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8 Anticuerpos y vacunas — Transcript

by Aída Jimena Velarde Salcedo · 21,736 words · 3,721 segments · language en · Watch on YouTube

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0:10Hola, bienvenidas y bienvenidos a otro
0:12video del curso Diseño de
0:14Biofarmacéuticos.
0:15En esta sesión hablaremos de dos tipos
0:19eh de productos biotecnológicos que se
0:21aplican en la medicina eh y que de hecho
0:24pues forman parte eh yo creo que de los
0:26grupos más representativos o con más
0:28relevancia en la industria farmacéutica
0:31eh y en los que se aplica la
0:33biotecnología, que son los anticuerpos y
0:35las vacunas. Eh los estoy eh agrupando
0:39porque pues son de las plataformas eh
0:41más influyentes en los últimos años. Eh,
0:44y también porque ambos comparten eh un
0:46origen inmunológico, ¿no? Eh, los
0:49anticuerpos eh son eh proteínas o eh que
0:53en este caso pues se aplica a la
0:55biotecnología para eh diseñarlas,
0:58explotar sus propiedades para intervenir
1:01directamente en procesos patológicos
1:03como el cáncer, enfermedades autoinmunes
1:06eh o algunas otras eh infecciones.
1:09En contraste, las vacunas están
1:11orientadas principalmente para la
1:13prevención de enfermedades,
1:14especialmente enfermedades infecciosas,
1:16aunque ahorita vamos a ver que puede ser
1:17para otro tipo de enfermedades y que
1:20generan también una respuesta
1:21inmunológica, eh una respuesta
1:23inmunológica protectora y de memoria
1:25antes de la usualmente antes de la
1:27exposición del agente causal, aunque de
1:29nuevo también vamos a ver que se pueden
1:31utilizar eh vacunas terapéuticas.
1:35En la actualidad, ambas plataformas
1:37convergen en un mismo ecosistema
1:39tecnológico, podríamos decirlo así, que
1:41es la posibilidad de manipular genes,
1:43proteínas y células para eh pasar de
1:46productos derivados directamente de
1:48organismos vivos a moléculas diseñadas
1:50eh de manera intencional con propiedades
1:53optimizadas.
1:57Primero vamos a hablar de los
1:58anticuerpos, que si recordamos eh la
2:01gráfica inicial del video anterior con
2:04el que comenzamos la unidad dos, donde
2:06hablábamos de cómo podemos clasificar a
2:07los medicamentos biotecnológicos o cómo
2:09los podemos agrupar dependiendo del tipo
2:11de moléculas y las aplicaciones
2:13terapéuticas. Decíamos que los
2:15anticuerpos y particularmente los
2:18anticuerpos monoclonales eran el grupo
2:20de biofarmacéuticos que más eh
2:23aplicación tiene la medicina. de la cual
2:26tienen hay, o sea, es de las que más
2:28productos hay aprobados en el mercado y
2:30esto pues tiene que ver por su
2:32versatilidad en cuanto eh al diseño y la
2:35aplicación ante diferentes blancos
2:37terapéuticos. Todos los anticuerpos,
2:39también conocidos como inmunoglobulinas,
2:41son glicoproteínas que son producidas
2:43por los linfocitos B y las células
2:45plasmáticas de forma natural como parte
2:47de la respuesta inmuneadaptativa, algo
2:49que ya abordamos en la unidad uno cuando
2:51hablamos de la inmunogenicidad de
2:53proteínas terapéuticas. La función
2:55principal de las inmunoglobulinas es
2:57reconocer de manera específica
2:59antígenos, es decir, moléculas o
3:02estructuras que pudieran ser
3:03potencialmente extrañas como proteínas
3:06virales, proteínas bacterianas, eh
3:08carbohidratos de otro tipo de células,
3:10toxinas, eh o incluso células tumorales
3:13para facilitar su neutralización,
3:17su detección por el sistema inmunológico
3:18y eventualmente su eliminación. Esta
3:22representa, decíamos, una de las clases
3:23más exitosas de medicamentos
3:25biotecnológicos, dada a su alta,
3:27decíamos, versatilidad y especificidad.
3:31Su aplicación principalmente radica en
3:33la terapéutica en que estos anticuerpos
3:35van a actuar como e pues algún tipo de
3:39señalización o reconocimiento que va a
3:41permitir en algunos casos eh activar
3:44mecanismos efectores del sistema
3:46inmunológico.
3:47Esta propiedad ha sido explotada en la
3:50medicina para diseñar, por ejemplo,
3:52anticuerpos que bloqueen algún receptor
3:54asociado con la enfermedad, que
3:55neutralicen eh citosinas, por ejemplo,
3:58proinflamatorias para el tratamiento de
3:59enfermedades autoinmunes, eliminar
4:01células específicas como alguna célula
4:03infectada, una partícula veral, eh
4:06células cancerosas o que también nos
4:08pueden ayudar como herramientas para la
4:10entrega dirigida de fármacos.
4:13Eh, los anticuerpos pertenecen a la
4:15famil a una familia de proteínas
4:17globulares con una arquitectura
4:19altamente conservada. La unidad básica
4:22es una molécula en forma de y compuesta
4:25por cuatro cadenas poliptepídicas, dos
4:27cadenas pesadas o heavy chains y dos
4:30cadenas ligeras o light chains, que
4:32están unidas entre sí por puentes
4:35disulfuro, que es lo que se eh observa
4:37eh con unas líneas amarillas entre las
4:39moléculas que dice hinch. Cada cadena va
4:42a contener eh dominios estructurales
4:45organizados tanto en regiones variables
4:47como regiones constantes. Las eh las
4:51cadenas pesadas tienen tres dominios
4:53constantes y un dominio variable,
4:55mientras que eh las cadenas ligeras
4:58tienen un dominio variable y un dominio
5:00constante. Eh esta presencia de es de
5:04regiones o de dominios variables y
5:06constantes es lo que va a dar esta
5:07diversidad eh antigénica. obviamente en
5:10la porción variable de la
5:11inmunoglobulina y a su vez las regiones
5:14conservadas son los que les van a dar la
5:15actividad estructural y también la
5:18actividad efectora, ¿no? La capacidad de
5:20eh estimular o activar el sistema
5:22inmunológico.
5:24Las regiones variables están localizadas
5:26en el extremo aminoterminal de cada
5:28cadena, tanto ligera como pesada. Y
5:30además dentro de estas de este dominio
5:33eh se contienen las llamadas regiones
5:36hipervariables o eh las los CDRs, que
5:39son regiones eh determinantes de
5:41complementaridad.
5:42Eh, estas regiones son las responsables
5:45de directamente del reconocimiento y
5:47unión al antígeno. Eh, y es de aquí e
5:52donde el el gran repertorio eh que
5:56pudiera haber de inmunoglobulinas, que
5:57pudiera eh producir nuestro sistema
5:59inmunológico, está basado justamente en
6:01esa variabilidad en las regiones CDR.
6:03Más adelante vamos a platicar un poquito
6:05de cómo es que se eh se hace esta
6:08selección o esta esta diversidad en el
6:11en en los linfocitos B para producir
6:13diferentes tipos de inmunoglobulinas.
6:15Pero sí podría comentarles eh desde
6:18ahorita que pues esto esta variabilidad
6:20deriva de procesos biológicos complejos
6:23como un rearreglo genético,
6:26recombinación y hipermutación somática y
6:29selección clonal de los linfocitos B.
6:31Esto nos va a permitir generar millones
6:33de copias eh diferentes o tipos de
6:36anticuerpos diferentes a partir de un
6:38número limitado de genes y voy a decir
6:40limitado entre comillas porque pues es
6:41un número bastante bastante grande, pero
6:43pues sí es finito.
6:45Eh, luego tenemos las regiones
6:47constantes. Estas van a determinar
6:49primero el tipo de inmunoglobulina o el
6:51isotipo de inmunoglobulina de que vamos
6:53a estar eh tratando y también sus
6:56fusiones efectoras. Estas las regiones
6:59eh constantes participan en las
7:01interacciones con los eh con receptores
7:03FC que se encuentran en las en las eh en
7:07las células inmunológicas o también con
7:09proteínas eh del complemento y otras
7:11células del sistema inmune. Hm. Aquí
7:14también en la en la figura podríamos
7:16hablar que las inmunoglobulinas las
7:17podríamos e separar eh de de manera
7:22química eh con con digestión enzimática,
7:26perdón. eh dividirlas también en
7:28fragmentos. Eh, la molécula puede
7:30dividirse en fragmentos obtenidos eh
7:33como fragmentos FAB eh que es el
7:37fragment antigen binding y un fragmento,
7:40el fragmento FC que es el fragmento
7:43cristalizable. El fragmento FAB,
7:46deseamos va a tener el pues por parte de
7:49las regiones variables y también un
7:51dominio de las regiones de la región
7:52constante. Eh, y esta pues se puede
7:55utilizar ya que contiene la región de
7:57reconocimiento antigénico. Eh, se puede
8:00utilizar también eh pues con
8:03aplicaciones terapéuticas, o sea, lo que
8:04voy es que no necesariamente se tiene
8:06que producir el una inmunoglobulina
8:08completa para tener eh una aplicación
8:11terapéutica.
8:13Eh, y esto lo podemos también obtener
8:15por hidrolisis enzimáticas, o sea, esos
8:17fragmentos. La porción FC, por otro
8:19lado, es la parte que media las
8:21funciones efectoras como la activación
8:23del complemento, la citotoxicidad
8:25dependiente de anticuerpos y también
8:28pues va a explicar parte de las
8:29propiedades eh farmacocinéticas que
8:31tiene eh o de cómo se metabolizan los
8:35los inmunoglobulinas.
8:37Además, eh dado que pues esto está
8:39formado principalmente por regiones e
8:42regiones constantes y que son bastante
8:43grandes, es responsable de la larga vida
8:46media de la de muchas inmunoglobulinas.
8:49H también aquí marcado en círculo
8:52tenemos eh señalados a glicanos eh que
8:55son residuos específicos eh
8:56particularmente de asparagina que están
8:58unidos a la a las inmunoglobulinas en la
9:01porción FC, que son las que van a estas
9:05estas glicos son las que van a modular
9:07eh propiedades biológicas como la
9:10estabilidad. Diferencias, obviamente en
9:12esas glicosaciones pueden influir en la
9:14inmunogenicidad eh inducida hacia los
9:17anticuerpos y también la actividad
9:19defectora, o sea, también tiene que ver
9:20con eh la afinidad que pueden tener los
9:22anticuerpos con receptores en células
9:24inmunológicas.
9:28Ya habíamos mencionado en el tema de
9:30inmunogenicidad que eh nuestro cuerpo
9:32puede eh sintetizar diferentes tipos de
9:35inmunoglobulinas o isotipos y que esos
9:38eh pues tienen aplicaciones biológicas
9:41diferentes. Nada más como un
9:43recordatorio. Eh bueno, la clasificación
9:46de estos isotipos está basada en la
9:48estructura de las cadenas pesadas, tanto
9:51eh de las regiones, pues de las regiones
9:53constantes de las cadenas pesadas. Las
9:56podemos clasificar en IGG, IGMs, IGAS,
9:59Igs e IGDs. Cada isotipo, deseamos, va a
10:02obtener funciones biológicas y
10:04propiedades farmacológicas y
10:05farmacocinéticas distintas. Las las IGA
10:09son las inmunoglobulinas A son
10:11relevantes en inducir la inmunidad eh
10:13mucosal y pueden encontrarse tanto en
10:15forma monomérica o formando dimeros.
10:18estas eh
10:20tal vez, o sea, no tienen tanta eh
10:22aplicación terapéutica, pero sí es eh un
10:25tipo de inmunoglobulina que se busca que
10:27se estimule cuando eh hablamos del
10:29desarrollo o la investigación eh de
10:31vacunas, especialmente de eh de vacunas
10:34dirigidas a mucosas, ¿no?, como el
10:36tracto respiratorio o el tracto
10:37digestivo.
10:39Eh, las inmunoglobulinas G eh son el
10:43tipo de inmunoglobulina, este sí, más
10:45importante en las aplicaciones
10:46terapéuticas. Y esta se caracteriza eh
10:49porque tienen una alta estabilidad y una
10:51larga vida media plasmática. O sea, el
10:54tiempo de vida media está en el promedio
10:56de hasta 30 días y eso es justamente
10:59pues una de las razones por las que
11:00estas son las que se utilizan en la
11:01terapéutica. Además, presentan buena
11:04capacidad de penetración tisular. Es
11:07altamente adaptable a modificaciones
11:09mediante ingeniería y pues esto lo
11:11convierte en el estándar eh en el
11:14formato estándar, perdón, de los
11:15anticuerpos monoclonales terapéuticos.
11:18Por otro lado, tenemos las
11:19inmunoglobulinas M, que estas eh
11:22recordemos que son las que juegan las
11:24que juegan un papel importante en la
11:26respuesta inmune primaria, o sea, en las
11:27primeras etapas cuando se desarrolla la
11:29inmunidad ante un posible patógeno.
11:32Estas particularmente
11:35tienen la capacidad de formar
11:36estructuras pentaméricas, o sea, donde
11:38ya una vez formado el pentamero pueden
11:41tener tamaños de hasta 900 kaltos, lo
11:43cual le confiere una limitada difusión a
11:48través de los tejidos, o sea, tiene una
11:49eh una distribución limitada.
11:53Eh, luego tenemos las IGDs que tienen
11:55funciones principalmente regulatorias y
11:57pues en realidad no tienen mucha
11:58relevancia eh farmacéutica directa. Y
12:01por último, las inmunoglobulinas E, que
12:04estas están asociadas a respuestas
12:05alérgicas y de defensa contra parásitos.
12:10De nuevo, estas de todas estas estos
12:12cinco isotipos de inmunoglobulinas, los
12:14más relevantes o los que se aplican para
12:16el desarrollo de anticuerpos
12:17monoclonales son las inmunoglobulinas G
12:20eh por el prolongado tiempo de vida
12:22media que tiene.
12:26algo de la nomenclatura eh que se maneja
12:30de los anticuerpos que se encuentran en
12:32el mercado, particularmente los
12:34anticuerpos monoclonales, creo que ya lo
12:36habíamos mencionado, era que eh podemos
12:38tener anticuerpos eh murinos, es decir,
12:42de ratón. Esto derivado de que en una eh
12:49primer abordaje tecnológico para poder
12:51producir de manera indefinida
12:53anticuerpos monoclonales específicos
12:55contra algún blanco terapéutico, eh se
12:58utilizaba la tecnología de hibridomas,
13:00lo cual consiste en un proceso de
13:02inmortalización de linfocitos B que se
13:04hacía eh con linfocitos linfocitos B
13:07murinos de ratones. Entonces, las
13:09secuencias que se obtenían eran
13:11secuencias completamente de ratón, lo
13:13cual eh bueno, se manejaba con una
13:16nomenclatura de eh MOMAB, de mouse
13:19monoclonal antibody. Por ejemplo, aquí
13:21tenemos eh se mencionan ejemplos como el
13:24hbritumomab o el muroomab. Eh, sin
13:27embargo, pues estos han ido reduciendo
13:29cada vez más su uso debido a pues la
13:32respuesta inmunogénica que estos
13:34presentaban, ¿no? O sea, tenían esa, o
13:35sea, ser eh proteínas de otra especie
13:40eh especialmente en las glicosaciones,
13:42pues inducían una respuesta inmune que
13:44generaba anticuerpos contra el
13:46anticuerpo, lo que menciona aquí en la
13:47diapositiva como hama o humanuse
13:51antibodies. Eh, lo cual pues esto se
13:55pues ya ya lo mencionábamos, pues se
13:56podía haber traducido en la
13:58neutralización del anticuerpo
13:59terapéutico, eh respuestas inmunes
14:03severas como anafilaxis o la enfermedad
14:05del suero y también alteraciones en las
14:07propiedades farmacocinéticas de los
14:09anticuerpos que se utilizaban. Entonces,
14:11eh conforme fue avanzando la tecnología
14:13del ADN recombinante, pues eh
14:17se ya fue, o sea, se pudo dejar de lado
14:20las secuencias eh completamente murinas
14:23y ya se pudo trabajar en el diseño de
14:25moléculas cada vez más humanizadas, ¿no?
14:28donde tenemos, o sea, primero salieron
14:30los anticuerpos quiméricos, que esos
14:32consistían en tener las regiones
14:35constantes de origen humano, mientras
14:38que las variables seguían siendo de
14:39origen murino. Este tipo de anticuerpos
14:42utiliza en la nomenclatura CIMAC, que de
14:44ahí el anticuerpo más representativo, el
14:46más utilizado es el Ritux SIMA, que
14:49tiene pues propiedades inmunosupresoras
14:52y se utiliza, por ejemplo, para el
14:53tratamiento de la artectis reumatoide,
14:55luperitematoso,
14:57eh
14:59para eh linfomano hotking y también con
15:04eh para el tratamiento eh bueno, en
15:07trasplantes trasplantes de órganos.
15:10Luego eh los anticuerpos de la siguiente
15:13generación, podríamos decirlo así, serán
15:16los anticuerpos eh humanizados, donde
15:18las regiones murinas solamente
15:21correspondían a las partes eh CDR, ¿no?
15:23Los de los las regiones de
15:25complementaridad, que son las que van a
15:27a estar mediando la unión específica eh
15:29con el antígeno. Entonces, ya si lo
15:31vemos en porcentaje, la porción de
15:33origen murino pues era mucho menor, por
15:35lo tanto esos anticuerpos eran menos
15:37inmunogénicos y de ahí la nomenclatura
15:40es suma, ¿si? Por ejemplo, el
15:42trastusumaba, pero pues tenemos muchos
15:44otros. Y actualmente ya la tecnología
15:47nos ha permitido eh generar anticuerpos
15:49completamente humanos y esos tienen la
15:53eh la terminación en la nomenclatura
15:55mum.
15:56Estos anticuerpos son obviamente mucho,
15:59muchísimo menos inmunogénicos que los
16:01anticuerpos morinos.
16:06Gran parte del éxito terapéutico que han
16:07tenido los anticuerpos en la medicina
16:09radican su capacidad para eh poder
16:12modular procesos eh del sistema
16:14inmunológico.
16:15Eh, estos mecanismos eh de acción de los
16:18anticuerpos van a depender tanto de la
16:20región FAB, obviamente, pues porque el
16:22anticuerpo se tiene que unir a un
16:24antígeno, alguna molécula, algún blanco.
16:26Y de la región FC, ¿no? La región FC es
16:29la que va a mediar justamente tanto las
16:31propiedades farmacocinéticas como los
16:34mecanismos de acción terapéuticos. De
16:37aquí podríamos distinguir
16:39eh mecanismos de acción importantes. El
16:41primero sería la neutralización, que
16:44este es el mecanismo más directo o más
16:47obvio de los anticuerpos. Eh, en este
16:50caso, el anticuerpo pues se va a unir a
16:52una molécula soluble, que este puede ser
16:55una citina, una toxina, eh, o una
16:58proteína, una partícula viral. ¿Sí? Y eh
17:02pues la neutralización ocurre mediante
17:04eh pues un impedimento estérico, una
17:06interacción en sitios o epítopos
17:09específicos
17:11de la molécula blanco.
17:14Por ejemplo,
17:16si un anticuerpo se une a una citina
17:19proinflamatoria y se unen porciones que
17:22van a evitar la interacción de esta
17:24citina con receptores de las células
17:26inmunes, pues entonces ya no va a
17:28ejercer ese efecto proinflamatorio.
17:30Eh, por ejemplo, el caso de eh hay
17:33anticuerpos dirigidos contra el TNF
17:35alfa, pues que es un es una citocina
17:37proinflamatoria por excelencia.
17:39Eh, entonces decíamos que la
17:41neutralización puede ser por impedimento
17:43estérico, bloqueando físicamente el
17:45sitio de unión o también puede ser que
17:48sea induciendo cambios eh
17:49conformacionales que van a permitir, o
17:52sea, que van a desestabilizar a la
17:54molécula que se une.
17:56Eh, también tenemos la opsonización y la
17:59fagocitosis como un mecanismo de de
18:02acción de los anticuerpos. Cuando un
18:04anticuerpo se une a un patógeno o a una
18:07célula, esto va esta unión va a
18:10facilitar su reconocimiento por células
18:12fagocíticas, que decíamos que sean eran
18:14los macrófagos y los neutrófilos. Esta
18:17interacción o esta eh opsonización va a
18:19ser mediante la porción FC del
18:22anticuerpo. Eh, también puede ser que eh
18:25receptores del complemento puedan
18:27inducir también esta esta opsonización,
18:30pero eh al final pues las células
18:32fagocíticas van a reconocer la unión
18:34antígeno anticuerpo, van a producir una
18:37internalización por fagocitosis y una
18:40eventual eh degradación del blanco. Este
18:43mecanismo es especialmente relevante
18:44para infecciones bacterianas y en
18:46algunas terapias antit tumorales,
18:49perdón, donde la eliminación de las
18:51células va a ocurrir por fagocitosis más
18:53que por lisis directa o por apoptosis.
18:57Por otro lado, los anticuerpos pueden
18:59inducir la eliminación de células
19:01mediante eh mecanismos basados en
19:03citotoxicidad.
19:05Eh, una de las más relevantes pues es la
19:08citotoxicidad dependiente de
19:10anticuerpos. En este proceso, el
19:12anticuerpo se une al antígeno en la
19:14superficie de una célula diana, por
19:16ejemplo, otra vez una célula tumoral. Y
19:19la porción FC va a ser reconocida por
19:22receptores en células efectoras, como se
19:25muestra aquí en la diapositiva, eh
19:26células NK, pero puede ser linfocitos
19:29tésitotóxicos o otro tipo de sistema,
19:32célula inmunológica. Esta interacción va
19:35a desencadenar la liberación de enzimas
19:38eh llamadas perforinas y también
19:40grancimas, induciendo eh la apoptosis o
19:44la muerte celular programada de la
19:45célula blanco.
19:47Eh, algunos anticuerpos, además, eh
19:50pueden activar la cascada del
19:52complemento tras la unión a su antígeno.
19:56Esto se este proceso de complemento se
19:58inicia mediante la formación de un
20:00complejo de ataque a membrana, la cual
20:02va a generar lisis celular y a su vez
20:06pues también puede estimular la
20:07inflamación para reclutar más eh células
20:10inmunes y propagar la respuesta.
20:13Eh, este tipo de mecanismos, o sea, la
20:15activación del complemento es relevante
20:17en anticuerpos dirigidos contra eh
20:20células de hematológicas eh que también
20:22están pasando por procesos por procesos
20:26neoplásicos. Eh, entonces aquí lo que
20:29podemos ver es que parte de los
20:31mecanismos de acción en los que trabajan
20:34los anticuerpos, especialmente los
20:36anticuerpos monoclonales, van a depender
20:38principalmente eh del blanco, ¿no? El
20:40efecto no va a ser el mismo si hablamos
20:42de una molécula soluble eh que esté eh
20:45por ejemplo en la sangre o en el espacio
20:47extracelular o si estamos hablando de
20:49una molécula eh unida a o sea que se
20:52encuentra en la superficie de de una
20:54célula, ¿no?
20:56también va a depender del sitio donde se
20:58una al antígeno por la porción FAB y
21:02pues la capacidad que tenga el
21:03inmunoglobulina dependiendo del diseño
21:06eh de activar eficientemente los
21:08receptores que detectan a la porción FC
21:11de la inmunoglobulina.
21:13Eh, aquí también podría vale la pena
21:15mencionar que no es necesario, o sea,
21:18habrá algunos casos en los que no sea
21:21necesario tener el la inmunoglobulina
21:23completa para tener un efecto un efecto
21:26terapéutico, por ejemplo, para esto es
21:29cuando hablamos de neutralización, por
21:31ejemplo, de algún patógeno, de alguna
21:33toxina, eh a veces pues no queremos que
21:35se active todas esta eh opsonización,
21:37fagocitosis porque el el antígeno es
21:40soluble. Eh, a veces pues lo que
21:41queremos solamente es bloquear el efecto
21:43por un impedimento estérico y pues para
21:45eso con la porción FAB del anticuerpo es
21:49más que necesario, no se necesita toda
21:51la molécula completa. Aquí nada más les
21:53doy esto como dato, ¿no? Para el diseño
21:55de pues nuevas moléculas.
22:01Otro mecanismo que se ha descrito en el
22:04sobre los anticuerpos eh monoclonales es
22:07a través de la modulación de la acción
22:10del sistema inmunológico a través de los
22:13puntos de control o los checkpoints
22:15inmunológicos.
22:17Eh, esto pues particularmente relevante
22:19para células eh para tratar cáncer, ¿no?
22:21Para células cancerosas. Eh, aquí pues
22:24podemos decir que en condiciones
22:25fisiológicas eh hay moléculas en las
22:28células como la molécula PD1 o CTLA4 que
22:32actúan como frenos inmunológicos para
22:35evitar la autoinmunidad. O sea, son eh
22:38moléculas de la superficie de la
22:40membrana eh celular
22:43que marcan este punto eh de soy una
22:47célula sana, no me destruyas. Algunos
22:50tumores, se ha visto que explotan estas
22:52vías para evadir la respuesta
22:53inmunológica. Entonces, utilizar eh
22:57anticuerpos, anticheckpoint van a
22:59bloquear estas interacciones
23:00inhibitorias eh restaurando así la
23:03actividad de los linfocitos
23:04tescitotóxicos contra los contra los
23:06tumores, o sea, es como para quitarles
23:08esa máscara que luego se ponen eh para
23:11evadir el sistema inmune.
23:14Obviamente, pues este mecanismo no
23:17tendría que aplicarse en células
23:20cancerosas que ya se ha visto que sobre
23:21expresan este estos marcadores, los CTLA
23:25CTLA4 y PD1.
23:28Eh, y y pues también como tal no va a
23:32eliminar directamente las células
23:33tumorales, sino que va a reprogramar la
23:35respuesta inmune hacia el huespo va a
23:37hacer que sean más fácilmente
23:38detectables.
23:43También se ha observado que algunos
23:45anticuerpos después de unirse a su
23:47blanco, aquí en este caso cuando estamos
23:49hablando de un receptor en la superficie
23:51celular de este complejo induce una
23:54internalización y una degradación
23:56posterior de estos eh receptores y del
23:59anticuerpo también. Eh, entonces este
24:02complejo anticuerpo receptor va a ser
24:04endocitado y dirigido a degradación
24:06lisosomal, reduciendo la densidad de
24:08receptores en la superficie celular.
24:11Este efecto puede ser relevante en
24:13terapias contra eh receptores
24:15sobreexpresados en el cáncer, donde la
24:18reducción de la señalización ocurre
24:20tanto por bloqueo y como eh pues
24:22desregulación del receptor.
24:25Eh, a esto también podríamos sumarle el
24:28hecho de que se pueden e utilizar los
24:32anticuerpos o aprovechar estas
24:33propiedades de que sean altamente
24:35específicos contra un antígeno eh para
24:38utilizarlos como vehículos de entrega
24:40dirigida.
24:41Entonces, supongamos que en este caso
24:43tenemos eh pues sí, un anticuerpo que se
24:45eh se une a un receptor, el cual se va
24:48internalizar y luego degradar. ¿Qué pasa
24:51si este anticuerpo lo conjugamos con
24:54algún eh fármaco químico tóxico o por
24:58ejemplo con alguna etiqueta eh
25:01radioactiva, o sea, que emita radiación
25:02gama, que es tóxica.
25:04Entonces, aquí lo que va a pasar es que
25:06el anticuerpo va a reconocer a su
25:08blanco, en este caso, pues, a una célula
25:09específica y entregar eh este agente,
25:13este agente tóxico. Tras la
25:14internalización, el fármaco se va a
25:16liberar, el fármaco o el isótopo se va a
25:18liberar dentro de la célula, aumentando
25:20la selectividad terapéutica eh del
25:23fármaco, el que se está uniendo el
25:24anticuerpo y reduciendo eh la toxicidad.
25:27Esto, por ejemplo, puede utilizarse eh
25:31en la radio o quimioterapia dirigida.
25:34para reducir eh las dosis de estos
25:36agentes eh antineoplásicos.
25:42Y bueno, también podríamos eh diseñar
25:44anticuerpos completos o fragmentos de
25:46anticuerpos. De hecho, en la figura lo
25:48que se muestran es el diseño de
25:50fragmentos de anticuerpos, pero
25:51anticuerpospecíficos
25:54diseñados para reconocer al mismo tiempo
25:56dos blancos terapéuticos. Por ejemplo,
25:59podemos tener un anticuerpo que se eh
26:02que tenga una parte en la que se una a
26:04una célula tumoral y por otro lado a un
26:06linfocito T, lo cual va a promover que
26:10ambas células se, o sea, estén eh estén
26:13cercanas y va a facilitar la detección
26:16de del linfocito T hacia la célula
26:18tumoral y garantizando y asegurar su
26:21destrucción. Eh, este este es un
26:24abordaje interesante, eh, ya que pues no
26:28necesitamos aquí el anticuerpo completo
26:31eh, para jugar con estas secuencias.
26:33También podemos tener tanto la porción
26:35FAB o incluso con digestión eh
26:37específica,
26:39con pepsina o papaína, podríamos dirigir
26:41nada más una un monómero de ese de ese
26:44fragmento FAB. Y si a esto lo sumamos
26:46que ese tipo de fragmentos también los
26:48podemos eh conjugar con eh toxinas, eh
26:53fármacos, radisótopos o incluso como se
26:55menciona aquí citocinas, pues potenciar
26:57esa esa respuesta dirigida.
27:02Algo que es importante aclarar es que la
27:04mayoría de los anticuerpos terapéuticos
27:07que están en el mercado son los
27:09anticuerpos monoclonales, pero creo que
27:11no hemos definido bien que es un
27:13anticuerpo monoclonal y que también
27:16existen anticuerpos policlonales.
27:20Eh, esto de la clonalidad
27:23se refiere a eh qué tan específico puede
27:28ser un anticuerpo. Sí. Eh, deseamos que
27:31cuando se estimule el sistema
27:32inmunológico, las células, los
27:34linfocitos B se activan, se van eh va,
27:37deseamos a ocurrir este eh rearreglo
27:41genético
27:43y compromiso para que ese linfocito B
27:45solamente produzca solo un tipo eh de
27:48inmunoglobulina, o sea, en el sentido de
27:49que esté dirigida a atacar solo un eh
27:55un antígeno o un agente patógeno, pero
27:58eh eh detectar solamente ente un
28:00epítopo, ¿sí? Un epítopo es una porción
28:04dentro de un antígeno, pues que a las
28:06que se van a unir eh los anticuerpos.
28:08Entonces, lo que se ve eh como resultado
28:11de la activación de de la respuesta
28:12inmune natural, pues es una, o sea, eh
28:15este proceso pues ocurre al azar.
28:17Entonces, eh vamos a tener una mezcla, o
28:20sea, porque va a ocurrir en varias eh
28:21varios linfocitos al mismo tiempo, donde
28:24vamos a generar eh diferentes tipos o
28:26clonas
28:28eh de linfocitos B que se van a unir a
28:32diferentes porciones del antígeno y
28:34eventualmente pues los que sean más
28:36exitosos son los que van a eh van a
28:38prosperar eh en el cuerpo, ¿no?
28:42Esto aplicado a la terapéutica, pues
28:44permite que, como se ve aquí, o sea,
28:46podemos tener,
28:48o sea, un una mezcla, o sea, de
28:50anticuerpos policlonales, porque son
28:53diferentes inmunoglobulinas que se unen
28:56al mismo blanco, pero en epítopos
28:58diferentes, es decir, en regiones
28:59diferentes. Cuando tenemos este caso
29:01hablamos de los anticuerpos
29:02policlonales.
29:05Cuando hablamos de un anticuerpo
29:07monoclonal es porque hablamos de una
29:08inmunoglobulina que se une al antígeno
29:12en el mismo epítopo porque deriva de la
29:15de una célula B progenitora. Los
29:19anticuerpos monoclonales son los que se
29:21utilizan más en la terapéutica,
29:22justamente por esto, porque son más eh
29:25específicos y se pueden producir eh o se
29:27es más fácil controlar la calidad de
29:29este tipo de anticuerpos, pero ambos se
29:32pueden utilizar eh en la terapéutica.
29:34Entonces, aquí en la tabla eh lo que se
29:37menciona
29:38eh pues son estas diferencias, ¿no?
29:40Entonces, un anticuerpo policlonal va a
29:43estar dirigido contra el mismo antígeno,
29:45pero se va a unir en epítopos o
29:46porciones diferentes de esta. mientras
29:48que un monoclonal solamente se une en un
29:51epítopo.
29:52Los anticuerpos policlonales derivan de
29:54diferentes clonas o colonias de células
29:57B, mientras que los anticuerpos
29:59monoclonales eh pues derivan de una
30:02misma, ¿no? En cuanto a las aplicaciones
30:04terapéuticas, los anticuerpos, perdón,
30:07policlonales se utilizan más para la
30:11inmunización pasiva, donde nada más
30:13queremos de manera eficiente bloquear,
30:17por ejemplo, una toxina.
30:19Eh, mientras que los anticuerpos
30:21monoclonales eh bueno, obviamente
30:24también se se pueden utilizar para eso,
30:26eh, pero pues aquí ya serían blancos más
30:29específicos, incluso con aplicación eh
30:31más crónica. Eh, ambos, si se fijan,
30:34dice que activan la inmunización pasiva.
30:36Esto, ¿qué quiere decir? También que no
30:37va a generar memoria, ¿sí? Dado que no
30:40estamos administrando linfocitos, los
30:42esos linfocitos B que van a producir las
30:44inmunoglobulinas, una vez que el
30:46anticuerpo hace su efecto, se eliminan
30:48del cuerpo y pues hasta ahí llegó, ¿no?
30:51Eh, los anticuerpos policlonales casi
30:53siempre se obtienen donadores, de sangre
30:56de donadores, que puede ser eh animales
30:59o eh de fuente eh de fuente humana.
31:02Mientras que los anticuerpos
31:04monoclonales, como ya lo mencionaba, ya
31:05la tecnología del ADN recombinante nos
31:07permite eh obtenerlos
31:10eh eh de manera
31:14eh pues en un biorreactor en el eh a
31:16nivel industrial, o sea, que no se no
31:18depende de donadores y también se puede
31:20utilizar también tecnología de
31:21hibridomas.
31:23Eh, los anticuerpos eh monoclonales son
31:26altamente específicos.
31:28Eh, y los policlonales, pues al no serlo
31:31tanto tienen una eh pues las uniones van
31:34a ser diferentes. Aquí pues tenemos la
31:35desventaja que pueden presentar
31:37reacciones cruzadas con otro tipo de
31:39moléculas e inducir pues efectos
31:41adversos eh diferentes como reacciones
31:44de hipersensibilidad, eh cuadros
31:46anafilácticos o alergias.
31:48En cuanto a los blancos terapéuticos,
31:51pues los anticuerpos policlonales eh
31:54pues se utilizan más para el tratamiento
31:56de enfermedades agudas o emergencias. Y
31:58aquí que en los el ejemplo clásico de
32:00terapia con anticuerpos policlonales son
32:03las terapias antivenenos, venenos de
32:05serpiente, venenos, o sea, de animales
32:06ponuñosos.
32:08Eh, mientras que los anticuerpos
32:09monoclonales una vez, o sea, se utilizan
32:13más para enfermedades crónicas como el
32:15cáncer o enfermedades autoinmunes,
32:16también algunas enfermedades
32:17infecciosas, pero en las que el antígeno
32:21o el blanco terapéutico está ya eh pues
32:24mucho, o sea, ya está identificado y
32:26está asociado que su inhibición o su
32:27bloqueo eh pues reduce o controla una
32:30enfermedad.
32:34Entonces, los anticuerpos policlonales
32:36decíamos que eh se suelen obtener
32:39mediante eh suero
32:42de animales o de donadores. Sí. Eh,
32:45generalmente el proceso consiste eh pues
32:48en una inmunización previa, como ya
32:50mencionamos y lo platicábamos en el tema
32:52de eh de inmunogenicidad, pues para que
32:55se generen los anticuerpos pues tiene
32:56que haber un estímulo hacia el sistema
32:58inmunológico cuando detecta algún agente
33:02extraño, ¿no? que al final eh pues lo
33:05que queremos es lo que se la
33:07consecuencia es la formación de eh la
33:11activación de linfocitos B y la
33:13producción de anticuerpos específicos
33:14contra ese agente. Entonces, supongamos
33:17que vamos a hablar de la producción de
33:18un suero antivenenos. ¿Sí? Eh, en este
33:22caso, pues, o sea, tenemos que exponer
33:24primero al animal o al paciente a pues
33:27digamos a una a esa toxina, ¿no? O a la
33:29gente que queremos que eh que
33:31neutralice, obviamente en dosis eh
33:34controladas en las que no vaya a generar
33:35un daño, o sea, que no vaya eh pues a
33:38pesar para matar, que no vaya a matar el
33:41animal o a la persona, pero o sea, en
33:43dosis controladas para que el sistema
33:45inmune se active, se generen los eh
33:48anticuerpos de forma natural. Una vez de
33:50ahí, una vez ahí eh se colecta eh el
33:54suero y se purifica principalmente por
33:58eh por cromatografía de afinidad, ya sea
34:00afinidad al antígeno o un tipo de eh
34:04afinidad específica para anticuerpos,
34:06que es la cromatografía de afinidad
34:08contra eh proteína. De ahí también
34:11podemos, o sea, tenemos la opción de
34:14utilizar el anticuerpo completo o
34:16digerirlo de manera que nada más
34:17tengamos un fragmento. De aquí yo
34:19valdría la pena mencionar que eh pues en
34:22el caso de los e anticuerpos contra
34:27dirigidos contra venenos, pues aquí no
34:29necesariamente queremos que se active el
34:31sistema inmunológico, solo queremos que
34:32se generen eh anticuerpos
34:34neutralizantes. Entonces, esta opción de
34:36trabajar nada más con los fragmentos,
34:38con la el fragmento FAB o de unión al
34:40antígeno de la inmunoglobulina, pues
34:42puede ser una buena opción, aunque pues
34:44en realidad se utiliza tanto el
34:45anticuerpo completo o eh un fragmento.
34:53Bien, entonces los anticuerpos
34:54policlonales, aquí si se fijan de la eh
34:57se muestran dos tablas, del lado
34:59izquierdo se muestran los anticuerpos
35:01policlonales de uso animal, perdón, de
35:03origen animal. eh que eso casi siempre
35:06se les llama antisueros. Eh, obviamente
35:08pues para obtener una buena cantidad de
35:11estos anticuerpos pues se utilizan
35:13animales de gran tallo. Eh, generalmente
35:16se trabaja eh con caballos donde eh pues
35:20se puede obtener una buena cantidad de
35:21sangre sin eh pues obviamente sin
35:24comprometer la vida de la vida de un
35:26animal. Y si se fijan aquí las
35:27aplicaciones están dirigidas más a la
35:29neutralización de toxinas eh de
35:33animales, decíamos de arañas,
35:35serpientes, escorpiones o también
35:37algunas toxinas bacterianas como la
35:39toxina del tétanos eh o la toxina
35:43botulínica.
35:44Eh, en el caso de los anticuerpos
35:48policlonales que se obtienen donadores
35:51humanos, eh casi siempre se les llama
35:53preparados de inmunoglobulinas.
35:56Y pues aquí eh también por cuestiones
35:59éticas quisiera yo decir y por la
36:02disponibilidad de los eh de los
36:04donadores, obviamente pues es más
36:06difícil encontrar una persona que que se
36:09ponga de voluntaria para decir, "Ay, te
36:11voy a te voy a administrar una dosis
36:15controlada de veneno y luego te voy a
36:16sacar sangre, pues, para extraer tus
36:18anticuerpos." Aquí pues no es tanto así
36:20la realidad. Si se fijan, eh los
36:24preparados de inmunoglobulinas humanas
36:26se utilizan eh para neutralizar
36:29patógenos, pero eh esto
36:33de pacientes que ya cursaron la
36:36enfermedad y la libraron, ¿no? De hecho,
36:38en la eh pues en la pandemia pasó mucho
36:40esto, ¿no? antes de que se desarrollaran
36:42eh las vacunas contra el COVID, eh los
36:46pacientes, o sea, de hecho, o sea, o
36:48sea, salía salió salía mucho que en
36:50redes sociales se buscaba
36:54eh en redes sociales se buscaba eh
36:57donadores eh pacientes que hubiera que
37:00convalecientes de COVID, o sea, que ya
37:01hubieran presentado COVID y hubieran
37:03sobrevivido, que obviamente ya su
37:05sistema inmune ya se había activado, ya
37:06había generado anticuerpos, pues que
37:08donaran justamente la sangre para poder
37:10extraeros preparados de inmunoglobulinas
37:12y poder administrárselos a pacientes eh
37:15pues que tenían más complicaciones
37:16porque eh pues su sistema inmune iba a
37:19generar anticuerpos que neutralizaran
37:21las partículas virales y de esta manera
37:23pues reducir de hasta cierto punto eh la
37:26propagación o la severidad de del virus,
37:29¿no?
37:31También pues tenemos o obiamente
37:33pacientes que se han expuesto, por
37:35ejemplo, a la hepatitis, al sarampión,
37:38rabia, influenza, pues o sea, también
37:40tiene esta aplicación.
37:43Eh, y eh también vale la pena mencionar
37:46eh, por ejemplo, la el primer el primer
37:50caso que se menciona, que es la
37:52inmunoglobulina antide, que esta se
37:54utiliza para eh para el tratamiento de
37:58la púrpura trombocitopénica, eh que
38:00ocurre cuando mujeres eh que tienen tipo
38:03sanguíneo RH negativo tienen bebés eh RH
38:07positivo. Esto puede generar una
38:09respuesta inmunogénica y que está
38:10asociada con eh pues con el la aparición
38:13de eh abortos
38:16eh pérdidas gestacionales. Entonces, eh
38:19como una parte para bloquear justamente
38:21que la madre al momento del parto genere
38:24esos anticuerpos contra el tipo
38:26sanguíneo de su bebé, se puede vacunar
38:28como tal. no es una vacuna porque no
38:30genera memoria, sino utilizar justamente
38:32estos preparados de inmunoglobulinas
38:34contra el grupo RH del bebé para evitar
38:36para que los neutralice y evitar que la
38:38madre eh genere anticuerpos contra su
38:41bebé. Eh, también eh aparece entre los
38:45ejemplos las inmunoglobulinas normales,
38:48que esta eh se puede utilizar, por
38:50ejemplo, si una persona, digamos, del
38:53continente americano va a viajar, por
38:55decir algo, al continente africano,
38:57donde eh pues las enfermedades
38:59infecciosas son muy diferentes. los, o
39:02sea, la persona que va a viajar no se ha
39:04expuesto a potenciales patógenos y sabe
39:07que va a ir a una zona, pues donde hay
39:09algún brote de alguna enfermedad
39:10infecciosa, eh se puede utilizar el
39:14suero de donadores sanos de la región a
39:17la que va a ir, pues para conferirle
39:19cierto grado de inmunidad ante los
39:21patógenos a los que se pudiera exponer.
39:27Y y bien, no me, o sea, me gustaría
39:29también mencionarles un ejemplo que se
39:31me ha hecho muy interesante de una
39:33aplicación en el desarrollo de un
39:36anticuerpo policlonal. Hm.
39:40No quiero decir terapéutico, sino eh más
39:42bien que está eh que se puede producir
39:45de manera recombinante, o sea, porque
39:47los ejemplos que veíamos en la
39:48diapositiva anterior, pues era eh más
39:51bien hablamos de un producto biológico,
39:52decíamos que depende de donadores, pero
39:55ya existe un preparado recombinante
39:58policlonal que se llama rosrolimupav.
40:01Eh, si se fijan los monoclonales, la
40:03nomenclatura termina en MAV de
40:05monoclonal antibody, este termina en PAV
40:07de policlonal antibody, ¿no? Y eh a
40:11diferencia
40:13de los anticuerpos monoclonales
40:14tradicionales, el rolimap está compuesta
40:17por una mezcla definida de anticuerpos
40:20monoclonales que van a estar dirigidos
40:23particularmente contra el antígeno D, el
40:26antígeno RH, lo que les mencionaba en la
40:29diapositiva eh anterior.
40:31Este este anticuerpo policronal
40:34recombinante se diseñó como una
40:35alternativa a los preparados de
40:37inmunoglobulinas antide derivadas de
40:40plasma humano, porque pues también por
40:41el hecho de de venir del plasma de
40:44donadores, pues hay eh pues riesgos, una
40:47pues de la, o sea, tenemos la limitante
40:49de la disponibilidad de los donadores y
40:52además pues el riesgo de transmisión de
40:54eh pues de enfermedades infecciosas.
40:56Entonces, este eh anticuerpo policronal
40:58recombinante se utiliza particularmente
41:02para prevenir la enfermedad hemolítica
41:04del recién nacido y tratar la
41:06trombocitopenia autoinmune.
41:11Aquí lo que lleva
41:16particularmente es que este está
41:19constituido por 25 anticuerpos
41:21monoclonales humanos distintos que cada
41:24uno va a reconocer epítopos diferentes
41:26dentro del antígeno RHD, o sea, el grupo
41:29RH sanguíneo. esta mezcla. O sea, aquí
41:33lo que tenemos es que tenemos 25 bancos
41:36celulares o 25 clonas eh líneas
41:38recombinantes diferentes, las cuales se
41:41mezclan en el mismo eh en el mismo pool
41:45o en el mismo banco celular. De manera
41:47que cuando se hace la eh el inóculo o la
41:50propagación y posterior inoculación en
41:52los biorreactores, pues se pueden se
41:54produce la mezcla de 25 anticuerpos
41:56diferentes y eso ya después eh se eh
42:00purifica.
42:02El rosrolimupav actúa principalmente
42:04mediante la eh opsonización de los
42:07eritrocitos RH positivos, facilitando la
42:11eliminación por el sistema eh el sistema
42:15inmune de del paciente.
42:18E
42:20entonces en este proceso hay, o sea,
42:23decíamos que las mujeres que tienen RH
42:27negativo
42:29se deben de vacunar con este tipo de
42:31inmunoglobulinas,
42:32eh inmunoglobulinas anti el grupo RH al
42:34momento que su bebé eh su bebé nace,
42:37porque aquí ya sea por parto natural o
42:39por cesárea, pues hay un intercambio
42:41entre la sangre de la madre y pues
42:43fluidos eh y sangre del bebé. Eh, y ahí
42:46es justamente donde se genera esa in esa
42:49inmunidad, ¿no? Entonces, eh neutralizar
42:53los eritrocitos RH positivos mediante
42:56estos anticuerpos policlonales, pues
42:57previene esa esa formación de
43:00anticuerpos contra el bebé. Eh, al
43:04final, o sea, esta esta enfermedad
43:06también lo que puede producir es un
43:07cuadro autoinmune donde pues se
43:09destruyen también las plaquetas tanto
43:10del bebé, incluso pues también pudiera
43:12pasar eh de la madre.
43:15Entonces ahí la relevancia de la
43:17aplicación terapéutica. Eh, aquí también
43:19podemos ver el proceso de purificación,
43:22el procesamiento downstream eh del
43:24Rosroly MUPAP, donde decíamos que
43:26tenemos 25 líneas celulares
43:28independientes que se mezclan en un
43:30banco en un mismo banco celular y pues
43:32ya eso ya se se expande, bueno, se
43:34descongela, se expande, se inocula en el
43:36biorreactor y se purifica
43:39particularmente por cromatografía de
43:41afinidad a proteína A.
43:46Y bien, eh antes de eh pasar a explicar
43:49cuáles son las técnicas de producción de
43:51los anticuerpos monoclonales, eh es
43:55importante eh señalar la complejidad eh
43:59molecular y biológica que implica que de
44:02manera natural un linfocito B produzca
44:05anticuerpos contra un patógeno o un
44:07antígeno eh en específico.
44:11Y de ahí esto pues lo liga a la razón
44:14por la que eh pues primero la lo que se
44:18obtenía era, o sea, los anticuerpos
44:21molectonales se obtenían de tecnología
44:23de hibridomas antes que pues de la
44:25tecnología del ADN recombinante. Sí,
44:27porque este proceso molecularmente es
44:30muy complejo y replicarlo en el
44:33laboratorio o en un biorrector, bueno,
44:35no un biorrector, sino en el diseño, en
44:36el laboratorio de eh mediante
44:38herramientas de modificación genética,
44:39pues es muy complicado. Eh, decíamos que
44:44un linfocito B pues va a producir al
44:47azar eh inmunoglobulinas específicas
44:51pues contra un antígeno, ¿no? O sea, o
44:52sea, el hecho de que sean específicas
44:55contra un antígeno es completamente un
44:57proceso azaroso donde se van a producir
44:59millones y millones de eh diferentes
45:01inmunoglobulinas y solamente van a
45:04perdurar eh las que sean eh específicas
45:07y selectivas contra el el patógeno que
45:09se quiera neutralizar.
45:11Sin embargo, eh toda esta información de
45:14las posibles combinaciones que se
45:15podrían generar ya están codificadas
45:18dentro de nuestro eh genoma.
45:21Ah, aquí eh lo que muestra la primera
45:24parte eh de la figura en el lado
45:26izquierdo es que eh toda esa información
45:29que codifica para las regiones variables
45:32de las inmunoglobulinas, tanto la cadena
45:34ligera como la cadena pesada, están eh
45:36codificadas no en un gen, no en dos o
45:39tres genes, sino en clústeres de genes
45:42que están distribuidos a lo largo de
45:44diferentes eh de diferentes cromosomas.
45:48Eh,
45:49aquí no voy a entrar mucho en detalle.
45:51Si quieren revisar más de esta
45:52información, los invito a que revisen
45:55libros de inmunología como el libro de
45:57inmunología eh básica y clínica del
46:00autor AAS. De ahí estoy sacando esa
46:02información. Eh, pero aquí e lo que
46:05ocurre es que decíamos la región eh
46:09variable va a haber eh un proceso de
46:13rearreglo genético una vez que el
46:15linfocito B se activa y deseamos este
46:19rearreglo genético ocurre al azar donde
46:22se van a seleccionar solamente algunas
46:24partes de estos clústeres de genes para
46:27generar regiones dentro de la del
46:31dominio variable. regiones B, D y J. Sí,
46:36aquí no voy a entrar en tanto
46:38tecnicismo, pero que se selecciona, o
46:39sea, se van seleccionando al azar
46:41cachitos de todas las posibles
46:43combinaciones que tenemos eh encriptadas
46:46o codificadas eh en todos estos
46:49clústeres de genes para seleccionar
46:51solamente uno al azar y de ahí juntarse
46:55con los clústeres de genes que van a
46:57codificar para las regiones eh las
46:59regiones constantes, los dominios
47:01constantes de las inmunoglobulinas, que
47:03aquí pues sí la diversidad es menor
47:04porque solamente Tenemos seis tipos,
47:07perdón, seis isotipos diferentes de
47:08inmunoglobulina, si es una
47:09inmunoglobulina G, una A, una D, una M,
47:13etcétera.
47:15Entonces, eh a partir del genoma se hace
47:17este rearreglo genético y eh donde hay
47:22una procesos de recombinación, o sea, es
47:24un proceso irreversible. Una vez que
47:26ocurre este rearreglo eh por nucleaas,
47:28pues se degradan eh los cachos que ya no
47:31sirvieron, que no se utilizaron para
47:33generar eh el ADN.
47:35el ADN específico.
47:38Eh, entonces pues ya ese eh linfocito B
47:42ya se compromete completamente solamente
47:44a producir ese tipo de inmunoglobulina.
47:47Eh, después, obviamente, hay este
47:48proceso de transcripción que todos estos
47:50estas regiones pues van a tener
47:52obviamente eh diferentes intrones y
47:55hexones que eh pues van a eh sufrir
47:58también al azar un proceso de un proceso
48:00de splicing y procesamiento y
48:02maduración. Posteriormente la
48:05inmunoglobulina se va eh a traducir y se
48:07va a ensamblar y también pues va a
48:09madurar eh porque recordemos que esta es
48:11una proteína, eh las inmunoglobulinas
48:14están glicosiladas, va a haber el
48:15ensamblaje de la tanto la las cadenas
48:17ligeras como las cadenas pesadas para
48:19formar el tetrero, ¿no? Eh, también eh
48:23parte de este arreglo genético pues
48:25permite hacer, decíamos este cambio de
48:26isotipo dependiendo de la etapa eh pues
48:29en el proceso pues de la activación del
48:30sistema inmune, ¿no? Decíamos que
48:32primero se generan las inmunoglobulinas
48:34M, que son parte de la respuesta
48:36primaria eh o aguda de la inmunidad, y
48:38eventualmente ya cuando pasamos a la
48:40generación de células de memoria eh se
48:43cambia el isotipo a las inmunoglobulinas
48:45G, que son las que pues tienen un tiempo
48:46de vida media mayor. Entonces,
48:49imagínense replicar, o sea, ¿qué
48:51tendrían ustedes que hacer con los
48:53conocimientos que tienen de biología
48:56molecular y de ingeniería genética para
48:58replicar esto en el laboratorio, o sea,
48:59que a partir de un linfocito B, o sea,
49:02ustedes obtengan eh el material genético
49:06que pueden eh transferir
49:09para que codifica para una eh
49:11inmunoglobulina específica contra un
49:13patógeno específico para poder
49:15insertarlo eh en una levadura. en una
49:18célula vegetal o en una célula de
49:22mamífero, ¿no? Esto esto es algo
49:23bastante complejo.
49:27Entonces, pues la primera técnica que
49:29surgió fue la hacerlo, digamos, todo
49:33este proceso de manera natural, o sea,
49:35dejar que eh los linfocitos B sufrieran
49:39este este rearreglo y este compromiso a
49:42producir solo un tipo de inmunoglobulina
49:43de forma natural y eventualmente eh
49:47inmortalizar estas células para poder
49:49utilizarlas en el laboratorio, porque
49:51ese también es una limitante eh los
49:53linfocitos B y también los linfocitos T,
49:56o sea, la célula sanguínea eh crecerlas
49:58y expandirlas en el laboratorio es muy
50:00difícil. Eh tienen un tipo de eh un
50:03tiempo de vida eh pues muy corto y pues
50:06en realidad en eh de hecho si uno revisa
50:09eh pues los catálogos de líneas
50:11celulares, son pocas las líneas
50:13celulares de células sanguíneas eh pues
50:15que están inmortalizadas. Entonces
50:17también esto era algo que se suma a la
50:19complejidad para el desarrollo de
50:20anticuerpos terapéuticos. Entonces,
50:23decíamos que la primera técnica que se
50:25desarrolló eh para poder producir
50:27anticuerpos monoclonales fue la
50:28tecnología de hibridomas. Esta fue
50:30desarrollada por George Coller y Cesar
50:32Milstein en 1975
50:34eh de técnica por la cual de hecho ellos
50:37ganaron un eh un Premio Nobel porque
50:39permitió por primera vez obtener
50:41anticuerpos con una especificidad
50:43definida y una producción ilimitada, lo
50:45cual pues expandió, o sea, de aquí vino
50:47el boom para eh su aplicación
50:49terapéutica.
50:50Entonces, el la tecnología de de
50:53hibridomas consiste en combinar eh pues
50:57dos células diferentes, de ahí el
50:59término hibridoma, ¿sí? donde se
51:02fusionan eh linfocitos B específicos eh
51:07que decíamos que ya están comprometidos
51:09para producir inmunoglobulinas o
51:11linfocitos, perdón, anticuerpos y eh se
51:15fusionan con una línea celular de
51:17mieloma, es decir, de eh pues de cáncer
51:19de células sanguíneas, lo cual les van a
51:21dar esta porción de esta parte, esta
51:23propiedad de ser inmortales y de que se,
51:25o sea, pues de que puedan propagarse,
51:28eh, tengan esa proliferación indefinida.
51:31Eh, entonces aquí el proceso de eh la
51:35generación de los hibridomas tiene
51:37varios pasos. El primero es la
51:39inmunización.
51:41Aquí eh pues típicamente se inmuniza un
51:43animal, decíamos pues casi siempre es un
51:45ratón de, o sea, de ahí de que venían
51:47anticuerpos anticuerpos murinos, se
51:49inmuniza con el antígeno de interés, de
51:51nuevo, eh a dosis controladas que no
51:53vaya a generar la muerte del animal y
51:55que sí sea la dosis sea suficiente,
51:57pues, para activar el sistema inmune y
51:58que se generen anticuerpos.
52:01eh de que se induzca la respuesta
52:03inmuneadaptativa, se activen los
52:05linfocitos B que van a producir los
52:07anticuerpos. Tras varias eh rondas de
52:10inmunización y refuerzos se extraen los
52:12linfocitos B principalmente del vaso, ya
52:15que este órgano contiene pues una alta
52:18eh densidad de células productoras de
52:19anticuerpos, entre otro tipo de células
52:21inmunes. Se extraen eh se extrae el
52:25vaso, de ahí se aislan losfocitos B y
52:28estos se fusionan con células de mieloma
52:30que decíamos que ya ya fueron
52:32inmortalizadas.
52:33Para esto eh la fusión eh se utiliza eh
52:37agentes como el polietilen glicol eh
52:43para que pues se puedan eh unir. Aquí,
52:46¿qué es lo que pasa? También se
52:48aprovechan dos características
52:51eh
52:53metabólicas interesantes
52:56eh y bueno, metabólicas y biológicas de
52:59ambos tipos de células. Eh, tras la
53:02fusión se va a obtener una mezcla que
53:04va, o sea, va a contener tanto pues
53:07células que se fusionaron como
53:09linfocitos B que no se fusionaron y
53:11células de mieloma que tampoco se eh se
53:14fusionaron. Entonces, pues para poder
53:16hacer esta selección eh se aprovechan
53:18estas particularidades biológicas. ¿Qué
53:20tenemos? que los linfocitos B no
53:22sobreviven mucho tiempo en el
53:23laboratorio. Entonces, si nosotros
53:25dejamos eh que pase el tiempo, los
53:27cultivos o los subcultivos de eh de esa
53:30mezcla, pues eventualmente los
53:31linfocitos B se van a eliminar. Eh, y
53:35alguna particularidad que tiene estas
53:38esta línea celular de mieloma es que
53:41tiene eh la incapacidad de eh crecer en
53:45medio en medio jat, que es eh es un
53:48medio de selección que se conoce como
53:50hipojantina, aminopterina y timidina.
53:53Este medio bloquea la síntesis de
53:56nucleotidos de novo obligando a las
53:58células a utilizar una vía eh de
54:01rescate. ¿Qué sucede? que estas células
54:04de mieloma carecen de esas enzimas de la
54:06vía de rescate y mueren mueren en medio
54:09jat, pero los linfocitos B normales sí
54:12tienen esa eh esa vía de rescate y
54:15pueden crecer en medio en medio j.
54:17Entonces, ¿qué va a pasar? Que solamente
54:20eh eh solamente los hibridomas van a
54:24sobrevivir, ya que combinan la
54:26inmortalidad de las células de mialoma y
54:28la maquinaria metabólica funcional de
54:30linfocito B para poder crecer en medio
54:32jat.
54:33Sí. Entonces, una vez que se hace eh la
54:35selección de las de los hibridomas, se
54:38inicia con un proceso como de screening
54:40o de selección eh clonal. Sí,
54:43simplemente pues se diluyen
54:46las células que crecieron en el medio J.
54:49Eh, de manera que, por ejemplo, en una
54:50placa de cultivo de 96 pozos o de más,
54:53que hay como de hasta 500 o 1000 pozos,
54:56eh se diluyen al grado de que en cada
54:59pozo se siembre nada más una célula.
55:02Eh, y de ahí eh pues se pueden se pueden
55:06seleccionar, ¿no?, ya sea con técnicas
55:08como ela o algún tipo de
55:10inmunofluorescencia, citometría de flujo
55:12para que de ahí, o sea,
55:15todas las células, o sea, si sembramos
55:17un pozo, una célula en un solo pozo,
55:19todas las células que crezcan ahí, pues
55:21van a ser iguales, van a venir de la
55:23misma clona, del mismo tipo eh de célula
55:26de hibridome.
55:27Y obviamente estas células van a
55:29producir
55:31van a producir anticuerpos. Entonces se
55:32hace esa selección, se caracteriza y se
55:36ve cuál es la que produce el mejor
55:38anticuerpo. Eh, en este caso pues va a
55:40ser monoclonal porque va cada una es una
55:42clona, un un célula de hibridoma
55:45diferente, va a producir un anticuerpo
55:46diferente. Eh, se selecciona cuál es el
55:49que tiene las mejores propiedades, eh,
55:52principalmente eh de unión al antígeno,
55:54¿no? Y de ahí pues se ya una vez que se
55:57seleccionan se expanden, se bancos, se
56:00hacen bancos celulares y pues esos ya se
56:02pueden utilizar en el en el biorreactor.
56:06Eh, aquí eh pues decíamos que esta
56:09tecnología de hibridomas pues
56:11revolucionó eh el campo eh de la
56:14medicina porque permitió producir
56:16anticuerpos monoclonales homogéneos y
56:19con especificidad definida. Aquí pues la
56:22limitante que presenta esta técnica eh
56:25pues es que los anticuerpos que se
56:26obtenían pues eran pues principalmente
56:28de de ratones, ¿no? Murinos, lo que
56:31produce la respuesta inmune que ya eh
56:33que ya habíamos mencionado.
56:36Ya pues eventualmente pues estos los
56:38problemas derivados de la
56:39inmunogenicidad de los anticuerpos
56:41producidos por hibridomas, pues si fue
56:43de suficiente peso como para tener la
56:45necesidad de desarrollar técnicas
56:49técnicas posteriores como los
56:51anticuerpos quiméricos, los anticuerpos
56:52humanizados y ahora los anticuerpos
56:55completamente humanos. O sea, ya en la
56:57actualidad, en la terapia, la
56:59terapéutica, ya eh los anticuerpos
57:01murinos producidos por hibridomas, pues
57:03ya casi no ya casi no se utilizan, pero
57:06pues es también es una técnica pues
57:08bastante interesante eh y pues que tiene
57:10su importancia histórica.
57:15Actualmente los anticuerpos monoclonales
57:18ya no se producen por tecnología de
57:19hibridomas. Eh, aquí eh les quería yo
57:22platicar de otras cuatro técnicas que se
57:25pueden utilizar. en cuanto a técnicas
57:27biotecnológicas para producir
57:28anticuerpos mocnoles. La primera es eh
57:32la técnica de presentación de fagos o
57:35face display. El principio de esta
57:37técnica consiste eh en utilizar eh
57:42bacteriófagos
57:44para eh promover la selección
57:48de las regiones eh variables de los
57:51anticuerpos monoclonales.
57:54Eh aquí eh ¿qué es lo que pasa? Por
57:57ejemplo, nosotros podemos aislar
58:00de pacientes que ya personas donadores
58:02que ya han sido inmunizados, por
58:04ejemplo, porque ya sufrieron un
58:05enfermedad y ya generaron anticuerpos
58:07contra esta, se pueden aislar sus
58:09células B, eh extraer su material
58:12genético y, por ejemplo, extraer la RN
58:15mensajero,
58:17cortarlo en pedacitos eh y generar eh
58:20bibliotecas utilizando eh bacteriófagos,
58:23¿no? y se hacen ahí construcciones eh de
58:26manera que esos fragmentos se pegan en
58:28el material genético de del bacteriófago
58:30para que eh pues obviamente recuerden
58:33que los bacteriófagos infectan eh a
58:36bacterias de una manera en la que em
58:42el bacteriófago
58:44eh exprese cachitos, los cachitos del
58:48material genético de los anticuerpos que
58:50se obtuvieron eh de los pacientes
58:52inmunizados. se expresen en la
58:54superficie eh en la superficie del
58:56bacteriófago. ¿Sí? Entonces, por
58:58técnicas cromatográficas, obviamente por
59:01principio de afinidad, se pueden
59:04seleccionar si se expone en una fase
59:07estacionaria, o sea, se fija, digamos,
59:09el antígeno al que queremos que se una
59:11el anticuerpo y lo pasamos
59:14pasamos esta mezcla o esta biblioteca
59:16que tenemos de fagos, se van a unir
59:19solamente los cachitos, o sea, los fagos
59:21que expresen el cachito que es capaz de
59:23unirse eh al antígeno, ¿no? Entonces,
59:25hacer una un proceso de un proceso de
59:28selección, ese eh identificación también
59:31de decir cuál, o sea, cuál es el cachito
59:33del fago, o sea, el material genético
59:35que se de los pacientes que fue capaz a
59:40través de la presentación de fagos de
59:42unirse al antígeno que queremos para
59:45solamente aislar ese cachito y ya de ahí
59:47clonarlo o bueno, copiar y pegar en una
59:50secuencia ya base de una de una
59:52inmunoglobulina donde va a tener las
59:54regiones
59:55eh ya humanas eh
59:58constantes y variables y solamente
1:00:00pegarlas en las regiones eh de
1:00:02complementaridad o las hipervariables
1:00:04para generar un anticuerpo pues
1:00:06específico contra el antígeno que
1:00:08queremos.
1:00:10Eh, otra técnica eh
1:00:13que podemos utilizar es la el uso de e
1:00:19de animales genéticamente modificados.
1:00:22eh
1:00:25que en este caso eh se ha trabajado con
1:00:28un tipo de ratón transgénico que se
1:00:30llama Xenomaus, al cual se le han
1:00:33deletado eh en su genoma las secuencias
1:00:37o las regiones que codifican para
1:00:39inmunoglobulinas de ratón y se le han
1:00:41insertado todos estos clústeres de genes
1:00:44que codifican para inmunoglobulinas
1:00:47humanas. Entonces, lo que tenemos es un
1:00:49ratón que produce anticuerpos humanos.
1:00:52Entonces, si con en este tipo de ratones
1:00:54utilizamos esta técnica de hibridomas
1:00:57para inmortalizar sus linfocitos B
1:00:58después de que han sido inmunizados con
1:01:01el antígeno que nosotros queremos que se
1:01:02generen anticuerpos contra este, eh pues
1:01:06aquí ya podemos obtener mediante
1:01:08tecnología de hibridomas eh
1:01:10inmunoglobulinas humanas.
1:01:13Eh, otro proceso que tenemos es eh otro
1:01:16otras técnicas de inmortalización de las
1:01:20e
1:01:21de las células B eh humanas. Esto se ha
1:01:25sugerido que se puede hacer, obviamente
1:01:27también aislando los linfocitos B de
1:01:30donadores inmunizados contra el antígeno
1:01:32de interés
1:01:34para que queremos que se generen
1:01:35anticuerpos. Eh, estos linfocitos B se
1:01:38pueden inmortalizar eh, por ejemplo,
1:01:40utilizando eh virus oncogénicos como el
1:01:43virus de Epsteinbart y también pues
1:01:46otros factores eh factores de
1:01:48crecimiento y otras moléculas para
1:01:50inmortalizarlas.
1:01:52Y de nuevo pues hacer algo similar como
1:01:54los hibridomas en el sentido de pues el
1:01:56proceso de selección de ver cuáles eh
1:01:58los linfoc de los linfocitos B que se
1:02:00inmortalizaron, pues producen los
1:02:02anticuerpos eh
1:02:04pues más adecuados. Sin embargo, pues
1:02:06esta técnica de inmortalización de
1:02:08células B con estas eh con esta técnica
1:02:11pues es eh no es muy no es muy efectiva.
1:02:16También actualmente pues ya tenemos el
1:02:18proceso
1:02:20pues con la tecnología del ADN
1:02:22recominante completamente, o sea, ya se
1:02:24puede eh ya se trabaja con una molécula
1:02:30molde eh de inmunoglobulina
1:02:34de inmunoglobulina G que pues se puede
1:02:37copiar y pegar en diferentes plataformas
1:02:39biológicas y que también pues con
1:02:41programas eh informáticos pues se pueden
1:02:44eh diseñar ar las secuencias de las
1:02:46regiones eh hipervariables eh para
1:02:48generar pues el anticuerpo que eh pues
1:02:51con las características eh de afinidad
1:02:54inmunológica que nosotros deseamos.
1:02:56Entonces, ya la mayoría, o sea, ya los
1:02:58anticuerpos eh completamente humanos,
1:03:00humanizados y completamente humanos, se
1:03:02generan por tecnología del ADN
1:03:04combinante eh eh y pues con una alta
1:03:09una alta eficiencia.
1:03:11Vale la pena mencionar que eh digamos
1:03:14algunas consideraciones limitantes de
1:03:16las técnicas que acabamos de mencionar.
1:03:18Eh, por ejemplo, para la presentación de
1:03:20Fagos, eh esta técnica se utiliza más
1:03:22para la etapa de descubrimiento y
1:03:25diseño, no tanto en la manufactura.
1:03:28Eh,
1:03:30en el caso de eh el los ratones
1:03:32transgénicos, ah, aquí pues hay que
1:03:34tomar en cuenta que eh desde el punto de
1:03:38vista experimental y del mantenimiento
1:03:40de las líneas transgénicas eh es
1:03:42costoso, eh técnicamente eh complejo.
1:03:47Eh el manejo también de estos animales
1:03:49eh digamos que ya la cepa digamos ah
1:03:52comercial eh pues son ratones ratones
1:03:55bastante caros.
1:03:58En el caso de la inmortalización de los
1:04:00linfocitos eh B humanos con el virus
1:04:03virus de bar, eh aquí pues tenemos la
1:04:05desventaja que este tipo de
1:04:07inmortalización presenta o para este
1:04:10método presenta mucha inestabilidad
1:04:11genética y variabilidad en la producción
1:04:14de anticuerpos. Entonces esto también
1:04:15limita su aplicación
1:04:17eh pues ya para aplicación, o sea, su
1:04:20aplicación industrial.
1:04:24Y bueno, a diferencia de muchas
1:04:25proteínas recombinantes, eh los
1:04:27anticuerpos monoclonales, eh bueno, las
1:04:30inmunoglobulinas en general, pues
1:04:31presentan una eh particularidad eh
1:04:34bastante importante.
1:04:37Aquí en este caso, el hecho de que las
1:04:41la porción FC del anticuerpo esté
1:04:43altamente conservada facilita el uso de
1:04:47estrategias de purificación basadas en
1:04:50reconocimiento específico en o en
1:04:53afinidad, ¿no? Entre ellas tenemos la
1:04:55cromatografía
1:04:57de afinidad a la proteína A y esa se
1:05:01utiliza mucho en la industria para
1:05:03purificar anticuerpos monoclonales con
1:05:05una muy buena efectividad.
1:05:09Eh, en este caso los anticuerpos eh,
1:05:13bueno, más bien la la proteína A es una
1:05:16proteína de superficie de la bacteria
1:05:18estafilococos aurius que presenta una
1:05:21afinidad natural por la región FC de las
1:05:24inmunoglobulinas G. Esto pues es como es
1:05:28un mecanismo natural de la bacteria para
1:05:32eh escapar a la a al sistema inmune de
1:05:37del huésped, o sea, de las células eh o
1:05:40bueno, de los organismos que infecta,
1:05:42porque ah la proteína al unirse a la
1:05:45porción FC de los anticuerpos va a
1:05:48evitar pues la activación del sistema
1:05:50inmunológico. Entonces, la respuesta que
1:05:52se va a generar en contra de la bacteria
1:05:53pues va a ser va a ser mucho menor.
1:05:57Entonces, pues se ha aprovechado esta
1:05:59característica y se ha acoplado la
1:06:02proteína a las resinas o a las columnas
1:06:04cromatográficas para poder eh purificar
1:06:08eh anticuerpos o en este caso pues
1:06:10inmunoglobulinas G, que decíamos que son
1:06:12las que más se utilizan
1:06:14para la e
1:06:17pues para la creación de anticuerpos eh
1:06:18monoclonales eh terapéuticos. Entonces,
1:06:21pues estas proteínas funcionalizadas
1:06:24pues permiten purificar eh
1:06:26inmunoglobulinas con una eh con una muy
1:06:28buena eh pues eficacia, ¿no? Lo cual eh
1:06:33pues hace que el proceso de
1:06:34purificación, el procesamiento
1:06:36downstream sea muchísimo más eh
1:06:39muchísimo más sencillo.
1:06:44Y bien, eh si hablamos de las ahora de
1:06:46las propiedades farmacocinéticas de lo
1:06:49de las inmunoglobulinas, ya sean
1:06:50policlonales o monoclonales, pues sí es
1:06:53importante resaltar algunas
1:06:55particularidades. Eh, primero pues es el
1:06:57tamaño, ¿no? Decíamos que eh las
1:06:59inmunoglobulinas
1:07:01en su porción h unidad funcional eh
1:07:05pesan, o sea, estamos hablando de un
1:07:06tetrámero de dos cadenas ligeras unidas
1:07:09y dos cadenas pesadas unidas por puentes
1:07:11de sulfuro que tienen un tamaño de 150
1:07:14kilaltons. Entonces, este es un tamaño
1:07:16eh bastante grande, o sea, es son de los
1:07:18biofarmacéuticos eh de mayor tamaño y
1:07:22pues esto tiene implicaciones en pues en
1:07:25la farmacocinética, ¿no? Mientras
1:07:26decíamos que mientras más grande es la
1:07:28molécula, pues más limitantes va a tener
1:07:30para poder atravesar membranas y
1:07:33barreras biológicas y por ende una
1:07:35absorción y distribución eh adecuada.
1:07:39Eh, en el caso de los anticuerpos se ha
1:07:41visto que eh su distribución está
1:07:43confinada principalmente al espacio
1:07:45vascular cuando se administran eh por
1:07:48vía intravenosa y al intersticial o al
1:07:51espacio extracelular eh cuando pues se
1:07:53administran por otra vía parenteral.
1:07:56Hm. Aquí también pues vale la pena
1:07:58resaltar que los anticuerpos atraviesan
1:08:01el endotelio vascular principalmente
1:08:03mediante transporte convectivo o
1:08:06mecanismos transcelulares especializados
1:08:08o específicos para las inmunoglobulinas.
1:08:11eh presentan volúmenes eh de
1:08:14distribución relativamente bajos, es
1:08:16decir, pues en general eh pues no no se
1:08:19distribuyen eh no se distribuyen bien.
1:08:23Perdón. En cuanto a la absorción, pues
1:08:25va a depender principalmente eh de la
1:08:28vía eh de administración. Decíamos que
1:08:31pues en este caso se van a administrar
1:08:33por eh vía parenteral, particularmente
1:08:36la intravenosa y la subcutánea son a las
1:08:38que más eh se recurre.
1:08:41Eh,
1:08:45la biodisponibilidad, por ejemplo, que
1:08:47se ha reportado para la vía eh la vía
1:08:50subcutánea es entre el 50 y el 80%.
1:08:56La distribución a través de los tejidos
1:08:58de los anticuerpos va a estar
1:08:59determinada por eh otros factores que
1:09:02además del tamaño molecular y eh pues
1:09:06estos otros factores son pues el
1:09:09antígeno al que se une. Eh no es lo
1:09:11mismo si el antígeno, o sea, el
1:09:13anticuerpo se va a unir a una molécula
1:09:16que está soluble, a una molécula que
1:09:18está eh que forma parte eh de la
1:09:21superficie de una célula. O por ejemplo,
1:09:23si estamos hablando como de un híbrido,
1:09:26eh, que fuera una
1:09:29un anticuerpo que se une a una molécula
1:09:31que está en la superficie, pero que
1:09:32además tiene la capacidad de excindirse
1:09:35de la membrana y pasar eh de forma
1:09:37soluble, que aquí sería como una eh una
1:09:40una mezcla, ¿no?, de los otros tipos de
1:09:43antígenos anteriores.
1:09:48E
1:09:54también algo que influye mucho en las
1:09:57propiedades farmacocinéticas ese o
1:09:59bueno, en el caso de los anticuerpos se
1:10:01presenta una vía de metabolismo
1:10:06muy particular. Eh, se ha visto que la
1:10:10eliminación de muchos anticuerpos se
1:10:11lleva a cabo a través de el receptor
1:10:15neonatal de la porción FC de los
1:10:17anticuerpos, que es la que se muestra en
1:10:20la figura. Eh, este receptor eh se le
1:10:23llama receptor neonatal porque fue eh
1:10:26originalmente reconocido, o sea,
1:10:28identificado en las células
1:10:32eh me parece que en células de la
1:10:34placenta y de cordón umbilical en los
1:10:36bebés.
1:10:37Y es justamente eh la primera vía por la
1:10:40que se identificó eh que los anticuerpos
1:10:42de la madre pueden pasar al al bebé, a
1:10:45la sangre del bebé para brindar eh
1:10:47protección durante la gestación. Pero
1:10:50pues se con el paso de los años se ha
1:10:52detectado que este receptor pues se
1:10:54encuentra en otros tipos celulares, por
1:10:56ejemplo, se expresa en células
1:10:58endoteliales, eh en células por ejemplo
1:11:01en el hígado y en la superficie
1:11:03obviamente de las células. Y este
1:11:05receptor, pues lo que tiene es que
1:11:07reconoce la porción FC de las
1:11:09inmunoglobulinas, particularmente de las
1:11:11inmunoglobulinas
1:11:13C, eh, y medía su reciclaje
1:11:16intracelular, la cual ocurre eh, pues
1:11:19mediante endocitosis. Entonces, los
1:11:21anticuerpos que se unen al a este
1:11:23receptor neonatal eh se internalizan en
1:11:27endosomas y este y posteriormente eh
1:11:31pues aquí pueden tomar eh dos vías.
1:11:34Estos endosomas pueden irse hacia eh los
1:11:38lisosomas donde pueden ser degradados o
1:11:41eh pueden eh ser reciclados y volver a
1:11:45secretarse en el espacio extracelular. O
1:11:47sea, esta parte en la que se recicla eh
1:11:49pues es justamente esta este esta vía de
1:11:52transporte que se describió para pasar
1:11:54de la placenta, o sea, de la sangre de
1:11:55la madre a la sangre del bebé a través
1:11:57de la placenta. Entonces eh pues este
1:12:01mecanismo también e pues es altamente
1:12:04selectivo dependiendo del tipo de, o
1:12:06sea, si se va a degradación o a
1:12:07recirculación, pues va a depender del
1:12:09tipo de célula eh que exprese el
1:12:11receptor.
1:12:13Y esto, este mecanismo explica también
1:12:16la larga vida media que pueden tener las
1:12:18inmunoglobulinas G.
1:12:23Y bueno, en el caso de que no de ese
1:12:25proceso de recirculación, pues tenemos
1:12:27la degradación proteítica a través de
1:12:30los a través de los lisosomas.
1:12:33También puede ocurrir que cuando un
1:12:34anticuerpo se una a su antígeno,
1:12:37especialmente si este se encuentra en la
1:12:38superficie celular, o sea, que no
1:12:40necesariamente sea este receptor, pues
1:12:42ese complejo también se, o sea, se ha
1:12:43visto que se puede internalizar y ya
1:12:46degradarse, lo que cual va a acelerar y
1:12:48favorecer la eliminación del fármaco, lo
1:12:50cual podía eh explicar que en muchos
1:12:53casos no haya una farmacocinética
1:12:56eh lineal en muchos de los eh de los
1:12:58anticuerpos monoclonales.
1:13:01También vale la pena mencionar que pues
1:13:04el tiempo de vida media prolongado que
1:13:06presentan los anticuerpos, que seamos
1:13:07que es de varias semanas, eh permite
1:13:10pues intervalos de dosificación eh
1:13:12amplios, que puede variar de semanas
1:13:15hasta meses, lo cual pues esto es una
1:13:17ventaja porque puede facilitar la
1:13:19adherencia del paciente eh a los
1:13:21tratamientos o también pues muchos de
1:13:23los anticuerpos es necesario eh de estas
1:13:25terapias que se administren por vía eh
1:13:28por infusión, por vía intravenosa, eh
1:13:31que estén canalizados los pacientes y
1:13:32que asistan al hospital a recibir el
1:13:34medicamento. Entonces, el hecho de que
1:13:36pueda estar lo suficientemente
1:13:37espaciado, pues facilita esa adherencia
1:13:40al tratamiento durante periodos
1:13:42prolongados.
1:13:46Y bueno, en cuanto a las aplicaciones
1:13:48terapéuticas de los anticuerpos
1:13:50monoclonales, pues ya sabemos que estos
1:13:52son eh pues los biofarmacéuticos más
1:13:54importantes en la medicina actual.
1:13:57Esto dada a su alta especificidad
1:14:00molecular y su versatilidad.
1:14:03Eh, el hecho de que eh pues se puedan
1:14:05diseñar, o sea, pues pueden tener una
1:14:07una amplia gama de blancos terapéuticos,
1:14:12eh lo cual permite intervenir
1:14:15de manera precisa en procesos
1:14:17fisiológicos, fisiopatológicos
1:14:19complejos, especialmente en enfermedades
1:14:21crónicas.
1:14:23De aquí que en la oncología o en el
1:14:26tratamiento del cáncer, pues los es, o
1:14:28sea, sea la aplicación más importante de
1:14:30los anticuerpos monoclonales.
1:14:34Eh, cuando se emplean para cuando se
1:14:36emplean los anticuerpos para reconocer a
1:14:38antígenos tumorales específicos o para
1:14:41bloquear señales de proliferación, eh
1:14:44inducir inducir toxicidad o fomentar,
1:14:47estimular la eh modular la respuesta
1:14:49inmunológica. Eh, por ejemplo, al inicio
1:14:52del curso, pues hablábamos eh de los
1:14:54anticuerpos contra eh la proteína R2,
1:14:57por ejemplo, en el cáncer de mama,
1:15:02eh que o que inhiban eh vías oncogénicas
1:15:05clave, ¿no?, para impedir eh eh cascadas
1:15:10asociadas a la proliferación y
1:15:11supervivencia celular.
1:15:14Eh, también, por ejemplo, tenemos
1:15:16podemos, o sea, existen anticuerpos
1:15:18dirigidos contra antígenos de superficie
1:15:20en células hematológicas, o sea, contra
1:15:22biomarcadores de cáncer. Un ejemplo muy
1:15:25común de esto es la molécula CD20 que se
1:15:30utiliza, o sea, se han generado
1:15:32anticuerpos contra la molécula CD20 en
1:15:34el tratamiento de el linfoma y algunos
1:15:37tipos de eh de leucemia. Entonces, los
1:15:40anticuerpos en este caso pues funcionan
1:15:42como una
1:15:44molécula de marcaje para que el sistema
1:15:47inmune pueda reconocer más fácilmente a
1:15:49las células cancerosas y destruirlas,
1:15:51deseamos ya sea por citotoxicidad
1:15:52mediada por anticuerpos o activación del
1:15:55complemento.
1:15:57También mencionábamos los anticuerpos
1:16:00contra los puntos de control
1:16:01inmunológico, los checkpoints, eh lo
1:16:04cual pues eh facilitan eh la detección
1:16:07de las células o más bien bloquean estas
1:16:09vías de e ay se me ve el nombre, pero o
1:16:14sea, de cómo es que se esconden eh las
1:16:16células cancerosas, estas rutas de
1:16:18escape, ¿no? De las células cancerosas
1:16:20hacia las células de el sistema
1:16:22inmunológico.
1:16:24También pues tenemos la parte de la
1:16:26formación de los conjugados entre un
1:16:29anticuerpo contra dirigido contra una
1:16:33un biomarcador de una célula cancerosa
1:16:35que esté acoplada con algún con algún
1:16:38fármaco, lo cual eh pues permite eh
1:16:42generar terapias mucho más específicas,
1:16:45o sea, que sean más eficientes y
1:16:47selectivas contra las células
1:16:49cancerosas, que generen menos daño y con
1:16:51una eh menor dosis, o sea, que reduzca
1:16:54la toxicidad sistémica.
1:16:57E
1:16:58también los anticuerpos monoclonales han
1:17:00adquirido relevancia eh para algunas
1:17:03enfermedades eh infecciosas, por
1:17:05ejemplo, en lugares donde la vacunación
1:17:08eh es insuficiente o no es eh
1:17:12disponible, no está disponible. Eh, por
1:17:13ejemplo, ya se han detectado, perdón, ya
1:17:15se han generado eh anticuerpos
1:17:17neutralizantes contra diferentes eh
1:17:20patógenos, por ejemplo, eh patógenos
1:17:23respiratorios, podríamos también hablar
1:17:25del COVID, eh o algunos virus eh
1:17:29respiratorios, perdón, hemorrágicos en
1:17:31pandemias, por ejemplo, eh por ejemplo
1:17:33con eh ay me fue el nombre, eh ébola,
1:17:37por ejemplo. Y esto pues tal vez no sea
1:17:39una cura como tal contra esas
1:17:41enfermedades, pero ayuda eh pues a a
1:17:45estimular al sistema inmunológico, ¿no?
1:17:47Contra contra estas estas estos agentes
1:17:50infecciosos.
1:17:53Ah, también los anticuerpos se han
1:17:54aplicado en la neurología.
1:17:57Eh, por ejemplo, se han generado
1:17:59anticuerpos contra proteínas agregadas o
1:18:02mediadoras mediadores inflamatorios del
1:18:04sistema nervioso central. Eh, obviamente
1:18:07con el la potencial de la aplicación en
1:18:09enfermedades eh neurodegenerativas o
1:18:12trastornos neurológicos autoinmunes como
1:18:15eh neurodegenerativas como el Alzheimer
1:18:18o eh autoinmunes, por ejemplo, eh como
1:18:21la esclerosis múltiple.
1:18:23Eh, también se han generado eh
1:18:26anticuerpos que tienen aplicaciones en
1:18:27la oftalmología.
1:18:30Por ejemplo, hay algunas eh enfermedades
1:18:32de la retina que se generan por un
1:18:35crecimiento, una formación anormal eh de
1:18:38vasos sanguíneos. Y esta respuesta o
1:18:41esta esta angiogénesis exagerada, que el
1:18:44angiogénesis es la formación de de vasos
1:18:46sanguíneos, eh se ha visto que está
1:18:49asociada con un aumento en factores de
1:18:53crecimiento eh endoteliales o factores
1:18:57eh de crecimiento proangiogénicos.
1:18:59Entonces, se han generado anticuerpos
1:19:02dirigidos contra estos factores de
1:19:03crecimiento, lo cual los cuales eh pues
1:19:06reducen la
1:19:08progresión y la severidad de la
1:19:10enfermedad. Eh, por ejemplo, e la la
1:19:13enfermedad eh la degeneración eh macular
1:19:17eh se ha visto que eh pues está causada
1:19:19justamente por estos por estos factores
1:19:22y ya hay anticuerpos específicos este
1:19:25contra estos factores de crecimiento.
1:19:27Eh, también los anticuerpos eh
1:19:30monoclonales se pueden utilizar para el
1:19:31tratamiento de enfermedades autoinmunes
1:19:33e inflamatorias. Ya hemos dicho que se
1:19:35pueden generar anticuerpos
1:19:37contracitoinas proinflamatorias que
1:19:39obviamente en enfermedades autoinmunes
1:19:41están exacervadas. Citocinas como el TNF
1:19:44Alfa o la interlucina 6 o la interlucina
1:19:4717, pues se han utilizado, por ejemplo,
1:19:49para el tratamiento de la artritis
1:19:50reumatoide, la psoriasis, enfermedad de
1:19:53cron, la acolitis ulcerosa, eh lupus,
1:19:57entre otras.
1:19:58Entonces, aquí el mecanismo de estos
1:20:00anticuerpos pues es la neutralización de
1:20:02estos mediadores inflamatorios.
1:20:06Ah, también e se han utilizado eh los
1:20:10anticuerpos, por ejemplo, eso que
1:20:11mencionábamos, anticuerpos contra la
1:20:13molécula CD20, que es una molécula de
1:20:16superficie de linfocitos B. De hecho, el
1:20:18linfomano hotkin eh para el que se
1:20:20utilizan los anticuerpos contra CD20,
1:20:23pues es un tipo de cáncer de células B.
1:20:25Eh, y se ha visto pues que también
1:20:27utilizar este tipo de anticuerpos en
1:20:30pacientes que no tienen cáncer también
1:20:32disminuye la población de células B, lo
1:20:35cual eh pues tiene como consecuencia eh
1:20:39pues una h disminución selectiva de la
1:20:44de del pues de las células inmunes.
1:20:47Entonces, esto por ejemplo permite como
1:20:50al ser la reducción de la población de
1:20:52linfocitos B, pues también ayuda a
1:20:55reducir la producción de autoanticuerpos
1:20:57que puede estar presente en estas
1:20:59enfermedades autoinmunes, ¿no?
1:21:03También los anticuerpos se pueden
1:21:04utilizar para el diagnóstico de
1:21:06enfermedades y no necesariamente los
1:21:07anticuerpos completos, se pueden
1:21:09utilizar eh fragmentos de anticuerpos
1:21:11donde solamente tenemos la parte de
1:21:14unión al antígeno, eh que estos, por
1:21:16ejemplo, se pueden acoplar eh con eh
1:21:20isótopos eh no que generen radiación
1:21:23gama, pero que permitan cierto tipo de
1:21:24de selección o con alguna molécula,
1:21:26algún por ejemplo algún fluoróforo,
1:21:28alguna molécula que genere una señal eh
1:21:31de manera que los anticuerpos funcionen
1:21:33como sondas biológicas que sean
1:21:37altamente específicas para detectar pues
1:21:39algún biomarcador. Por ejemplo,
1:21:44hay fragmentos de anticuerpos que se
1:21:45utilizan, o sea, que están dirigidos
1:21:48contra eh
1:21:52el
1:21:53antígeno carcinoembriónico, que ese, por
1:21:56ejemplo, está altamente expresado en
1:21:58cáncer de colon
1:22:00y se está acoplado, tiene una etiqueta,
1:22:03me parece que es radioactiva,
1:22:05la cual se puede utilizar en estudios de
1:22:08imaginología
1:22:10para pues para evaluar justamente la
1:22:13presencia de células de células
1:22:15tumorales o sea en este caso de cáncer
1:22:18de colon, por ejemplo, para ubicar
1:22:19tumores o para ver si ya eh pues sea eh
1:22:23estas células han hecho metástasis, ¿no?
1:22:26E
1:22:28y entonces, o sea, se puede utilizar
1:22:29esta esta lógica pues para para otro
1:22:32tipo de eh pues de marcadores de
1:22:35marcadores de cáncer.
1:22:37Ah, también eh como mencionábamos estas
1:22:41e de nuevo regresando al ejemplo de
1:22:44anticuerpos contra la molécula CD20 o
1:22:46que tengan mecanismos similares, eh si
1:22:49se ha visto que eh o anticuerpos que
1:22:53también neutralicen eh citinas
1:22:56eh puede, o sea, al final el uso de esos
1:22:58anticuerpos pueden tener un efecto como
1:23:00de atenuar o apagar el eh el sistema
1:23:02inmunológico.
1:23:04Estos mecanismos pues se pueden
1:23:05aprovechar, por ejemplo, para el
1:23:07trasplante de órganos, ¿no? Para reducir
1:23:11las, generar una inmunosupresión
1:23:13dirigida para reducir efectos
1:23:17secundarios asociados e pues con el
1:23:20rechazo con el rechazo a los órganos.
1:23:23También pues deseamos el el uso de los
1:23:24anticuerpos biespecíficos eh pues para
1:23:28ah para hacer un marcaje muchísimo más
1:23:30selectivo eh y hacer también más
1:23:34eficiente las e pues la detección por
1:23:37parte de las células inmunes.
1:23:42Y bien, también quisiera yo mencionarles
1:23:44de una terapia bastante interesante
1:23:47basada con, o sea, donde se utilizan
1:23:49anticuerpos terapéuticos
1:23:52que se utiliza para contra el cáncer,
1:23:54que es la técnica ADEP, que es de
1:23:56Antibody Directed Enz Prog Therapy, por
1:23:59sus siglas en inglés. Eh, esta técnica
1:24:03eh combina pues la inmunoterapia, o sea,
1:24:05el uso de anticuerpos y la quimioterapia
1:24:07dirigida.
1:24:09Aquí en este eh enfoque pues se utiliza
1:24:13eh a la parte del anticuerpo como una
1:24:17forma eh pues sí, este de
1:24:21direccionamiento
1:24:23molecular
1:24:25de un profármaco. Eh,
1:24:29esto se utiliza principalmente para el
1:24:30tratamiento de tumores sólidos que están
1:24:33localizados.
1:24:35Eh, aquí primero, o sea, esta técnica
1:24:37pues tiene varios pasos. La primera es
1:24:41administrar
1:24:42un anticuerpo eh monoclonal que va a
1:24:45estar conjugado o sí, o sea, conjugado a
1:24:48una enzima. esa eh esa enzima va a estar
1:24:52eh o sea, su actividad catalítica está
1:24:54centrada en la activación de un
1:24:57profármaco. Ya habíamos dicho que los eh
1:25:00que los profármacos son eh moléculas que
1:25:05se administran a los pacientes que en un
1:25:06principio no tienen actividad biológica,
1:25:09pero que cuando son metabolizadas en el
1:25:11cuerpo se generan metabolitos,
1:25:13obviamente se activan, o sea,
1:25:15metabolitos que son biológicamente
1:25:17activos. En este caso, pues lo que se
1:25:20está eh administrando
1:25:22es una es la enzima encargada de activar
1:25:26el profármaco. Y aquí en este caso el
1:25:29profármaco pues tiene la eh la
1:25:33particularidad pues de que tiene un
1:25:35efecto citotóxico.
1:25:38Entonces, decíamos que lo primero que se
1:25:40hace es que se administra este conjugado
1:25:44de antígeno enzima para que eh se
1:25:47localice y se una a las células
1:25:51tumorales. Obviamente el anticuerpo o el
1:25:53fragmento de anticuerpo, el que va a
1:25:55estar conjugado la enzima, pues debe de
1:25:56tener la selectividad o ser específico
1:26:00contra un biomarcador pues de las
1:26:01células cancerosas, de las células
1:26:03tumorales y que no esté presente en
1:26:06células sanas.
1:26:08Una vez que se une, eh se administra el
1:26:12profármaco
1:26:14eh el cual eh pues va a estar en la
1:26:17circulación y o sea, conforme pues se
1:26:21vaya eh distribuyendo y expandiéndose
1:26:23por los tejidos, pues va a llegar algún
1:26:24punto en el que eh pues se encuentre con
1:26:27ese complejo eh ese complejo de
1:26:30anticuerpo encima y justamente cuando
1:26:33pase por ahí eh pues se va a activar y
1:26:36va a ejercer el efecto citotóxico, el
1:26:38cual pues va a estar más localizado
1:26:42eh pues a las células tumorales.
1:26:44Entonces, no es necesario administrar eh
1:26:47tanta cantidad del profármaco para
1:26:49inducir un efecto citotóxico. Aquí,
1:26:52pues, ¿qué particularidades tiene eh
1:26:54esta técnica? Pues para empezar
1:26:56tendríamos que utilizar, o sea, hay que,
1:26:58o sea, se tiene que seleccionar muy bien
1:27:00este combo de profármaco y encima que la
1:27:03metaboliza. Eh, pues primero que nada,
1:27:07yo creo que para asegurar
1:27:10la seguridad del tratamiento, pues es
1:27:12que sea una
1:27:15enzima que nosotros no produzcamos, o
1:27:17sea, que no seamos capaces de activar
1:27:19ese profármaco, ¿no? y que también pues
1:27:23deseamos que ese complejo del anticuerpo
1:27:25pues sea altamente específico para
1:27:27células cancerosas porque pues
1:27:28obviamente si se va a unir a células
1:27:30sanas pues ahí también va a ejercer un
1:27:33efecto tóxico.
1:27:38Y bueno, ahora vamos a pasar al segundo
1:27:40tipo de ah medicamentos o pl eh
1:27:43productos biotecnológicos eh que vamos a
1:27:45hablar en este video que son las
1:27:47vacunas.
1:27:48La vacunación como tal constituye una de
1:27:50las intervenciones más exitosas en la
1:27:53historia de la salud pública. Eso
1:27:54siempre lo he dicho yo, junto con eh el
1:27:58descubrimiento también de eh los
1:28:00antibióticos, el drenaje y el agua
1:28:02potable, el hervir el agua. No, lo son
1:28:05han sido de las ah de las acciones eh
1:28:08humanas que han permitido ampliar la
1:28:10expectativa de vida eh por mucho. Eh y
1:28:14actualmente pues la vacunación es un
1:28:17pilar fundamental de la medicina de
1:28:19prevención.
1:28:20Una vacuna la podemos definir como
1:28:22aquella preparación biológica que
1:28:24contiene uno o más antígenos capaces de
1:28:26inducir una respuesta inmune específica
1:28:29y que sea capaz de generar una memoria
1:28:32protectora frente a un patógeno, una
1:28:34toxina o una célula anómala. Si se
1:28:36fijan, aquí esta eh definición de vacuna
1:28:39ya se ha ido extendiendo no nada más a
1:28:41gentes infecciosos, sino pues también a
1:28:44otro tipo de enfermedades, como por
1:28:46ejemplo el cáncer.
1:28:48En general, las vacunas, la mayoría de
1:28:50las vacunas están diseñadas para
1:28:52prevenir la aparición de enfermedades o
1:28:55también para modificar su curso antes
1:28:57que de que se desarrollen
1:28:59manifestaciones clínicas eh importantes.
1:29:03Eh, el principio central de la
1:29:06vacunación se basa en la capacidad del
1:29:08sistema inmuneadaptativo para eh
1:29:11recordar exposiciones previas a
1:29:13antígenos. Eh, de manera que eh, o sea,
1:29:18la vacunas lo que buscan es generar eh o
1:29:21tratar de activar el sistema inmune como
1:29:23si fuera la enfermedad, pero sin
1:29:26necesidad de generar esa enfermedad.
1:29:29Ah, ya habíamos ah mencionado eh
1:29:35pues cuáles son los procesos eh de
1:29:37inmunización eh cuando hablamos de la
1:29:40inmunogenicidad.
1:29:43La inmunización inicia con la
1:29:45introducción del antígeno vacunal en el
1:29:47organismo, generalmente por vía
1:29:50intramuscular o subcutánea, aunque pues
1:29:52también ya se han trabajado estrategias,
1:29:54por ejemplo, para vacunas, para inducir
1:29:56la inmunidad eh oral.
1:29:58En el sitio de administración, el
1:30:00antígeno eh se va a encontrar con las
1:30:02células del sistema inmune innato.
1:30:05Particularmente deseamos las células
1:30:07presentadoras de antígeno que eh que
1:30:09entre estas se encuentran las células
1:30:11dendríticas eh y los macrófagos.
1:30:15Ah, el reconocimiento inicial del
1:30:16antígeno va a ocurrir mediante eh
1:30:19receptores de reconocimiento de patrones
1:30:21o los PRRs que ya habíamos mencionado
1:30:24también el tema de inmunogenicidad.
1:30:26También teníamos eh los receptores eh
1:30:28tipo tol o TLRs que detectan estructuras
1:30:31eh moleculares asociadas a diferentes
1:30:33patógenos o señales de peligro, como
1:30:35decíamos, eh material genético
1:30:38bacteriano, el hipopolisacárido, entre
1:30:40otros.
1:30:41Eh, el reconocimiento de estos antígenos
1:30:44por las células presentadoras de
1:30:45antígeno va a activar eh rutas de
1:30:48señalización que van a inducir la
1:30:50liberación de citinas proinflamatorias y
1:30:53quimiosinas, promoviendo un ambiente
1:30:55inflamatorio.
1:30:57Eh, este proceso va va a favorecer tanto
1:31:00la activación del sistema inmune, así
1:31:02como eh el reclutamiento de más células
1:31:05inmunes al sitio de administración.
1:31:09E tras la captura del antígeno, eh las
1:31:12células dendríticas o las células
1:31:14procesadoras eh de antígeno van a
1:31:16procesar mediante degradación
1:31:18proteítica,
1:31:20eh los antígenos y los peptidos
1:31:23resultantes se van a cargar e en
1:31:25moléculas del complejo mayor
1:31:27distocompatibilidad, que ya también
1:31:29hablamos habíamos hablado de este en la
1:31:30unidad anterior. Los antígenos
1:31:34presentados
1:31:36eh los reconocen, por ejemplo, los
1:31:38linfocitos linfocitos T CD4 positivos eh
1:31:42mediante mecanismos de presentación
1:31:44cruzada.
1:31:46E y eh una vez activadas, pues las
1:31:51células eh dendríticas van a migrar, por
1:31:54ejemplo, hacia los ganglios linfáticos,
1:31:57donde eh pues aquí ya se van a encontrar
1:31:59con eh los linfocitos C.
1:32:02Eh, generalmente son linfocitos T eh
1:32:05vírgenes y después de este proceso eh de
1:32:10eh de presentación se van a eh se van a
1:32:14activar
1:32:15la activación de los linfocitos va a
1:32:17conducir a la diferenciación de estos en
1:32:20suspoblaciones efectoras, por ejemplo,
1:32:23como células T helper o cooperadoras del
1:32:26tipo uno, o sea, TH1, TH2, entre otras.
1:32:29E estas células, estos linfocitos van a
1:32:32coordinar la respuesta inmune mediante
1:32:34la secreción de citinas que van a su vez
1:32:37a estimular otros componentes del
1:32:38sistema del sistema inmunológico, eh por
1:32:41ejemplo, promoviendo la producción de
1:32:43anticuerpos, ¿no?
1:32:46A su vez, eh los linfocitos eh T, por
1:32:50ejemplo, linfocitos TCD8 se pueden
1:32:52diferenciar en células T citotóxicas
1:32:55capaces de reconocer y eliminar eh las
1:32:57células infectadas o eh pues las células
1:33:00patógenas, ¿no? Ah, este, por ejemplo,
1:33:03este componente es importante en las
1:33:05vacunas eh contra virus intracelulares.
1:33:08Es a través justamente de los linfocitos
1:33:09tes citotóxicos eh que pues se permite
1:33:12este reconocimiento, ¿no? ya sea eh
1:33:15deseamos en eh células infectadas por
1:33:18virus o incluso también en en células
1:33:21cancerosas.
1:33:23también la activación de los linfocitos
1:33:24T, eh, pues van a reconocer antígenos
1:33:28mediante su receptor y van a eh producir
1:33:32una, o sea, tras la unión al antígeno,
1:33:34los linfocitos B
1:33:37eh generar una respuesta humoral, es
1:33:39decir, eh este proceso de maduración,
1:33:44afinidad, eh arreglo genético y cambio
1:33:47de isotipo para producir eh
1:33:49inmunoglobulinas específicas contra el
1:33:52antígeno o el potencial patógeno.
1:33:55Hm.
1:33:58Y bueno, eh de manera análoga eh parte
1:34:01de los linfocitos T activados y también
1:34:04los linfocitos B, pues se van a
1:34:05diferenciar en células de memoria, los
1:34:08cuales pueden residir eh en los ganglios
1:34:12eh en lo en el vaso o en tejidos
1:34:14periféricos. Eh, y es justamente estas
1:34:17células de memoria las que tienen pues
1:34:19también mucha importancia en que la
1:34:21inmunización de las vacunas eh sea
1:34:25durardera, ¿no? Ya que el hecho de que
1:34:27se generen estas células de memoria pues
1:34:30hace que tras una segunda eh tras una
1:34:33exposición con el antígeno o el patógeno
1:34:36eh pues estas células respondan con
1:34:38mayor rapidez y eficacia.
1:34:45Y bueno, tenemos eh las vacunas eh las
1:34:48vacunas clásicas, que estas fueron eh
1:34:50pues una de las primeras estrategias
1:34:52para inducir la inmunidad frente a
1:34:54muchas enfermedades infecciosas.
1:34:56Eh, aunque bueno, eh, o sea, muchas de
1:34:59estas vacunas pues ya tienen varias eh
1:35:01varias décadas o incluso pues ya podemos
1:35:03hablar de siglos eh de uso. Eh, a pesar
1:35:06de esto, pues muchas de estas eh siguen
1:35:08siendo utilizadas debido a su eh gran eh
1:35:13eficacia en la prevención de
1:35:14enfermedades. Por ejemplo, podemos
1:35:17hablar de la vacuna BCG contra la
1:35:19tuberculosis, que es bastante efectiva,
1:35:21eh segura y pues no es muy eh costosa.
1:35:26costosa de producir.
1:35:28Eh, desde la perspectiva de la
1:35:31inmunología, las vacunas clásicas pues
1:35:33tienen eh pues la ventaja de presentar
1:35:36múltiples epítopos o antígenos al
1:35:39sistema eh inmunológico al mismo tiempo,
1:35:42lo que va a generar respuestas inmunes
1:35:45amplias y se dice que resilientes o más
1:35:48efectivas frente a diferentes eh
1:35:50variantes antigénicas de los patógenos.
1:35:54Ah, sin embargo, eh, pues habrá habrá
1:35:58algunas vacunas eh pues que también
1:36:00tengan eh o sea, que a pesar de ser muy
1:36:02efectivas, pues tengan ahí algunos
1:36:04efectos adversos derivados por la
1:36:06inmunogenicidad que puede aumentar eh el
1:36:09riesgo o la seguridad del uso de estas
1:36:11vacunas.
1:36:14Ah, aquí podríamos nosotros ah
1:36:18clasificar a las vacunas clásicas en
1:36:21diferentes tipos. Las primeras serían
1:36:23las vacunas vivas atenuadas, obviamente
1:36:27eh las vacunas vivas atenuadas contienen
1:36:29a microorganismos vivos, viables, que
1:36:32han sido debilitados mediante un cultivo
1:36:35prolongado en condiciones no
1:36:36fisiológicas o por adaptación a
1:36:39hospederos eh alternativos.
1:36:42Aquí el objetivo de estas vacunas es, o
1:36:45sea, que estén atenuadas para reducir su
1:36:47su virulencia, o sea, el grado de
1:36:50severidad de la enfermedad que pueden
1:36:52generar sin eliminar su capacidad de
1:36:54replicación.
1:36:56Eh, estas vacunas simulan de forma más
1:37:00cercana a lo real a una infección
1:37:02natural, lo que va a permitir que se
1:37:04induzcan respuestas inmunes humorales y
1:37:06celulares intensas y una buena
1:37:08generación de memoria. eh sin presentar
1:37:11eh la enfermedad, ¿no? Dado que se
1:37:15pueden replicar, pues generan una
1:37:16estimulación prolongada del sistema
1:37:18inmune. También el hecho de que estemos
1:37:20hablando de el
1:37:23del organismo completo, que pues que
1:37:25haya muchos antígenos que puedan activar
1:37:28el sistema inmune, entonces la inmunidad
1:37:31se genera es más efectiva, incluso se
1:37:33puede generar inmunidad eh de mucosas,
1:37:35lo cual permite eh pues una dosis
1:37:37incluso eh menor para generar una buena
1:37:41respuesta inmune duradera.
1:37:44Sin embargo, pues tiene la desventaja eh
1:37:46de una desventaja importante de
1:37:48seguridad, especialmente en individuos
1:37:51eh inmunocomprometidos,
1:37:53donde puede al estar auadas, o sea, es
1:37:55decir, que estén vivas todavía, pues
1:37:58puede haber un riesgo de eh reactivación
1:38:01o que pacientes que tengan el sistema
1:38:02inmune comprometido pues generen eh una
1:38:05enfermedad por el uso de la vacuna.
1:38:08Eh, otro grupo de vacunas clásicas son
1:38:11las vacunas inactivadas o o también
1:38:13conocidas como vacunas muertas. En estas
1:38:17el patógeno completo se cultiva y
1:38:19posteriormente se inactiva mediante
1:38:21tratamientos físicos o químicos que van
1:38:23a ser irreversibles, como por ejemplo el
1:38:26uso de calor o el formal de Ido. Eh, a
1:38:29diferencia de las vacunas vivas
1:38:30atenuadas, eh las vacunas inactivadas
1:38:34pues no tienen esta capacidad de
1:38:36replicación. Lo cual pues es una ventaja
1:38:39en cuanto al perfil de seguridad, pues
1:38:40porque no hay no hay riesgo de algún
1:38:43tipo de reactivación.
1:38:45Sin embargo, pues la falta de
1:38:47replicación eh reduce su
1:38:49inmunogenicidad. Además eh el hecho de
1:38:51que pues tal vez estamos hablando aquí
1:38:52de ya no de eh un patógeno completo
1:38:56muerto, sino de fragmentos de patógenos,
1:38:58partículas más pequeñas que también pues
1:39:00van a ser menos inmunogénicas. Por lo
1:39:03tanto, eh este tipo de vacunas eh suelen
1:39:06requerir varias eh dosis o refuerzos,
1:39:08pues para poder inducir una protección
1:39:10adecuada.
1:39:13Eh se ha visto que las vacunas
1:39:15inactivadas inducen predominantemente
1:39:18respuestas morales, es decir, que
1:39:20generan anticuerpos, pero que no son tan
1:39:22eficaces para activar, inducir una
1:39:25inmunidad eh celular en comparación con
1:39:27las vacunas, las vacunas vivas. Sin
1:39:30embargo, pues estas se eh pues se han
1:39:32utilizado para eh el control de pues de
1:39:35muchas eh de muchas enfermedades.
1:39:39Hm. También tenemos las vacunas basadas
1:39:42en toxoides
1:39:44o en toxinas. Eh, estas estas vacunas se
1:39:48emplean en enfermedades donde eh pues la
1:39:51enfermedad o la patogenicidad se genera
1:39:55principalmente por toxinas bacterianas.
1:39:57O sea, el problema es la toxina, no
1:39:59tanto eh pues la la bacteria que genera
1:40:02la toxina. Eh, de aquí podríamos hablar
1:40:05del el botulismo o el tétanos, ¿no?, que
1:40:08pues el problema justamente radica eh la
1:40:11toxina, ¿no? Eh, entonces aquí en este
1:40:14caso, en este tipo de vacunas de
1:40:16toxoides, lo que se hace es que las
1:40:18toxinas se purifican y se inactivan
1:40:20químicamente para eliminar su toxicidad,
1:40:23pero conservando su capacidad
1:40:25antigénica.
1:40:27Ah, aquí pues también lo que se busca en
1:40:29este tipo de vacunas es que se generen
1:40:30anticuerpos neutralizantes que bloqueen
1:40:33pues la actividad eh la actividad de la
1:40:36toxina.
1:40:38Ah, también tenemos eh las vacunas de
1:40:41subunidades
1:40:42eh que estas consisten en fracciones
1:40:44purificadas del patógeno obtenidas
1:40:47mediante métodos bioquímicos eh
1:40:49tradicionales, ¿no? Entonces, estos
1:40:50pueden eh incluir, por ejemplo, alguna
1:40:52proteína de superficie, eh polisacáridos
1:40:55eh o algún componente eh estructural
1:40:58relevante del patógeno.
1:41:02Aquí ah
1:41:06podríamos hablar, por ejemplo, de las
1:41:07vacunas de polisacáridos para generar
1:41:10inmunidad contra la cápsula bacteriana
1:41:13de eh pues de muchas bacterias. Ah,
1:41:17estas vacunas inducen respuestas
1:41:19sumorales, es decir, de anticuerpos
1:41:21contra estructuras superficiales del
1:41:23patógeno.
1:41:25Sin embargo, eh pues las vacunas de
1:41:29subunidades
1:41:31tienen las grandes ventajas que como
1:41:33estamos hablando de un fragmento, de un
1:41:35extracto específico del patógeno, pues
1:41:38es que la eh pues la inmunidad que puede
1:41:41producir está eh pues mucho más eh
1:41:44limitada y no suele generalmente se
1:41:46genera una inmunidad eh humoral y no
1:41:49tanto in unidad, una inmunidad celular o
1:41:52que también eh la memoria eh pues no es
1:41:55muy fuerte. muerte. Entonces, pues aquí
1:41:56estas vacunas necesitan eh de varios
1:41:58refuerzos.
1:42:02Eh, y bien, con la llegada pues de la
1:42:04biotecnología y la tecnología del ADN
1:42:06recombinante, pues ya se han podido eh
1:42:09generar eh vacunas biotecnológicas eh en
1:42:14las cuales pues ya no es necesario eh
1:42:16manipular al patógeno, es que porque es
1:42:18algo que sucede con las vacunas con las
1:42:20vacunas clásicas, lo cual pues tiene eh
1:42:22pues trae consigo pues muchos riesgos
1:42:24tanto para la pues para los trabajadores
1:42:27que van a generar las vacunas. Eh,
1:42:29también pues en cuanto a la seguridad en
1:42:31la infraestructura que se deben tener
1:42:33las instalaciones donde se generan las
1:42:34vacunas clásicas. Entonces, ya con la
1:42:37biotecnología se pueden diseñar
1:42:38estrategias eh mucho más seguras, eh
1:42:41mucho más eh eficaces e incluso donde eh
1:42:46se generan
1:42:48variantes biotecnológicas multivalentes,
1:42:51¿no?, dirigidas contra diferentes
1:42:54tipos de patógenos.
1:42:56entre un tipo de vacuna biotecnológica
1:42:58eh que se me hace a mí muy interesante,
1:43:01aunque no es la más utilizada en el
1:43:04mercado actualmente, eh pero pues que es
1:43:06bastante interesante, son las vacunas
1:43:08genéticamente eh modificadas.
1:43:11Estas se desarrollan mediante la
1:43:13manipulación del patógeno o bien de
1:43:15vectores eh microbianos.
1:43:18Eh, aquí eh el fundamento principal de
1:43:22estas vacunas
1:43:24eh consiste en utilizar organismos vivos
1:43:27capaces de replicarse de forma limitada
1:43:29en el huésped, pero que no tengan un
1:43:31potencial patogénico, es decir, que no
1:43:33eh generen una enfermedad. Eh, esa
1:43:38reducción del potencial patogénico se
1:43:40lleva a cabo mediante modificaciones
1:43:42genéticas específicas.
1:43:44Estas modificaciones pueden implicar eh
1:43:46la delesión o el genes de virulencia, la
1:43:50inactivación de rutas metabólicas
1:43:52esenciales para el patógeno o la
1:43:55introducción de mutaciones que limiten
1:43:57la capacidad replicativa de pues del del
1:44:00microorganismo, ¿no? con el objetivo de
1:44:04conservar la capacidad de estimular la
1:44:06respuesta inmune robusta al estar
1:44:07trabajando con el patógeno completo,
1:44:10pero que no genere eh, o sea, que sería
1:44:12lo similar a una infección natural,
1:44:14minimizando el riesgo de que se genere
1:44:17una enfermedad asociada con el uso eh de
1:44:20la vacuna. Ah,
1:44:23un ejemplo de este que podríamos
1:44:26mencionar, o sea, que se me viene a la
1:44:27mente, es se ha trabajado en el
1:44:29desarrollo de una eh vacuna contra el
1:44:33cólera eh modificada genéticamente, en
1:44:37el cual se le ha deletado los genes que
1:44:40codifican para la toxina del cólera,
1:44:42porque aquí, igual que con el tétanos o
1:44:44con el botulismo,
1:44:46el problema del cólera, lo que produce
1:44:49las diarreas eh es excesivas en en esta
1:44:54en este tipo de infecciones es
1:44:55justamente la toxina del cólera. Sí, la
1:44:57toxina del cólera lo que hace es que se
1:44:59une eh al a los canales eh de sodio y
1:45:04potasio de las células epiteliales del
1:45:06intestino, lo cual, o sea, genera ahí un
1:45:08descontrolónico,
1:45:10lo cual, o sea, hace una salida
1:45:13eh descontrolada de iones y de agua, lo
1:45:16cual produce esa deshidratación. y el
1:45:18problema eh tan agudo de las infecciones
1:45:20del cólera. Entonces, se ha generado una
1:45:24cepa de cólera genéticamente modificada
1:45:26que no expresa esta toxina. Entonces,
1:45:28sin embargo, pues sí estamos hablando de
1:45:30eh la bacteria del cólera completa.
1:45:32Entonces, al administrar eh a los
1:45:34pacientes con esta eh con esta bacteria,
1:45:37pues se pueden generar anticuerpos
1:45:39contra la bacteria para que puedan
1:45:42atacarla eh en el caso de que haya una
1:45:44exposición eh y pues reducir por ende la
1:45:47población bacteriana y la generación de
1:45:49la la producción de la de la toxina, que
1:45:52aclaro, no se van a producir anticuerpos
1:45:54contra la toxina, sino contra eh la
1:45:56bacteria.
1:45:58Eh,
1:46:00entonces, una de las principales
1:46:01ventajas de utilizar vacunas vivas
1:46:04genéticamente atenuadas es la
1:46:06posibilidad pues de diseñar estas
1:46:08atenuaciones eh de forma eh pues
1:46:10racional, intencional, ¿no?
1:46:14Aquí, por ejemplo, una atenuación
1:46:15clásica hablando de las vacunas
1:46:19eh de las vacunas atenuadas por técnicas
1:46:23convencionales, pues aquí los cambios
1:46:24pues no son tan específicos, es son más
1:46:26difíciles de controlar. Entonces, con la
1:46:29con la ingeniería genética, pues podemos
1:46:31identificar y modificar genes
1:46:33específicos, ¿no? Esto da una mayor
1:46:35previsibilidad en términos de seguridad
1:46:38y reduce el riesgo de pues de que haya
1:46:40esta reversión, ¿no?, de la o esta
1:46:43reactivación de los patógenos.
1:46:47Eh,
1:46:49de estos, pues nosotros podemos
1:46:50clasificar a las vacunas vivas
1:46:53genéticamente modificadas en dos tipos.
1:46:56los patógenos atenuados mediante
1:46:58ingeniería genética o vectores vivos
1:47:00recombinantes. Los patógenos atenuados
1:47:03genéticamente, pues así como decíamos el
1:47:05caso de la de una bacteria del cólera
1:47:09que no produce la toxina o por ejemplo,
1:47:11como se muestra aquí en la diapositiva,
1:47:12en la figura de la izquierda, pues
1:47:14podemos tener eh partículas eh virales a
1:47:18los cuales se les ha modificado el
1:47:19genoma, eh el cual no permite que se
1:47:24repliquen dentro de la célula. eh dentro
1:47:26de la célula que infectan, ¿no? O sea,
1:47:28donde venga el material genético para
1:47:30producir más partículas virales, pero
1:47:32que no se repliquen. Entonces, se
1:47:34liberan esas partículas
1:47:36y se puede eh se puede generar la eh
1:47:41pues la inmunogenicidad, ¿no? Eh, por
1:47:44otro lado, las los vectores vivos
1:47:46recombinantes. Aquí en este caso se
1:47:48utilizan microorganismos vectores como
1:47:51virus o bacterias que no son patógenos.
1:47:55o que han sido modificados para que ya,
1:47:58o sea, que han sido inactivados
1:48:00genéticamente, o sea, que ya no son
1:48:02patógenos, pero que además se modifican
1:48:04genéticamente para que expresen
1:48:08antígenos de otros patógenos. es como si
1:48:10disfrazáramos de patógeno a un organismo
1:48:13no patógeno. Eh, este enfoque permite
1:48:15utilizar plataformas más versátiles y
1:48:18más seguras, ¿no?
1:48:21Eh, por ejemplo, las vacunas basadas en
1:48:23vectores virales recombinantes, en estos
1:48:26casos se insertan genes que codifican
1:48:27antígenos de interés de en el genoma del
1:48:31virus del vector. Estos vectores pueden
1:48:34ser tanto replicativos como no
1:48:35replicativos.
1:48:37Eh, los vectores replicativos eh pues
1:48:40pueden tener efectos más duraderos eh en
1:48:43el huésped
1:48:44y los no replicativos pues están nada
1:48:46más diseñados para entrar en las
1:48:47células, expresar el antígeno y no
1:48:50generar una progenie viral, lo que
1:48:53mejora pues hasta cierto punto el perfil
1:48:54de eh de seguridad. Ah, aquí pues las
1:48:58ventajas es que como estamos eh
1:49:00trabajando con, o sea, si bien el vector
1:49:02no es el patógeno completo, pues es una
1:49:04es una, ya sea una bacteria o un virus,
1:49:06pues es una partícula
1:49:08pues antigénica, pues mucho más grande a
1:49:10que si estuviéramos trabajando con el
1:49:12antígeno aislado solo como una vacuna de
1:49:14subunidades. Suele este tipo de eh de
1:49:17vectores pues son más inmunogénicos.
1:49:20Hm. De aquí de eh un ejemplo que
1:49:22podríamos ah
1:49:25utilizar eh es por ejemplo la vacuna la
1:49:29vacuna patria que bueno de hech de hecho
1:49:32pues la iniciativa era interesante. Yo
1:49:33creo que ya no, hasta el momento no ha
1:49:35salido eh al mercado, pero aquí la
1:49:37estrategia eh de diseño eh pues era
1:49:40justamente esto, era eh una partícula
1:49:43viral eh ahorita no recuerdo el virus,
1:49:45pero eh y es algo muy similar a lo que
1:49:48se muestra aquí en la diapositiva del
1:49:49lado derecho, una partícula viral a la
1:49:52cual eh pues se le insertó en su genoma
1:49:56eh o sea, un virus que no era patógeno,
1:49:59o sea, al menos no para los humanos.
1:50:02Este, dentro de su material genético, en
1:50:05su genoma, se le integraron las
1:50:06secuencias que codifican para la
1:50:08proteína eh spike en su cápsida.
1:50:10Entonces, aquí el producto es una
1:50:12partícula viral disfrazada eh disfrazada
1:50:15de COVID, pero que no es capaz de eh de
1:50:18producir la enfermedad.
1:50:20Eh, ¿qué ventajas tienen las vacunas
1:50:22genéticamente modificadas? pues es que
1:50:24conservan eh las ventajas de las vacunas
1:50:26vivas clásicas, es decir, que pues es un
1:50:29eh organismo o una partícula infecciosa
1:50:31eh completa de mayor tamaño, lo cual
1:50:33permite eh una presentación de antígeno
1:50:36eh más prolongada y más si estamos
1:50:38hablando de que sea replicativa.
1:50:41Eh, por lo tanto, pues puede eh producir
1:50:43respuestas inmunes tanto morales eh como
1:50:47celulares.
1:50:49Eh, otra ventaja es la flexibilidad del
1:50:52diseño. O sea, pues al trabajar con
1:50:55ingeniería genética, pues podemos eh
1:50:57incorporar múltiples epítopos o
1:50:59diferentes elementos que pues nos ayuden
1:51:01a potenciar la eh inmunidad.
1:51:04Eh, también es posible diseñaras eh
1:51:07multivalentes para proteger contra
1:51:09varios patógenos con una sola con una
1:51:11sola dosis. Ah, ¿qué podríamos decir de
1:51:15eh desventajas? Hm. Aquí pues también el
1:51:19uso de organismos vivos pues sigue
1:51:21utilizando, implicando, perdón, eh
1:51:23consideraciones regulatorias estrictas.
1:51:26O sea, tenemos que estar eh tenemos es
1:51:28importante demostrar que se han
1:51:30utilizado eh los candados h biológicos o
1:51:34moleculares suficientes para reducir el
1:51:36riesgo de recominación genética o de
1:51:39diseminación ambiental. Eh, además ah se
1:51:43ha visto que la inmunidad preexistente
1:51:46que podría eh
1:51:48eh existir contra eh del contra el mismo
1:51:52vector puede limitar la eficacia eh de
1:51:54algunas vacunas. Por ejemplo, si esto
1:51:57esto en el caso de que se utilicen
1:51:59partículas eh vectores virales, por
1:52:01ejemplo, parecidos a de novirus, a que
1:52:03sean virus ah muy similares a a virus
1:52:08respiratorios, eh luego a veces pues el
1:52:11sistema inmune ya, o sea, nosotros ya
1:52:13nos hemos expuesto eh pues la mayoría a
1:52:15lo largo de nuestra vida a virus
1:52:16respiratorios, entonces ya tenemos eh
1:52:18anticuerpos contra los vectores,
1:52:20entonces eso también puede ayudar a, o
1:52:22sea, esto hace que se reduzca un poquito
1:52:24la eficacia de de este tipo de vacunas.
1:52:31Otro tipo de vacunas biotecnológicas son
1:52:34las vacunas de subunidades
1:52:35recombinantes.
1:52:37Eh, este yo creo que es el tipo de
1:52:39vacuna biotecnológica que más eh se ha
1:52:43explotado hasta el momento. Eh, pues por
1:52:46su principalmente por su h facilidad en
1:52:51cuanto a las herramientas
1:52:52biotecnológicas disponibles. Aquí se
1:52:54sigue una lógica muy similar como para
1:52:55la producción de cualquier otro eh
1:52:58biofarmacéutico.
1:52:59Aquí el fundamento de las vacunas de
1:53:02subunidades eh consiste en identificar
1:53:05proteínas o fragmentos antigénicos del
1:53:08patógeno. Obviamente, pues aquí tendrían
1:53:10que ser antígenos de origen proteico,
1:53:15que generalmente están presentes en
1:53:16estructuras de la superficie de los
1:53:19patógenos y que son responsables de la
1:53:21interacción con el huésped. Sí. y
1:53:24producir estos antígenos de manera
1:53:27independiente mediante sistemas de
1:53:28expresión recombinante como eh por
1:53:32ejemplo levadura, células vegetales,
1:53:34células animales
1:53:37con tecnología del ADN recombinante.
1:53:39Estos antígenos se purifican y se
1:53:41formulan como vacunas capaces de inducir
1:53:43respuestas inmunes protectoras sin
1:53:45necesidad de utilizar el patógeno
1:53:47completo.
1:53:48Este enfoque pues ha permitido reducir
1:53:51de manera significativa los riesgos
1:53:53asociados con virulencia residual o
1:53:55reversión de patógenos, reactivación de
1:53:58patógenos.
1:53:59Eh, aquí lo importante pues es eh
1:54:02seleccionar el antígeno pues correcto
1:54:05que sea eh más inmunogénico, ¿no?
1:54:07Idealmente pues tendría que ser el
1:54:09antígeno más conservado entre estos
1:54:12patógenos, el más dominante y capaz de
1:54:15eh inducir respuestas neutralizantes o
1:54:17protectoras.
1:54:20decíamos que eh pues tiene que ser de
1:54:22origen proteico. En este caso o en
1:54:24muchos casos eligen proteínas de
1:54:26superficies virales o bacterianas que
1:54:29participan en la entrada del patógeno a
1:54:30las células, porque obviamente generar
1:54:33anticuerpos que neutralizan estas
1:54:34estructuras pueden bloquear la infección
1:54:37de estos patógenos, como el caso eh pues
1:54:40de las vacunas contra el COVID eh eh
1:54:44pues lo que buscaban era justamente
1:54:46bloquear la proteína spike para evitar
1:54:48la infección.
1:54:50Ah, aquí pues la identificación de estos
1:54:53blancos pues requiere eh pues estudios
1:54:56obviamente pues de la secuenciación del
1:54:58genoma, eh
1:55:01mucho de predicción eh de estructuras y
1:55:04también eh análisis informático, pues
1:55:06para ver cuáles son eh las secuencias o
1:55:09los fragmentos que pudieran ser eh más
1:55:12inmunogénicos.
1:55:14Ah, aquí pues los eh los antígenos se
1:55:18pueden producir en bacterias, levaduras,
1:55:20células de insecto, eh células de
1:55:21mamífero, como ya lo habíamos
1:55:23mencionado. Aquí estos obviamente pues
1:55:25se van a purificar
1:55:27eh
1:55:29y pues utilizar estas plataformas pues
1:55:31permite hacerlo eh lo suficientemente
1:55:33escalable a nivel a nivel industrial,
1:55:37¿no?
1:55:42Aquí
1:55:44una de las particularidades que tienen
1:55:46las vacunas de subunidades ah
1:55:49recombinantes, pues es que como nada más
1:55:50estamos hablando de un cachito del
1:55:52patógeno, eh pues el el perfil de
1:55:55eficacia eh pues es mucho menor que
1:55:58estuvimos hablando de un patógeno
1:55:59completo, de una vacuna viva. carecer
1:56:02los mecanismos de replicación
1:56:05y pues otro tipo de, o sea, nada más
1:56:06estamos hablando de un antígeno,
1:56:09eh pues la inmunogenicidad basal suele
1:56:11ser menor, por lo cual en este tipo de
1:56:14formulaciones
1:56:16es casi imprescindible
1:56:19el uso de ayubantes, es indispensable
1:56:22prácticamente.
1:56:24Los ayubantes, recordemos que potencian
1:56:26la respuesta inmune al activar la
1:56:28inmunidad innata, mejorar la
1:56:30presentación de los antígenos y promover
1:56:32la formación de la memoria inmunológica
1:56:35duradera.
1:56:37Eh, y bueno, a pesar de que tengan una
1:56:39baja inmunogenicidad, las vacunas de
1:56:41subunidades pues eh pues son ampliamente
1:56:44utilizadas, presentan muchas ventajas,
1:56:47especialmente en términos de seguridad.
1:56:50eh al no trabajar con microorganismos
1:56:52vivos ni con genomas completos, pues
1:56:53elimina el riesgo de infección asociada
1:56:55a la vacuna,
1:56:57eh lo cual pues las hace eh adecuadas
1:56:59para eh poblaciones vulnerables,
1:57:01personas eh eh niños, adultos mayores o
1:57:06personas con el sistema inmuno
1:57:09comprometidas, perdón.
1:57:11Ah,
1:57:13otra ventaja pues es la flexibilidad de
1:57:15diseño. El utilizar ingeniería genética
1:57:17nos permite modificar, por ejemplo,
1:57:19antígenos para hacerlos más estables,
1:57:21exponer epítopos relevantes o eliminar
1:57:24regiones que pudieran llegar a ser eh
1:57:27problemáticas. eh como es lo también lo
1:57:30que pasa con el la vacuna que generamos
1:57:32en el laboratorio, pues es justamente
1:57:33una vacuna de subunidades que tiene eh
1:57:36que está digamos eh
1:57:39potenciada para ser más inmunogénica al
1:57:41contener nada más pues las regiones de
1:57:45la proteína GP120, eh pues las regiones
1:57:48más inmunogénicas y tener varios
1:57:50repetidos pues para hacerla todavía más
1:57:53inmunogénica.
1:57:54Ah, también es posible generar en estas
1:57:56plataformas versiones eh multivalentes
1:57:59para varios antígenos en una misma
1:58:00formulación, lo cual amplía eh el
1:58:03especto de de protección.
1:58:06Ah, también pues en cuanto a la
1:58:09manufactura, pues al ser recombinantes y
1:58:11producirse en sistemas biológicos bien
1:58:13establecidos y que sean fáciles de eh de
1:58:17purificar, pues es más fácil la
1:58:18estandarización, la escalabilidad y el
1:58:20control de calidad.
1:58:22Ah, ¿qué limitantes pues tenemos? pues
1:58:24la necesidad de ayubante, pues la baja
1:58:26inmunogenicidad eh que tiene, ¿no?
1:58:28También muchos de estos eh de estas
1:58:30vacunas pues requieren eh pues de varias
1:58:34eh varias dosis o varios refuerzos para
1:58:37eh para que sean lo suficientemente
1:58:39efectivas. Y bueno, en la diapositiva se
1:58:42muestra eh una tabla pues de algunos
1:58:44ejemplos de vacunas de subunidades que
1:58:46se que están disponibles en el mercado.
1:58:49Aquí pues podríamos resaltar pues las
1:58:50más la predominante eh pues son las
1:58:54vacunas de subunidades de los antígenos
1:58:57eh de diferentes eh tipos de hepatitis,
1:59:01hepatitis A, B eh y C.
1:59:05Eh, porque se ha visto particularmente
1:59:06que este tipo de virus eh tienen un
1:59:09antígeno de superficie que una subunidad
1:59:12justamente que se que al momento de
1:59:14producirse forma recombinante en la
1:59:16formulación tiene esta capacidad de
1:59:18autoensamblarse y de generar incluso
1:59:21algo pues muy similar a a partículas
1:59:24similares a virus, lo cual puede hacer
1:59:26que eh pues sea más inmunogénica y sea
1:59:28mucho más efectiva, aunque no es el no
1:59:30es la única eh vacuna de sub unidades.
1:59:32Aquí también pues tenemos vacunas eh
1:59:36contra la influenza, contra el tétanos,
1:59:40enfermedad de lim, difteria, entre
1:59:42otras. Eh, y bueno, aquí se muestra el
1:59:45el esquema eh de purificación de de la
1:59:49vacuna contra la hepatitis B. Este, por
1:59:51ejemplo, es producido en sacaromis
1:59:53cerebicia. Eh, y algo también que
1:59:55podríamos eh resaltar del proceso de
1:59:57purificación es la adición de ayubantes
1:59:59derivados del aluminio, eh, pues para
2:00:02potenciar la respuesta inmune.
2:00:07Otro tipo de vacunas biotecnológicas que
2:00:09últimamente se ha trabajado mucho en su
2:00:11desarrollo son las partículas eh
2:00:13similares a virus o virus like particles
2:00:15en inglés, VPES. Estas constituyen una
2:00:19eh plataforma que combina las
2:00:21características estructurales de los
2:00:23virus naturales con un perfil eh de
2:00:26seguridad más favorable. Como dice aquí,
2:00:30estas estructuras se generan a partir de
2:00:31proteínas virales que tienen la
2:00:33capacidad intrínseca de autoensamblarse,
2:00:35algo como lo que mencionábamos con el
2:00:37virus de la hepatitis.
2:00:39eh se ensablan en partículas
2:00:40tridimensionales que van a imitar la
2:00:42arquitectura externa del virus, pero
2:00:45como no contienen material genético eh
2:00:47pues no van a ser eh no van a ser ni
2:00:50infecciosas ni replicativas, pero
2:00:52conservan
2:00:55eh la organización estructural y que es
2:00:57al final e pues la que va a ser
2:01:00inmunogénica, ¿no? El fundamento de las
2:01:04partículas similares a virus radica la
2:01:07relación entre la estructura viral y la
2:01:09inmunogenicidad.
2:01:11Ah, entonces aquí lo que se busca,
2:01:14decemos, es recrear esta disposición
2:01:16espacial de los antígenos sin incluir el
2:01:19genoma para lograr inducir respuestas
2:01:21inmunes robustas, manteniendo un perfil
2:01:23de seguridad superior al de las vacunas
2:01:25basadas en virus completos.
2:01:29Las VLPs eh se producen principalmente,
2:01:32o sea, su producción se basa en la
2:01:34expresión recombinante de proteínas
2:01:36estructurales virales que son capaces de
2:01:38autoensamblarse.
2:01:40Eh, y se producen también en sistemas
2:01:42heterólogos, decíamos como células de
2:01:44insecto, levaduras, etcétera.
2:01:48Durante la expresión, las proteínas
2:01:51adoptan conformaciones que permiten su
2:01:53ensamblaje espontáneo en partículas
2:01:55esféricas o icosaédricas que reproducen
2:01:58el tamaño y morfología del virus
2:02:00original.
2:02:03Eh,
2:02:05y bueno, dada la alta densidad de los
2:02:08epítopos repetitivos que se van a
2:02:10presentar en la superficie de estas
2:02:11partículas virales, eh pues hay una eh
2:02:15activación bastante eficiente de los
2:02:17linfocitos B y por lo tanto la
2:02:19generación de la respuesta inmune eh
2:02:21humoral.
2:02:23Eh,
2:02:27¿qué ventajas tienen este tipo de
2:02:29partículas? pues es que activan tanto la
2:02:31inmunidad humoral como la inmunidad
2:02:33celular.
2:02:35Ah, la estructura articulada va a
2:02:37facilitar eh la captación por células
2:02:40dendríticas y células presentadoras de
2:02:42antígeno, promoviendo el procesamiento
2:02:44antigénico eficiente, la presentación
2:02:46adecuada y la eh activación pues de los
2:02:50linfocitos de los linfocitos T. Mm. Aquí
2:02:54pues también mediante ingeniería
2:02:55genética es posible incorporar eh pues
2:02:59epítopos diferentes eh para hacer
2:03:03vacunas también eh multivalentes.
2:03:06Incluso pues también se ha sugerido que
2:03:08el tipo de pitopos que se pueden
2:03:09utilizar en estas partículas virales,
2:03:13perdón, parecidas a virus es para
2:03:15asociarlas, por ejemplo, con antígenos
2:03:17distintos a patógenos,
2:03:20como, por ejemplo, epítopos de tumores,
2:03:23ampliando el espectro más de la
2:03:25aplicación más allá de pues de
2:03:28enfermedades virales, sino también pues
2:03:29con una posible aplicación eh contra el
2:03:32cáncer, lo cual pues podría también
2:03:34hacerlo
2:03:36pues darle más versatilidad eh a esta
2:03:39plataforma.
2:03:41¿Qué desventajas presentan eh las este
2:03:44tipo de de vacunas, las partículas
2:03:46similares a virus? Pues el detalle es
2:03:49que hay que asegurar, o sea, para que
2:03:50sean lo suficientemente eficaces, hay
2:03:52que garantizar que el ensamblaje de las
2:03:54partículas sea correcto, que sea
2:03:58homogéneo a nivel estructural y que sea
2:04:00lo suficientemente estable
2:04:02durante el almacenamiento.
2:04:05También aquí otro detalle es que la
2:04:07caracterización físicoquímica de estas
2:04:09partículas pues requiere técnicas eh
2:04:13pues más eh sofisticadas, pues que
2:04:15permitan evaluar tanto el tamaño como la
2:04:17morfología y el grado el grado de
2:04:20ensamblaje.
2:04:22Aquí pues también otra limitante es que
2:04:24estas partículas virales también en
2:04:27muchos casos pues también es es
2:04:30necesario el uso de el uso de adyubantes
2:04:34para generar una protección más
2:04:37prolongada.
2:04:41Otro tipo de vacuna biotecnológica que
2:04:43ha estado muy en boga en los últimos
2:04:45años a partir particularmente de la
2:04:47pandemia son las vacunas de ácidos
2:04:49nucleicos.
2:04:50Eh, el principio de las vacunas de
2:04:54ácidos nucleicos eh consiste en
2:04:55administrar moléculas de ADN o ARN que
2:04:59codifican eh pues para los pues para el
2:05:02antígeno de interés de algún patógeno,
2:05:05generalmente una proteína de superficie.
2:05:09Eh, aquí lo que sucede es que eh el
2:05:11ácido nucleico entra a las células eh
2:05:13del huésped, en este caso pues de los de
2:05:15las personas a las que se les administra
2:05:17la vacuna, o sea, se internaliza en las
2:05:19células y eh pues se utiliza la
2:05:23maquinaria celular para producir el
2:05:25antígeno inituo.
2:05:29Aquí pues este proceso simula algunos
2:05:31aspectos de la infección natural, por
2:05:34ejemplo, la síntesis intracelular de
2:05:36proteínas virales, lo que favorece la
2:05:40activación tanto de respuesta inmune,
2:05:42humoral como celular.
2:05:44dentro de las vacunas ah de ácidos
2:05:46nucleicos ah podríamos clasificarlas en
2:05:49dos grandes categorías, las de ADN y las
2:05:52de ARN mensajero. Particularmente las de
2:05:54ARN mensajero fueron las que pues
2:05:56resaltaron durante eh la pandemia, ¿no?
2:06:00Ambas comparten el principio de que eh
2:06:03pues de que codifican o tienen una
2:06:05secuencia que codifica contra eh o sea,
2:06:08que codifica el antígeno mediante
2:06:10información genética. Eh, sin embargo,
2:06:13aquí la estabilidad e la biología y los
2:06:16mecanismos de entrega eh pues son
2:06:18ligeramente diferentes, pues porque es
2:06:19un tipo de ácido nucleo diferente. Por
2:06:22ejemplo, las vacunas de ADN utilizan
2:06:24plásmidos que deben ingresar al núcleo
2:06:27celular para transcribirse luego en ARN
2:06:30mensajero, mientras que las vacunas de
2:06:32ARN mensajero actúan directamente en el
2:06:34citoplasma y el ARN es directamente eh
2:06:37pues traducido en proteína, ¿no? En las
2:06:41vacunas de ADN, el material genético
2:06:44decíamos suele presentarse en forma de
2:06:48plásmidos circulares y se producen
2:06:51mediante fermentación bacteriana.
2:06:54Eh, tras su administración, el ADN debe
2:06:56atravesar la membrana celular y alcanzar
2:06:58el núcleo para que ocurra la
2:06:59transcripción. Esto pues es una
2:07:01limitante y es una de las razones pues
2:07:03por las que eh pues las que más ganaron
2:07:06terreno durante la pandemia fueron las
2:07:08de ARN mensajero, que estas por su parte
2:07:12eh pues como no requieren la entrada al
2:07:14núcleo, se traducen directamente
2:07:17y se liberan en la célula. Aquí, ¿qué
2:07:19desventajas tienen las vacunas de ren
2:07:20mensajero? es que pues al ser eh de una
2:07:23sola cadena pues son inherentemente más
2:07:26inestables y y susceptibles a la
2:07:28degradación por las ribonucleases,
2:07:30lo que exige el uso de eh sistemas
2:07:33avanzados de encapsulación o formulación
2:07:35para proteger la secuencia durante su
2:07:37administración. Por ejemplo, el uso de
2:07:40nanopartículas lipídicas o liposomas.
2:07:43Eh,
2:07:45¿qué ventajas tienen eh pues desde el
2:07:48punto de vista inmunológico?
2:07:51eh las vacunas de ácidos nucleicos, pues
2:07:54como eh pues utilizan las células, pues
2:07:57nuestras propias células para producir
2:07:59eh los antígenos, eh pues la producción
2:08:03eh
2:08:06pues la, o sea, aquí eh pues la
2:08:07producción es más prolongada y eso
2:08:10también además permite ah la
2:08:12presentación e del antígeno por las
2:08:16moléculas del complejo principal de
2:08:19istocompatibilidad. lo que genera eh
2:08:21respuestas celulares más robustas,
2:08:24además de la generación eh de
2:08:25anticuerpos.
2:08:28Ah, otro aspecto es que eh por sí solos
2:08:31los ácidos nucleicos también podrían
2:08:33activar la inmunidad innata, tanto el
2:08:36ADN eh como el ARN, eh los cuales pueden
2:08:39ser reconocidos por receptores eh por
2:08:41los receptores eh TLRs los receptores
2:08:44tipo generando además señales
2:08:46inflamatorias que actúan, podríamos
2:08:48decirlo, como ayubantes intrínsecos.
2:08:52Ah, esta esta propiedad en algunos casos
2:08:55reduce la necesidad de eh de adyubantes.
2:08:59Ah, desde el punto de vista de diseño
2:09:01también este tipo de vacunas eh
2:09:03presentan varias ventajas.
2:09:05Eh, una vez que se conoce la secuencia
2:09:07genética del antígeno, es posible
2:09:09diseñar eh construcciones vacunales en
2:09:12tiempos muy cortos mediante síntesis
2:09:14genética.
2:09:16Eh,
2:09:19además, pues la secuencia puede
2:09:20optimizarse para mejorar la expresión o
2:09:23la estabilidad del mensajero o la
2:09:24conformación de los eh de los antígenos.
2:09:28también eh pues al ser
2:09:32eh vacunas de ácidos nucleicos, pues se
2:09:34menciona que eh pues son fácilmente
2:09:36escalables en cuanto a la eh a la
2:09:40manufactura, porque aquí eh bueno, va a
2:09:42depender del tamaño de la secuencia,
2:09:44pero se pueden utilizar tanto procesos e
2:09:47de síntesis química como biotecnológica,
2:09:52además de que no se necesita cultivar el
2:09:54patógeno completo o producir grandes
2:09:56cantidades de proteínas recombinantes.
2:09:59Todo esto simplifica la cadena de
2:10:00producción y permite una adaptación
2:10:02rápida a nuevas variantes antigénicas.
2:10:05También esta es una esta es una ventaja,
2:10:07¿no?, que se de con se pueden generar
2:10:09esas variantes mucho más rápido que con
2:10:11si fuera una eh vacuna, un antígeno eh
2:10:15pues de origen proteico.
2:10:18Ah, ¿qué limitantes presentan estas
2:10:20plataformas? la eficiencia de la entrega
2:10:22y la cantidad eh controlar la cantidad
2:10:25de antígeno que se expresa eh pues sigue
2:10:27siendo un área de mejora. Ah, las
2:10:30vacunas de RN mensajero, decíamos, pues
2:10:32el problema es la la estabilidad,
2:10:36eh por lo cual pues estas vacunas
2:10:37requieren eh sistemas de distribución y
2:10:40almacenamientos muy estrictos. Eh
2:10:42generalmente pues eh temperaturas de
2:10:44ultracongelación.
2:10:47Eh, en cuanto a la seguridad, eh,
2:10:52hm,
2:10:54pues aquí también el hecho de que las
2:10:57moléculas de ácidos nuclíicos puedan eh
2:11:00eh
2:11:04o sea, que estemos hablando de material
2:11:06genético, técnicamente, pues puede eh
2:11:08ofrecer, bueno, presentar eh riesgos
2:11:13potenciales
2:11:15de integración ación de ese material
2:11:17genético al genoma de la célula en la
2:11:20que se internaliza especialmente pues
2:11:22para las vacunas basadas en ADN.
2:11:25Eh, obviamente pues estas
2:11:28esta probabilidad es extremadamente
2:11:30baja, pero pues sigue siendo un objeto
2:11:32de monitoreo regulatorio. También una de
2:11:34las razones pues por las que pues se
2:11:36utilizan más las vacunas de ARN
2:11:37mensajero que las de ADN.
2:11:40Ah, otra otra desventaja pues es la
2:11:43posibilidad de modular la respuesta
2:11:45inmune mediante el diseño molecular.
2:11:48Eh, aquí pues podemos ajustar, o sea, a
2:11:52veces hm
2:11:54las vacunas, o sea, la secuencia de
2:11:56ácido nucléico pues por sí sola pues no
2:11:57suele ser tan inmunogénica, ¿no?
2:12:04Y bueno, muchas de las aplicaciones que
2:12:06hemos eh discutido hasta ahorita sobre
2:12:08las ah vacunas biotecnológicas, pues que
2:12:12es que están enfocadas principalmente
2:12:14una a la prevención de enfermedades
2:12:17eh y otra eh a la prevención de
2:12:20enfermedades infecciosas.
2:12:22Ah, aquí pues también ah es importante
2:12:25aclarar que se pueden, o sea, al final
2:12:27una vacuna lo que busca es estimular, es
2:12:29generar una respuesta inmune contra una
2:12:31enfermedad, ya sea en este caso pues
2:12:33para prevenirla o para tratarla.
2:12:36Ah, de aquí pues podríamos hablar de las
2:12:38vacunas terapéuticas.
2:12:40Eh, las vacunas terapéuticas eh aquí
2:12:43pues decíamos expande el concepto de
2:12:44vacuna,
2:12:46eh, ya no es nada más para enfocada a la
2:12:49a la prevención.
2:12:51Eh, aquí, bueno, mientras que las
2:12:53vacunas terapéuticas se administran a
2:12:54individuos sanos para evitar la
2:12:57aparición de una enfermedad, las vacunas
2:12:58terapéuticas se diseñan para tratar
2:13:00enfermedades que ya han estado que ya se
2:13:02establecieron, modulando la respuesta
2:13:05inmune con fines terapéuticos.
2:13:08Aquí pues el el fundamento de las
2:13:10vacunas terapéuticas consiste en
2:13:12estimular o redirigir a la al sistema
2:13:15inmunológico para reconocer y atacar
2:13:17células en procesos patológicos
2:13:19persistentes o que ya están presentes.
2:13:22Eh, además, pues no es nada no se trata
2:13:25nada más de inducir eh la memoria
2:13:27inmunológica frente a un patógeno.
2:13:30Eh, aquí pues en estos en las vacunas
2:13:32terapéuticas se busca activar una
2:13:34respuesta inmune contra blancos
2:13:36específicos. como por ejemplo eh pues el
2:13:38cáncer, eh proteínas aberrantes o
2:13:41agentes infecciosos crónicos.
2:13:44Eh, aquí pues el detalle es que las
2:13:46vacunas terapéuticas implican desafíos
2:13:48inmunológicos más complejos
2:13:51porque eh muchas enfermedades que ya se
2:13:53han o sea una, o sea, para establecerse
2:13:56justamente es porque generalmente han
2:13:58desarrollado mecanismos de evasión del
2:14:00sistema inmune. Entonces, eh hacer que
2:14:04pues el sistema inmune reconozca algo
2:14:06que ya se le había escapado, pues es
2:14:08algo eh pues más difícil, ¿no?
2:14:12entre el tipo de vacunas terapéuticas,
2:14:14pues la aplicación
2:14:18más obvia y también eh pues la más
2:14:26pues la que pudiera tener una mayor
2:14:27incidencia son las vacunas contra el
2:14:30cáncer.
2:14:32Eh, aquí, bueno, pues si por su pues
2:14:34decíamos por el interés eh o la
2:14:37potencial aplicación, pues son este tipo
2:14:39de vacunas terapéuticas son las que han
2:14:42generado pues la mayoría de los enfoques
2:14:44en la investigación.
2:14:46Particularmente las vacunas contra el
2:14:48cáncer buscan activar el sistema inmune
2:14:50para reconocer antígenos de las células
2:14:53tumorales y eliminar a las células
2:14:54malignas.
2:14:57Eh,
2:14:59en el cuando hablemos de terapias
2:15:01avanzadas y de terapia génica, vamos a
2:15:03discutir algunas estrategias eh
2:15:05justamente para activar el sistema
2:15:07inmunológico.
2:15:09Eh, por ejemplo, podríamos también
2:15:10hablar de virus oncogénicos,
2:15:12pero eh por ejemplo, los virus
2:15:15oncogénicos previenen la infección
2:15:17inicial. Aquí eh o sea, sería una vacuna
2:15:20eh profiláctica. Aquí, particularmente
2:15:23con las vacunas terapéuticas, pues
2:15:26contra el cáncer, se estas se
2:15:28administran cuando el tumor ya está
2:15:30presente. El objetivo es superar la
2:15:33tolerancia inmunológica hacia los
2:15:35antígenos tumorales y generar respuestas
2:15:37citotóxicas mediadas por linfocitos T
2:15:41más, o sea, la respuesta inmune celular
2:15:43más que la humoral.
2:15:46Eh, aquí pues el detalle es en en el
2:15:50diseño y en el desarrollo de las vacunas
2:15:51terapéuticas, pues está en la
2:15:53identificación de los antígenos
2:15:54tumorales específicos, o sea, encontrar
2:15:56una molécula que solamente esté presente
2:15:58en las células cancerosas.
2:16:01Eh,
2:16:04aquí eh habrá algunos casos donde pues
2:16:06no exista este digamos biomarcador,
2:16:09pero eh podemos obtener em
2:16:13eh antígenos pues que estén eh
2:16:16predominante en células cancerosas, pero
2:16:18en niveles bajos en células normales.
2:16:22En el caso de que tengamos neoantígenos,
2:16:24o sea, eh antígenos derivados de
2:16:28mutaciones específicas de un tumor, pues
2:16:29aquí esto sería estos este tipo de
2:16:32antígenos serían los más atractivos
2:16:33porque son altamente específicos contra
2:16:35el cáncer y menos propensos a inducir
2:16:37una tolerancia inmunológica.
2:16:40Ah,
2:16:42aquí también eh otro abordaje que se
2:16:45podía utilizar con una para una para
2:16:47inducir la respuesta inmune contra el
2:16:48cáncer es preparar extractos de células
2:16:51tumorales
2:16:53y mezclarlos con ayubantes para eh pues
2:16:57potenciar el sistema inmunológico.
2:17:00También se pueden alterar genéticamente
2:17:01las células tumorales para hacerlas más
2:17:03inmunogénicas, por ejemplo, haciendo que
2:17:05secreten cit citocinas o moléculas
2:17:08estimuladoras del sistema inmune.
2:17:12Eh,
2:17:17vamos a hablar un poquito más de eh de
2:17:20esto.
2:17:21Les digo, cuando hablemos de la terapia
2:17:23de las terapias avanzadas y la terapia
2:17:25génica, aquí también podríamos resaltar
2:17:29pues el uso de las terapias de células
2:17:31cartel, la modificación genética de las
2:17:33células inmunes para que sean eh pues
2:17:36más capaces de detectar eh los antígenos
2:17:39tumorales.
2:17:41Otra área relevante del uso de las
2:17:43vacunas terapéuticas es contra las
2:17:46infecciones crónicas, por ejemplo, en
2:17:48enfermedades donde el patógeno persiste
2:17:51en el organismo. Eh, aquí pues las
2:17:54vacunas terapéuticas buscan reactivar la
2:17:56respuesta inmune que pues de alguna
2:17:59manera eh falló eh aumentando la
2:18:02capacidad del organismo para controlar o
2:18:04eliminar el agente el agente infeccioso.
2:18:08También las vacunas terapéuticas se han
2:18:10investigado en enfermedades
2:18:12neurodegenerativas y trastornos
2:18:15asociados a proteínas mal plegadas.
2:18:18Aquí, en estos casos, el objetivo es
2:18:20inducir una respuesta inmune contra los
2:18:21agregados proteicos patológicos,
2:18:25eh, promoviendo su eliminación y
2:18:27neutralización.
2:18:29Sin embargo, pues este esta área todavía
2:18:31se encuentra eh en desarrollo.
2:18:33Eh todavía no hay productos en el
2:18:35mercado con este eh con este mecanismo.
2:18:41Ah, una característica de las eh una
2:18:44consideración, ¿no?, de las vacunas
2:18:45terapéuticas, eh, es, por ejemplo, ah,
2:18:51cómo
2:18:53hm
2:18:55cómo se puede, por ejemplo, en oncología
2:18:57combinar eh las vacunas terapéuticas con
2:19:00los inhibidores de punto de control, por
2:19:01ejemplo, con los anticuerpos o con la
2:19:03quimioterapia o la radioterapia, ¿no? O
2:19:07sea, aquí eh el objetivo es generar
2:19:09estrategias más efectivas con sinergias
2:19:12terapéuticas, ¿no?, donde se estimule el
2:19:14sistema inmune y otros mecanismos para
2:19:17hacer eh más efectiva eh la detección.
2:19:23Aquí, bueno, ¿qué retos tenemos en
2:19:25cuanto a los en cuanto a las vacunas
2:19:28terapéuticas? Pues sería la tolerancia
2:19:30inmunológica.
2:19:32Eh, aquí pues estamos hablando del
2:19:34desarrollo de una eh inmunidad.
2:19:36Obviamente, sí, por ejemplo, en el caso
2:19:37de las células cancer, o sea, en el
2:19:39cáncer, eh pues estamos hablando de
2:19:41antígenos, pues, de nuestras propias
2:19:43células, que son células que generan
2:19:44enfermedad, pero que son células
2:19:46propias. Entonces, generar respuestas
2:19:48inmunes sin inducir una autoinmunidad.
2:19:52Eh, pues aquí es una línea muy fina que
2:19:54eh que hay que controlar y también el
2:19:56punto de pues tratar de encontrar un
2:19:59blanco o un antígeno que solamente esté
2:20:01presente en pues en las células eh en
2:20:04las células tumorales, en las células
2:20:06neoplásicas y no en las células en las
2:20:09células sanas. Hm. También otra cuestión
2:20:12eh hablando particularmente de las
2:20:15vacunas contra el cáncer es la
2:20:17heterogeneidad.
2:20:19Eh, pues aquí también sucede que pues al
2:20:21final el cáncer no es una enfermedad eh
2:20:24contagiosa o que se genere por un agente
2:20:26infeccioso. Eh, al final es eh un cáncer
2:20:31eh pues es una enfermedad muy única, muy
2:20:33personal, o sea, que pueden ocurrir pues
2:20:35por diferentes eh mutaciones.
2:20:39Aquí pues los perfiles entre los
2:20:40pacientes pueden variar de los antígenos
2:20:44o los biomarcadores pueden variar mucho
2:20:46entre pacientes e incluso dentro de un
2:20:48mismo tumor.
2:20:51de aquí el hecho de que pues por eso se
2:20:53estén utilizando más que,
2:20:56o sea, que est requiriendo más a la
2:20:59medicina personalizada, a las terapias
2:21:01avanzadas para generar vacunas
2:21:04personalizadas donde los antígenos sean
2:21:06seleccionados en función del perfil de
2:21:10cada de cada paciente. Aquí pues el
2:21:12problema eh pues esto es que a nivel de
2:21:15manufactura es complejo, también a nivel
2:21:17regulatorio y pues a nivel de los
2:21:19costos.
2:21:21Eh, otro punto interesante sobre las
2:21:23vacunas terapéuticas es que se una
2:21:26aplicación que ha derivado, que a mí se
2:21:28me hace muy interesante, es las vacunas
2:21:30contra las drogas de abuso. Eh, aquí se
2:21:33han diseñado, o sea, este enfoque se
2:21:36basa eh en generar respuestas inmunes
2:21:40contra moléculas pequeñas que son
2:21:41psicoactivas, ya sea, por ejemplo, la
2:21:43nicotina, la cocaína, los opioides o
2:21:46alguna o las metanfetaminas.
2:21:49Eh, aquí pues no se busca prevenir una
2:21:52infección, sino más bien eh generar ah
2:21:56anticuerpos que se unan contra ese
2:21:58fármaco, esa molécula de síntesis
2:22:00química que es muy pequeña y que puede
2:22:02llegar fácilmente al sistema nervioso
2:22:04central para eh modificar la
2:22:06farmacocinética, eh por ejemplo,
2:22:08prevenir que cruce por la barrera
2:22:10hematoencefálica y pues llegue al
2:22:13sistema nervioso central y ejerza sus
2:22:14efectos eh adictivos.
2:22:17Eh, y pues esto también tiene una
2:22:20aplicación, por ejemplo, para facilitar
2:22:21una la rehabilitación de los pacientes.
2:22:25Eh, aquí pues lo que se busca es generar
2:22:27anticuerpos capaces de reconocer y
2:22:29unirse a la droga en la circulación.
2:22:33Eh,
2:22:35entonces, al generar estos anticuerpos,
2:22:37pues la vacuna, o sea, se forman,
2:22:39perdón, se forman complejos inmunes con
2:22:42los anticuerpos que se generan contra el
2:22:43el la droga.
2:22:46Eh, entonces esto reduce la cantidad de
2:22:49droga que alcanza sus sitios de acción
2:22:51atenuando los efectos reforzantes
2:22:53asociados con la adicción.
2:22:56Aquí eh
2:22:59esto es interesante porque una vez que
2:23:01se, o sea, es un reto,
2:23:04pero una vez que se genera la inmunidad
2:23:07eh contra estas drogas, pues el paciente
2:23:11ya no tiene de otra, entonces puede
2:23:13estarse administrando y administrando la
2:23:15droga, pero como ya tiene anticuerpos
2:23:17contra lo neutralizan, pues ya no tiene
2:23:18de otra más que dejarlo, ¿no?
2:23:21Aquí pues vale la pena aclarar que yo
2:23:23sepa todavía no hay una no hay vacunas
2:23:28aprobadas contra drogas de abuso, pero
2:23:30sí se ha avanzado mucho en la
2:23:33investigación clínica a a este respecto
2:23:36aquí, ¿qué reto o qué desafío
2:23:39pues biológico, tecnológico se presenta
2:23:41con este tipo de vacunas? Pues es que
2:23:43justamente eh pues las drogas de abuso
2:23:45al hacer moléculas pequeñas pues tienen
2:23:47una muy baja inmunogenicidad. Entonces
2:23:50hacer, o sea, que se generen anticuerpos
2:23:53contra esta, pues ahí es donde está el
2:23:54reto. Eh, aquí ah, la estrategia que se
2:23:59ha utilizado es en una conjugación de la
2:24:02droga con alguna otra eh molécula que sí
2:24:06sea inmunogénica.
2:24:08Ah, por ejemplo, conjugarla eh, por
2:24:11ejemplo, con alguna proteína como la ovo
2:24:14albúmina, o sea, la albúmina de huevo o
2:24:16la toxina de la disteria, que sí permita
2:24:18que el sistema inmune reconozca eh pues
2:24:21esta, o sea, esté complejo y genere
2:24:24anticuerpos pues de manera eh pues
2:24:26indirecta, pues como va a estar acoplada
2:24:28contra la droga, pues que también se
2:24:29generen anticuerpos contra esta.
2:24:33Ah,
2:24:36aquí pues lo que se buscaría también
2:24:38pues es generar pues principalmente
2:24:40anticuerpos, o sea, activación de
2:24:42células B, eh generar una respuesta
2:24:44inmune humoral y la producción de
2:24:46anticuerpos con alta eh
2:24:50con alta
2:24:52efectividad o con afinidad hacia la
2:24:54droga.
2:24:58Y bueno, un componente importante en el
2:25:00desarrollo de vacunas biotecnológicas,
2:25:02ya lo hemos mencionado, es el uso de los
2:25:04ayubantes. Eh, un ayubante se define
2:25:07como eh una sustancia que se incorpora a
2:25:09una vacuna con el objetivo de potenciar,
2:25:11dirigir o prolongar la respuesta inmune
2:25:13frente al antígeno administrado.
2:25:16Eh, los ayubantes actúan modulando la
2:25:19intensidad, calidad y duración de la
2:25:21respuesta eh inmunológica.
2:25:23Los ayubantes, ya hemos mencionado, eh
2:25:25pues suelen ser particularmente eh
2:25:28necesarios en vacunas de subunidades eh
2:25:31recominantes, también algunas vacunas de
2:25:33ácidos nucleicos.
2:25:35Eh
2:25:36y pues estos pueden funcionar eh
2:25:40mediante varios mecanismos. Pueden pseer
2:25:43la respuesta inmune mediante varios
2:25:44mecanismos.
2:25:46Eh,
2:25:49muchos ayubantes
2:25:51eh interactúan con receptores de
2:25:54reconocimiento de los o los las los
2:25:57receptores PRR o los receptores eh tipo
2:26:02lo que van a desencadenar cascadas de
2:26:04señalización intracelular que van a
2:26:06resultar en la producción de citinas
2:26:07proinflamatorias y quimioscinas, lo cual
2:26:10va a favorecer la maduración y
2:26:12activación de las células dendríticas.
2:26:15eh mejora la presentación de antígenos y
2:26:18facilitar la una activación más
2:26:21eficiente de linfocitos T. Entre estos
2:26:24pues tenemos eh algunos lipopéptidos o
2:26:27eh también pues eh AD eh ADN rico en CS
2:26:31y GES pueden ayudar a estimular este
2:26:33tipo de receptores.
2:26:36Eh también eh los ayubantes
2:26:39eh dependiendo de su composición y
2:26:41mecanismo de acción pueden favorecer eh
2:26:43las respuestas de los linfocitos T
2:26:47asociadas con la inmunidad celular y con
2:26:50la producción eh de anticuerpos.
2:26:54Ah, otra función importante de los
2:26:56ayubantes es el efecto eh que tienen que
2:27:00muchos tienen como de generar depósitos
2:27:02de antígenos.
2:27:04Muchos ayubantes forman matrices o
2:27:07complejos que van a retener al antígeno
2:27:09en el sitio de inyección, formando eh
2:27:12para empezar permitiendo su liberación
2:27:14gradual, pero también generando eh
2:27:16partículas eh de gran tamaño. Eh lo cual
2:27:20eh favorece la exposición an las células
2:27:24del sistema inmune y por ende su
2:27:26estimulación y el desarrollo de una
2:27:28memoria inmunológica eh más adecuada.
2:27:32Ah, entre los tipos de ayubantes, los
2:27:34más utilizados han sido eh las sales de
2:27:37aluminio
2:27:38comúnmente denominadas como alumbre.
2:27:41Eh, estos se han utilizado debido a su
2:27:44perfil de seguridad, que está bien
2:27:45establecido y su capacidad para
2:27:47potenciar la respuesta inmune moral.
2:27:50Su mecanismo exacto eh pues es complejo.
2:27:53Eh
2:27:55se sabe, por ejemplo, que promueve
2:27:56inflamación local, la activación de
2:27:58células presentadoras de antígeno y
2:28:00además promueve la formación de estos
2:28:03depósitos antigénicos.
2:28:05Ah, y bueno, actualmente con el avance
2:28:08de la biotecnología y la inmunología eh
2:28:11se han desarrollado ayubantes de nueva
2:28:13generación con mecanismos más definidos.
2:28:15Por ejemplo, entre ellos se encuentran
2:28:17las emulsiones aceite en agua, que por
2:28:20ejemplo podría ser eh el ayubante de FR,
2:28:24eh o el desarrollo de lisosomas,
2:28:26liposomas, perdón, nanopartículas y
2:28:29moléculas inmunoestimuladoras
2:28:31específicas de los agonistas eh de los
2:28:34receptores TLR.
2:28:37Eh, estos permiten una eh un control más
2:28:40preciso de la respuesta inmunológica. eh
2:28:42también pues poniendo dirigir tanto una
2:28:44respuesta inmunecelular y no nada más la
2:28:46eh la humoral. Las emulsiones, por
2:28:49ejemplo, funcionan como sistemas
2:28:51coloidales que facilitan la captación de
2:28:54antígelo por células inmunes porque
2:28:56generan eh pues miselas de de diferentes
2:28:58tamaños, al final partículas de gran
2:29:00tamaño eh que van a contener el
2:29:02antígeno. Esto puede promover la
2:29:04inflamación local. Eh y algo también
2:29:07similar sucede con los eh los liposomas
2:29:10y las nanopartículas.
2:29:13Ah,
2:29:16otro grupo importante son los ayubantes
2:29:19basados en agonistas moleculares, eh,
2:29:21por ejemplo, como decíamos, los
2:29:22derivados de los lípidos bacterianos o
2:29:24ácidos nucléicos sintéticos para eh que
2:29:27activen de manera directa la eh los
2:29:30receptores de la inmunidad eh innata,
2:29:33los receptores tipo
2:29:36eh ¿qué consideraciones hay que tener
2:29:37con los eh ayubantes? Pues, ¿cuál va a
2:29:40ser el ayubante? ideal o adecuado para
2:29:43la vacuna, para el diseño de vacunas.
2:29:46Eh, aquí pues también hay que contemplar
2:29:48no nada más la eficacia de la, o sea,
2:29:51cómo se potencia la respuesta inmune,
2:29:53sino también el perfil de eh de
2:29:55seguridad o qué tan tolerable es el
2:29:57producto. Al final los ayubantes pues al
2:30:01estimular el sistema inmune pues pueden
2:30:03incrementar la reactogenicidad
2:30:06localistémica,
2:30:07eh lo cual pues puede estar asociado con
2:30:09efectos adversos. Incluso hasta cuadros
2:30:12una activación excesiva del sistema
2:30:14inmunológico puede estar asociado con
2:30:15cuadros anaslácticos.
2:30:18Eh, entonces pues también se tiene que
2:30:19eh generar aquí un balance entre la
2:30:22seguridad y la eficacia, ¿no?
2:30:25Ah.
2:30:30Aquí pues también un aspecto importante,
2:30:33pues los ayubantes pues pueden permitir
2:30:35reducir la cantidad del antígeno
2:30:36necesario para eh para la dosis. Esto
2:30:39pues es una ventaja.
2:30:41tiene, por ejemplo, implicaciones
2:30:42importantes en la manufactura y en la
2:30:44distribución porque se pueden producir
2:30:46más dosis igualmente efectivas con la
2:30:48misma cantidad de de material genético,
2:30:51lo cual, por ejemplo, para pues
2:30:54enfermedades eh
2:30:57infecciosas ante emergencias sanitarias,
2:31:00donde la disponibilidad de las vacunas
2:31:02pues es algo puede llegar a ser
2:31:03limitado, puede escasear, pues esto es
2:31:05una esto es una ventaja, ¿no?
2:31:09Ah.
2:31:13Y bueno,
2:31:16en las vacunas eh, o sea, aquí al final
2:31:19recordemos que los ayubantes pues son
2:31:21importantes en las vacunas de
2:31:25subunidades y también deseamos en las
2:31:27vacunas en las partículas similares a
2:31:30virus ah, dado que pues no estamos
2:31:32trabajando con eh con patógenos
2:31:35completos. Aquí eh eh pues recordando
2:31:39los temas de la unidad uno, pues sí es
2:31:41importante definir
2:31:44eh o vaya, son importantes los estudios
2:31:46de preformulación para encontrar cuál es
2:31:49la pues el mejor ayubante, ¿no?, para
2:31:51potenciar la respuesta inmunológica.
2:31:56Y bueno, ya nada más para eh pues para
2:31:58cerrar el tema eh pues en este video
2:32:00hemos eh discutido sobre eh la
2:32:05naturaleza,
2:32:07eh las plataformas de producción eh y
2:32:10las aplicaciones, ventajas y desventajas
2:32:13de las de los anticuerpos y de las
2:32:15vacunas. Eh, si bien podemos eh resaltar
2:32:18que pues los mecanismos de acción eh o
2:32:20su aplicabilidad en la medicina eh pues
2:32:23es a través de mecanismos, o sea, de
2:32:26mecanismos muy diferentes. Eh, o sea, yo
2:32:30quería incluir estos dos temas porque eh
2:32:32pues al final estamos hablando pues de
2:32:34la regulación eh o el aprovechamiento
2:32:38de el sistema inmunológico con la
2:32:40aplicación de la medicina.
2:32:42Ah, o sea, recapitulando eh la pregunta
2:32:45del principio eh pues de cómo la
2:32:47biotecnología se puede utilizar para eh
2:32:49pues para regular la inmunidad, esto
2:32:51esta esta pregunta como tal
2:32:54vez se pudiera aplicar más hacia el
2:32:57diseño de las vacunas porque pues aquí
2:32:59lo que queremos es estimular el sistema
2:33:00inmune, pero eh pues también es
2:33:04importante resaltar que el avance eh
2:33:07tecnológico especialmente para la para
2:33:11el desarrollo de los anticuerpos
2:33:13monoclonales, que de nuevo son
2:33:16actualmente el tipo de biofarmacéutico
2:33:19más relevante en la medicina.
2:33:21deseamos por su versatilidad y la, o
2:33:23sea, dada la gran cantidad de blancos
2:33:26terapéuticos a los que se puede dirigir
2:33:28esos anticuerpos eh
2:33:31y por ende las aplicaciones clínicas
2:33:34eh y que sean altamente altamente
2:33:36específicas, pues al final eh pues fue
2:33:40para poder, o sea, que estas moléculas
2:33:42fueran una realidad a nivel eh
2:33:44tecnológico, que sea que fuera algo
2:33:46rentable, eh pues se tuvo que pues
2:33:49comprender
2:33:50eh pues todos estos mecanismos
2:33:53moleculares y celulares que están
2:33:55relacionados en la eh activación y
2:33:57formación de anticuerpos mediante los
2:33:59linfocitos B, ¿no?, que eh pues de nuevo
2:34:01es un proceso eh pues bastante eh
2:34:04complejo complejo de simular en el
2:34:07laboratorio y pues se tomó bastantes eh
2:34:10décadas para poder perfeccionar
2:34:12perfeccionar estas eh estas técnicas.
2:34:15Eh, al final decíamos que pues ambos eh
2:34:19tanto las vacunas como los anticuerpos
2:34:21pues convergen pues con pues que son
2:34:24moléculas o estrategias terapéuticas
2:34:26basadas en el sistema eh inmunológico.
2:34:31Aquí también vale la pena mencionar el
2:34:33papel que tiene la bioinformática para
2:34:37pues para el diseño y la generación de
2:34:39pues construcciones eh pues más eh
2:34:44específicas, ¿sí? tanto para el proceso
2:34:47de humanización o crear anticuerpos
2:34:49completamente humanos como para generar
2:34:52eh vacunas, por ejemplo, de subunidades
2:34:54o vacunas de RNE mensajero, pues que
2:34:56sean altamente específicas y eficaces
2:34:59para inducir eh la inmunidad contra eh
2:35:01muchas enfermedades, ¿no? que no nada
2:35:03más es para enfermedades contra
2:35:05enfermedades infecciosas, sino que las
2:35:06vacunas ya actualmente pues tienen
2:35:09aplicación eh o se les puede dar este
2:35:11enfoque hacia la medicina eh
2:35:13personalizada eh e incluso pues contra
2:35:16el cáncer. M.

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