y podrás tomarlo y
32:21predecir pues qué concentración que
32:24cuánto sólido puedes generar en función
32:26de la concentración de sal que adiciones
32:29el modelo es muy sencillo
32:32y aquí aquí hay datos experimentales
32:37de lo del modelo del modelo
32:43y aquí si estás en coordenadas
32:44logarítmicas entonces deberías obtener
32:46una línea recta como ven los datos de x1
32:50'no lasa
32:52de una enzima está de aquí pues como ven
32:55si sigue un comportamiento lineal
32:58la otra pues la otra más o menos digamos
33:01que lo sigue en ciertas regiones no si
33:02estás aquí por ejemplo
33:05pudieras hacer el modelo ya que es un
33:09modelo muy sencillo muy utilizado
33:12y la otra cosa importante que está aquí
33:13es aquí si hay valores de concentración
33:15de sulfato de amonio nada más para que
33:18vean estamos hablando de concentraciones
33:20altísimas entonces mientras más abajo
33:23está la curva tomamos este punto de kim
33:25más estamos precipitando y como ven
33:28andamos cercanos a 2.8 molar de suelo
33:31para tramo no es un montonal de sal
33:35e
33:38esto de aquí no recuerdo qué es
33:46aquí hay información que tiene que ver
33:48con lo que explicado acá
33:52si tú tienes si tú tienes este es tu
33:56nivel de concentración de proteína en tu
33:59solución
34:05y empieza a agregar sal sal y entonces
34:07empiezas a moverte aquí pero en todos
34:10estos puntos pues tú ves que tu solución
34:12no cambia sigue sigue teniendo proteína
34:14soluble entonces tú no vas a ver que se
34:16genera sólido hasta que no llegas aquí
34:19entonces la solubilidad no cambio
34:23aún hasta ese punto a partir de ahí si
34:27agregas más si ves que se genera un sol
34:30entonces todo acá pues no sirvió
34:34tienes que llegar a este punto y más más
34:38adelante para que se genere más sólida
34:39no nada más un cristal
34:42es lo que está representado aquí
34:43entonces tienes esa región dónde
34:47aquí está graficado a la concentración
34:48de una enzima así como hice la raya
34:51lleva ya entonces tu concentración le
34:53agrega sal cambias
34:55el sulfato money y pues tú ves que tu
34:58concentra siempre no cambia sigue siendo
35:00la misma no ha generado un sólido para
35:02que baje a partir de aquí
35:05si tú agrega sal vez que la
35:07concentración disminuye porque estás
35:09generando un sólido entonces lo que está
35:10representado aquí entonces ahí hay
35:13varias curvas y como ven pues aquí ya
35:16donde hay precipitación pues sigue la
35:18ley de con una línea recta
35:25qué es más efectivo para precipitar es
35:27lo que presentamos esta estadía positiva
35:30aquí faltan los signos todos
35:37aquí están categorizados los cañones
35:39quién es mejor para precipitar y por qué
35:42quieren las cargas aquí están los
35:43cationes
35:47obviamente si aceptamos el hecho de que
35:50el agua prefiere disolver cosas con
35:52carga y que sean pequeñas pues el
35:54citrato debe ser mejor porque tiene
35:56menos tres teclas
35:59entonces mientras más carga tengas es
36:01mejor precipitante
36:03y mientras más carga aún cuando tienes
36:06carga como jon cloruro pues tienes poca
36:08carga y precipitas pero vas a eso se va
36:11a traducir y vas a necesitar agregar
36:13muchísimo cloruro de sodio para
36:15precipitar una proteína
36:18los iones pues ahí están el amonio es
36:21mejor que el potasio y el potasio es
36:23mejor que el sodio
36:24puesto que estamos hablando de
36:26concentraciones altísimas como ven acá
36:30necesitamos una sal que sea barata
36:32porque vamos a consumir muchísimo
36:35es lo que dice por aquí la sal que se
36:37abaratan
36:40y también de manera general se añade sal
36:43en forma sólida en el laboratorio
36:44eventualmente van a hacer una práctica
36:46espero
36:47donde agregan sulfato de amonio para
36:49precipitar pero lo hacen
36:53en forma sólida se agrega la sal
36:55directamente sobre tu solución no tiene
36:57caso preparar una solución de sulfato
36:59amonio y agregarse la solución de
37:01proteína
37:03por qué por qué por si tenías una
37:05concentración baja
37:09y pensemos que estamos
37:11no en esta línea roja estamos más abajo
37:13nuestra comunicación está aquí
37:16andamos bien abajo
37:18estamos muy diluidos y si todavía va a
37:20entrar más agua por la adición de
37:22sulfato mónico se va a diluir todavía
37:24más y entonces en lugar de estar aquí
37:26pues ahora está más abajo y va a tener
37:29que agregar más sal para que veas
37:30precipitación entonces tiene sentido
37:33agregar la sal
37:35en forma sólida la solución va a
37:38perturbar el volumen porque son
37:40concentraciones altísimas de sal pero
37:42eso es otra historia
37:46entonces la sal más barata pues es lo
37:49que se utiliza para como fertilizante y
37:51ese es el
37:53sulfato
37:55de amonio entonces es el mejor canción
37:58para precipitar y es el tercer mejor año
38:01pero es más barato que si usáramos y
38:04trato de sodio o alguna otra sal que
38:06creas que está mejor esté pues sí pero
38:08es más caro entonces generalmente se usa
38:11el sulfato de amonio por esa razón
38:14bueno precipitación hizo eléctrica y
38:17hablé de esto
38:20y aquí está otra vez la tabla
38:23necesitas mover el ph de la solución al
38:25punto eléctrico y realizar para que se
38:27precipite y otra vez tiene que ver pues
38:29con el potencial se está aquí si estás
38:31experto en la anterior era yo perturbó
38:33esta capa agregando iones aquí ahora
38:37vamos a hacer la perturbación
38:38directamente sobre la carga la vamos a
38:41quitar
38:42la carga neta hacia cero y para
38:44desaparecer el halo de protección
38:47y esto no voy a hablar de esto sí
38:51aquí está el efecto aquí está
38:54también solubilidad
38:57y contra el ph acá abajo está el ph de
39:00la solución
39:03y esta gráfica do como si fuera
39:05solubilidad pero dice aquí fracción de
39:07proteína no precipitada es decir
39:13el 1 representaría que la proteína está
39:16completamente soluble
39:21entonces
39:23he aquí entonces conforme mueves el ph
39:26si empiezas por ejemplo en ph uno
39:29la curva ni siquiera llega ahí entre
39:31toda la proteína está su alumno empieza
39:34a aumentar el ph empezar a sacar en
39:37algún momento tocas a la curva está
39:41llegamos a este pecho y tenemos este
39:43punto
39:47ahí abajo entonces la solubilidad ya no
39:51ya no está disuelto el 100% ya nada más
39:55está disuelto aproximadamente
39:5770%
40:00de lo original que había alcanzado la
40:03solubilidad se representaría la
40:04solubilidad de proteína a s&p 2.3 quien
40:08sigue moviendo el ph y la solubilidad
40:11sigue bajando entonces
40:16te estás moviendo sobre esta curva pues
40:18va subiendo el ph y está bajando la
40:21solubilidad
40:23sigue bajando
40:25y como ven hace un mínimo
40:29aquí hace un mínimo y luego la salida de
40:31empieza a subir
40:36por qué pasa esto pasa por lo que ya
40:38establece aquí en el punto es eléctrico
40:40la proteína tiene carga cero y su
40:42solubilidad es mínima si puede
40:44disolverse pero baja mucho la
40:46solubilidad si te mueves hacia arriba la
40:48carga es negativa y pues y favorece la
40:51interacción con el agua y sube su
40:53solubilidad si la carga es positiva es
40:55exactamente lo mismo el lago no tiene
40:57distinción entre cargas positivas son
40:59negativas es lo mismo para él y entonces
41:02también sube la solubilidad los tenemos
41:04para acá de solubilidad tenemos para con
41:07su sensibilidad quieres precipitar
41:09proteínas pues no el ph concéntrico esta
41:11proteína está aquí pues tiene un punto
41:13eléctrico
41:15más o menos de lo que se ve ahí en 4.6
41:22bueno
41:24ahí están esta parte
41:28de la navarro quiere explicar otra cosa
41:32supongan que tú tu solución de proteínas
41:36tiene este nivel de concentración
41:41tú tienes esa concentración y empiezas a
41:43subir el pecho
41:45lo que va a pasar es que cuando llegues
41:47aquí a este punto se va a generar el
41:49primer cristal de proteína si sigues
41:53avanzando empieza a bajar tu
41:55concentración empieza a moverse hacia
41:57abajo
41:58conforme te vas desplazando por esa
42:00línea y está disminuyendo la
42:02concentración de proteína soluble porque
42:04estás generando un sólido
42:07y llegas hasta este punto ya tienes
42:09mucho sólido tu nivel de proteína pues
42:11es ese pero si continúa subiendo el ph
42:15lo que vas a ver es que los cristales
42:16empiezan a desaparecer porque estás
42:19utilizando cada vez más más y llegaría a
42:22sadam una condición entonces haciendo
42:25este ejercicio en ph bajo y su vez
42:26empieza a subir ves que tener un sólido
42:28muchos sólidos son visuales pero luego
42:30empecé a ver que empieza a consumir el
42:32sol y otra vez se tiene una solución
42:37donde nada más hay que moverlo hasta el
42:38punto es eléctrico
42:40otra situación qué pasa si tu
42:42concentración de proteína está aquí
42:46es este valor
42:48y empieza el ph y empieza a muerte todo
42:51lo que quieras aunque el pecho llega
42:53hasta acá nunca tocas la curva de cardio
42:55y ese empleo no se va a precipitar por
42:58esta técnica
43:00esta proteína de aquí es muy hidrofílica
43:09entonces funciona no va a funcionar pues
43:12para todos va a depender de qué
43:13concentración tienes
43:17bueno
43:18esto ya lo sabemos aquí está la parte
43:21estado que digo de que hay proteínas que
43:23tienen sólo vida considerable aún cuando
43:25se encuentran en su punto se le pescó y
43:27no las vas a poder precipitar con esta
43:29técnica
43:33bueno entonces gustas por sus ácidos si
43:37tienes con el ph ácidos o base es que
43:39sean baratos ellos en general pues son
43:42baratos se consumen para muchas cosas
43:50yo creo que este vídeo lo vamos a
43:53terminar aquí
43:55que ya se hizo muy largo lo único que
43:58voy con voy a concluir con los
44:00siguientes
44:03para estos dos que hemos visto
44:08en este que vas a agregar sales y el
44:11agua va a preferir y zelaya y va a
44:13favorecer que entre el efecto y el
44:15fóbico esa unión debe ser suave como ya
44:19dije
44:21no sé si ya lo buscan
44:23entonces vas a favorecer el efecto vas a
44:26pagar favores después que al chocar las
44:27moléculas de proteínas se queden unidas
44:29porque le estoy quitando moléculas de
44:31agua que están yendo a disolver el
44:33factorial amonio
44:37si ese choque
44:41es muy severo la proteína se
44:43desnaturaliza abre su estructura y
44:46pierde su estructura tercera se va a
44:48generar un sólido pero como ya dije no
44:50lo vas a poder de disolver y entonces
44:54este proceso de precipitación debe ser
44:56un proceso usual lo mismo pasa aquí con
44:59el ph si te empiezas así si tú empiezas
45:01con tu solución y pensamos que estamos
45:04pero tenemos un ph 7
45:07y entonces lo que vamos a agregar es ha
45:09sido para movernos hacia acá
45:12esa adición de ácido tiene que ser
45:14gradual si de golpe
45:16un montón de ácido para que el ph esté
45:18aquí esa adicción brusca de protones que
45:23para bajar el ph va a hacer que los
45:26choques entre las moléculas de proteínas
45:27sean muy severos hasta el punto que se
45:30puede desnaturalizar
45:33que entonces estos procesos deben ser
45:36suaves sino desnaturalizadas a la
45:38proteína de interés con eso terminamos
45:41este vídeo y vamos a comenzar el
45:43siguiente con precipitación con
45:44solventes

About this transcript

This page contains the full transcript of Precipitacion 1 by Omar Gonzalez Ortega, PhD, generated from the public captions YouTube serves with the video. The transcript has 5,864 words across 1,011 segments, with the original timestamps preserved so you can click any line to jump to that moment in the embedded player.

What you can do with it

Use the transcript to take notes, quote the speaker, build a study guide, generate a summary with ChatGPT or Claude via the YouTube Summary tool, or export it as a timed subtitle file with YouTube to SRT. You can also re-open it in the transcriber to translate the transcript into 100+ languages.

Free YouTube transcript tool

YouTube2Text is a free YouTube transcript generator — no signup, no daily limit. Paste any YouTube link and get the full transcript instantly, with timestamps, click-to-jump, translation to 100+ languages, AI prompts for ChatGPT, Claude, and Gemini, and exports to TXT, SRT, VTT, or Markdown.