YT YouTube2Text

YouTube2Text → Transcripts → 7 Clasificación de los biofarmacéuticos

7 Clasificación de los biofarmacéuticos — Transcript

by Aída Jimena Velarde Salcedo · 26,971 words · 4,828 segments · language en · Watch on YouTube

Open in transcriber Summarize with AI Download SRT/VTT

Full transcript

0:11Hola, bienvenidas y bienvenidos a otro
0:14video del curso Diseño de
0:15Biofarmacéuticos.
0:17Eh, en esta sesión vamos a comenzar con
0:20el primer tema de la unidad dos. A lo
0:23largo de la unidad uno, en este curso
0:26hemos abordado pues algunas
0:30generalidades, definiciones y conceptos
0:32que nos ayudan a ponernos eh en un
0:35encuadre para entender cómo es que
0:37funcionan los medicamentos
0:39biotecnológicos,
0:40los biofarmacéuticos,
0:42como es eh que en los últimos años han
0:46ganado una muy buena presencia en el en
0:49el mercado farmacéutico y pues también
0:51algunas diferencias entre los fármacos
0:54clásicos o los fármacos de síntesis
0:56química eh y algunas consideraciones
0:59importantes de seguridad como la
1:01inmunogenicidad.
1:02En esta segunda unidad vamos ahora ya a
1:06hablar de eh pues de las aplicaciones de
1:08los medicamentos biotecnológicos, al
1:10menos de los más de los más
1:13representativos.
1:14Vamos a hablar eh pues de cuáles son los
1:18cuáles fueron los primeros eh
1:19biofarmacéuticos en aprobarse, cómo es
1:21que funcionan. En mediada de lo posible
1:24vamos a abordar algunos e algunas
1:27consideraciones sobre su diseño, sobre
1:30su producción, eh sobre su formulación y
1:33también algunas e
1:36características farmacológicas.
1:38Eh, también hablaremos de un grupo de
1:42medicamentos biotecnológicos muy
1:44importante que son los anticuerpos y
1:45también eh la los anticuerpos
1:47monoclonales y las vacunas
1:50biotecnológicas. Y terminaremos la
1:52unidad hablando de otro tipo de terapias
1:55que ya entran más como parte de la
1:57medicina personalizada, que son las
1:59terapias avanzadas. En particular eh
2:02abordaremos eh los tipos de terapia
2:05génica que ya existen en el mercado. Eh
2:08esto porque algunos productos de terapia
2:11génica sí podrían, o sea, si bien son
2:13terapias avanzas avanzadas, o sea, es
2:15decir, no se consideran un medicamento,
2:18dependiendo del eh del enfoque que se le
2:20dé para su aplicación, se pueden
2:21utilizar eh vaya, es necesario que se
2:25formulen, que sí se produzcan con cierta
2:27calidad a escala eh industrial. Eh,
2:31entonces pues abordaremos esos ejemplos
2:32que pues tienen pertinencia aquí en el
2:34en el curso.
2:39Como el tema principal de la unidad es
2:41ver cómo se clasifican eh los
2:43medicamentos biotecnológicos, pues es lo
2:46más importante es acotar primero eh pues
2:49que hay muchas formas en las que se
2:50pueden agrupar a los medicamentos eh
2:52biotecnológicos, o sea, no existe una un
2:56sistema universal o único. Se puede ver
2:59desde diferentes abordajes, por ejemplo,
3:02sobre el tipo de formulaciones que
3:04utilizan,
3:05eh qué tan similares o diferentes son a
3:08las moléculas endógenas, eh clasificarse
3:11de acuerdo a sus mecanismos de acción o
3:13su aplicación terapéutica.
3:16Eh, si pudiéramos hm eh bueno, aquí yo
3:20en la diapositiva les muestro algunos de
3:22los de las clasificaciones pues más
3:24representativas.
3:26Eh, una puede ser eh podríamos
3:28clasificarlos de acuerdo al origen
3:30biotecnológico o sistema de producción.
3:33Eh, en este caso, pues podríamos agrupar
3:35a los medicamentos biotecnológicos o las
3:37proteínas recomendantes terapéuticas que
3:40sean expresadas, por ejemplo, en los que
3:42sean expresadas en bacterias, otras que
3:44sean expresadas en levaduras, en células
3:46de mamífero, en células vegetales,
3:50incluso eh productos terapéuticos que
3:52derivan de plasma de plasma humano, que
3:55también puede clasificarse como como
3:57biológicos. También podríamos aquí
3:59incluir las proteínas peguiladas o
4:01proteínas de fusión. donde eh pues
4:04dentro de esta clasificación lo
4:06importante sería comprender que
4:08dependiendo de la plataforma de de
4:10producción que se utilice, pues puede
4:12haber diferencias en la estructura,
4:13plegamiento y seguridad del producto.
4:16También podríamos agruparlos de acuerdo
4:18a la naturaleza estructural de la
4:20molécula. Eh, aquí pues podremos
4:22clasificarlos como péptidos, hormonas
4:24pequeñas como la insulina, proteínas eh
4:27globulares, glucoproteínas complejas
4:30como los anticuerpos, enzimas eh o eh
4:34citinas reguladoras del sistema
4:36inmunológico.
4:38Esta clasificación puede ser importante
4:40eh para comprender las propiedades eh
4:42físicoquímicas eh fundamentales y la
4:45estabilidad de las moléculas si las
4:47clasificamos. Por otro lado, por el
4:48mecanismo de acción farmacológico, eh
4:51que yo creo que esta es uno de los
4:53sistemas pues más hm pues más didáctico,
4:57o sea, que es más se aplica mejor eh
5:00para comprender cómo es que funcionan
5:01los medicamentos biotecnológicos. Eh
5:04aquí podemos encontrar, por ejemplo,
5:05hormonas de reemplazo, factores de
5:07crecimiento que sean estimulantes de la
5:09proliferación celular, particularmente
5:11de de las estimulantes de la producción
5:14de células sanguíneas. eh agentes
5:16inmunomoduladores como citosinas,
5:18interferones,
5:20proteínas eh que ayudan a manejar la
5:23hemostasia como los actores de
5:24coagulación, eh agentes trombolíticos,
5:28eh o enzimas que degradan sustratos
5:30patológicos, ¿no? Que en muchos de sus
5:32casos estas eh estas enzimas
5:36suelen estar asociadas con enfermedades
5:38genéticas, o sea, fallos en estas
5:39enzimas en enfermedades genéticas se
5:42generan enfermedades, ¿no? y que aquí la
5:44lógica para generar una estrategia
5:47terapéutica
5:49pues es a través de la terapia de
5:50reemplazo con las enzimas correctas.
5:53E y bueno, también tenemos la
5:55clasificación de acuerdo al criterio
5:57farmacocinético y el comportamiento
5:59invivo. Eh, ya hemos mencionado en la
6:01unidad anterior que pues muchos los
6:03medicamentos se diferencian también de
6:05acuerdo a sus propiedades
6:07farmacocinéticas, o sea, el tiempo de
6:08vida media, la vida de administración y
6:11por ende pues cómo se van a eh a
6:13comportar en vivo. Aquí podríamos
6:15también clasificar a las proteínas, a
6:18las que son idénticas a la endógena o a
6:20las que tienen modificaciones
6:23estructurales o de formulación
6:25intencionales para modificar sus
6:26propiedades farmacocinéticas.
6:31Okay, en esta diapositiva les muestro un
6:34par de figuras eh sacadas eh de el libro
6:37de Gunter Jacksi, si no me equivoco, en
6:40donde se representa la proporción del
6:43tipo de biofarmacéuticos que está en el
6:45mercado, principalmente siguiendo eh la
6:47clasificación eh que mencionáamos en la
6:50diapositiva pasada sobre eh una
6:53clasificación relacionada con los eh los
6:55mecanismos eh farmacológicos o pues cuál
6:57es la aplicación Eh, la diapositiva,
7:02perdón, la figura de la derecha eh
7:04resalta principalmente como a lo largo
7:07de los años ha ido cambiando eh pues la
7:11proporción de las familias de los
7:13biofarmacéuticos conforme eh pues se han
7:15ido eh aprobando nuevos medicamentos a
7:18lo largo del tiempo. En este caso, por
7:20ejemplo, tenemos que en las en la década
7:23de los 80, los 90, que fue cuando pues
7:25surge como tal la biotecnología
7:27farmacéutica, que ya se aprueban
7:29medicamentos biotecnológicos o proteínas
7:31terapéuticas recombinantes,
7:34eh principalmente la insulina y la
7:36hormona del crecimiento, que fueron las
7:37primeras, que por eso podemos ver eh
7:41pues básicamente estas en la primera en
7:43la primera barra, pues prácticamente dos
7:45productos porque eran los que estaban en
7:47el mercado eh conforme fueron Avanzando
7:50los años, aparecieron los interferones o
7:53las epuetinas o eritropoyetinas
7:55recominantes, las cuales pues junto con
7:57la insulina y la hormona del
7:58crecimiento, pues estamos hablando de
8:00proteínas relativamente pequeñas que no
8:03requieren modificaciones
8:04postraduccionales complejas, no están
8:05glicosiladas, por lo tanto eh pues fue
8:08viable producirlas en plataformas eh
8:10microbianas como bacterias y levaduras.
8:13Entonces, o sea, aquí conforme fue
8:14avanzando la tecnología del ADN
8:16recombinante, pues primero se trabajó
8:18con bacterias y luego se fue escalando a
8:20eh a organismos más complejos. Entonces,
8:23esto también es un reflejo de eh pues
8:25del avance tecnológico, ¿no? El que
8:27primero se aprueben eh se hayan aprobado
8:29los medicamentos biotecnológicos más
8:31sencillos. Eh, a mitad de la década de
8:33los 90 se apruebaron se aprobaron los
8:36primeros anticuerpos terapéuticos eh
8:39monoclonales obtenidos principalmente
8:41mediante tecnología de hibridomas, que
8:43está aquí estaremos hablando de eh
8:46anticuerpos de origen murino. Aquí lo
8:48que vale la pena resaltar es que pues
8:50los anticuerpos son proteínas pues mucho
8:52más complejas en tamaño por medio de 150
8:54kg. Son cuatro cadenas poliptídicas que
8:57tienen varios puentes de sulfuro y
8:59además están glicosadas.
9:02Actualmente, si se fijan, eh ya en los
9:04últimos años, los anticuerpos
9:06monoclonales dominan claramente el
9:08mercado, el mercado actual debido a su
9:11amplia aplicación terapéutica, es decir,
9:13son muy versátiles. Si bien son un tipo
9:15de proteínas, o sea, que a nivel
9:17estructural pueden ser muy eh muy
9:19parecidas, lo que los hace tan
9:21versátiles es que puede cambiarse el
9:23blanco terapéutico.
9:26Estos pues representan actualmente la
9:28mayor fracción de los bioterapéuticos
9:30aprobados y ya actualmente por los
9:33problemas de inmunogenicidad ya no se
9:34producen en células
9:36dibridomas, ya no son de origen burino,
9:38sino que se producen en células cho o
9:41incluso en líneas celulares humanas.
9:45Eh, si vemos, si regresamos a la figura
9:47de la izquierda, pues podemos ver de
9:49nuevo que los anticuerpos monoclonales
9:51son los es la familia de los
9:53biofarmacéuticos eh que más aplicación o
9:55más productos aprobados tienen el
9:57mercado. Eh, también después de estos,
10:00yo creo que eh las categorías más
10:04relevantes y especialmente en los
10:06últimos años son los análogos de GLP1,
10:09eh como por ejemplo el Muaro o el PIC.
10:12Eh, también tenemos enzimas
10:14terapéuticas, factores de coagulación e
10:17insulinas. Eh, si se fijan, todas estas
10:20moléculas o estos biofarmacéuticos eh
10:22pues están dirigidos a tratar
10:24enfermedades eh crónicas y con mercados,
10:27podemos decir, relativamente eh pues
10:29estables, con alta incidencia como la
10:32diabetes, obesidad, enfermedades
10:33metabólicas.
10:35Eh, también tenemos eh citosinas, como
10:37decíamos interferones, eh interleucinas
10:40y también los factores estimulantes de
10:42colonia. Eh, aunque estos pues tienen
10:44una menor proporción a a los
10:46medicamentos a las familias de
10:48medicamentos anteriores, esto eh pues
10:51puede estar un poquito más limitado por
10:53algunas cuestiones de eh de seguridad,
10:56de efectos adversos y también pues
10:58nichos clínicos eh más limitados, por
11:00ejemplo, que estén dirigidos al
11:02tratamiento de cierto tipo de cáncer que
11:04pudiera estar más restringido en la
11:05población eh o para enfermedades
11:08autoinmunes que no son tan relevantes o
11:11bueno, no digo que no sea relevantes,
11:13perdón, sino con menos incidencias.
11:18Bueno, vamos a a hablar de algunos de
11:21los ejemplos, pues creo yo, más
11:23representativos
11:24eh pues de los medicamentos
11:26biotecnológicos están en el mercado. A
11:28claro, pues no vamos a revisar todos.
11:30Eh, solamente estamos escogiendo eh
11:33algunos que sean relevantes en cuanto a
11:35sus condiciones eh de producción, su
11:39historia, su aplicación terapéutica,
11:41particulares particularidades en la
11:42formulación o eh el papel que han tenido
11:46eh hacia la innovación y desarrollo de
11:49nuevos productos o variantes.
11:51Vamos a comenzar primero hablando de la
11:54de la insulina, [carraspeo]
11:55que pues este pues es yo creo que el
11:58primer biofarmacéutico del que siempre
12:01hablamos, o sea, es el que es es el
12:04ejemplo pues modelo, ¿no?, de todos los
12:06medicamentos biotecnológicos, ya que
12:09fue, o sea, este fue el primer
12:10medicamento eh biotecnológico aprobado
12:14para uso terapéutico
12:16particularmente en el año de 1982 eh de
12:19la empresa Ila Lili con el nombre
12:21comercial Umulina, ¿no? Esta es pues era
12:24una es una insulina humana recombinante,
12:30o sea, la secuencia es idéntica a la
12:31humana que es producida en
12:35esquerikiacoli. Eh, actualmente pues
12:37existen otras plataformas de expresión,
12:40incluso análogos de insulina, eh pues
12:43que tienen modificaciones estructurales,
12:46pues para alterar sus propiedades
12:47farmacocinéticas, que también eh pues
12:49están disponibles en el mercado. al ser
12:51uno, al ser el primer biofarmacéutico en
12:53aprobarse, que ya tiene, o sea, pues
12:55décadas en el mercado, pues también a
12:57nivel regulatorio, pues esto ha
12:59permitido que ya existan medicamentos
13:03biosimilares o como en México se conoce,
13:05medicamentos biotecnológicos
13:06biocomparables. De nuevo, recordemos que
13:08es la versión como genérica, entre
13:10comillas, porque no se puede utilizar
13:12ese término. Sería el equivalente de un
13:14genérico, pero de un medicamento eh
13:16biotecnológico.
13:18Entonces, la insulina humana, pues
13:21decíamos que se pudo producir
13:24en en sistemas bacterianos porque pues
13:26es una proteína relativamente sencilla o
13:29no tiene modificaciones
13:31postraduccionales importantes más que la
13:33presencia de tres puentes de sulfuro.
13:37está conformada, además de que es
13:38pequeña, está conformada por dos
13:41cadenas, la cadena A y la cadena B, eh,
13:44que en su totalidad de estas dos cadenas
13:46dan una secuencia de 51 aminoácidos que
13:49están unidas por dos puentes, por dos
13:51puentes de insulfuro. Aquí en la figura
13:54pueden ver que como si fuera una sola
13:56cadena poliptídica, pero esto es porque
14:00en la células del páncreas la insulina
14:04se expresa
14:07como proinsulina y eh esta
14:09posteriormente su como parte de su
14:12proceso de de eh de maduración sufre un
14:16proceso proteolítico en el que se corta
14:18eh la línea que se que viene arriba, la
14:21línea azul que se llama el peptido. C o
14:23el pepéptido de conexión, este se
14:25excinde de la molécula dando lugar a la,
14:28o sea, se de la proinsulina para dar
14:30lugar a la insulina activa. Entonces,
14:34esta insulina pues no tiene eh
14:37glicosilaciones, lo cual pues de nuevo
14:38permitió eh la producción en plataformas
14:41bacterianas como Ecoli. Aquí en la
14:44diapositiva los se muestran como tal en
14:48círculos los residuos de aminoácidos que
14:50conforman la cadena, tanto la las bueno,
14:52la insulina tanto de la cadena A como la
14:54cadena B. Los que están resaltados en
14:57color amarillo son los residuos de
15:01aminoácidos donde se han hecho
15:02modificaciones
15:04a la estructura para darle propiedades
15:06farmacocinéticas diferentes, para
15:08generar análogos de insulina, así como
15:10también las argininas que están eh
15:12resaltadas en rojo, que también se
15:13utilizan en insulinas modificadas.
15:16Hm.
15:18Es también importante mencionar que a
15:20nivel estructural y fisiológico,
15:24la insulina es biológicamente activa
15:28como un monómero. Sin embargo, se ha
15:32visto que de hecho esta pues tiene una
15:38es propensa a asociarse en endos y luego
15:44posteriormente en en aglomerados pues de
15:48mayor de mayor orden.
15:51De hecho, también es una de las
15:52características por o una de las razones
15:54por las que es muy importante prevenir
15:56la la agregación durante la formulación
15:59de los medicamentos de insulina,
16:01justamente por esta tendencia a
16:02dierizarse o polimerizarse. Y de hecho
16:05se ha visto que en el páncreas tiende a
16:07almacenarse en los en las células beta
16:10de Angerhans
16:12como eh exámersos en presencia de iones
16:15zinc.
16:16se tres dímeros se ensamblan para formar
16:19eh exámmeros que son altamente estables
16:22y que una vez que se liberan eh de las
16:24vesículas, o sea, que se liberan a la
16:26sangre, pues se van eh disociando de
16:28nuevo de dimeros a monómeros y el
16:31monómero es el que es capaz de
16:33interaccionar con su receptor en las
16:34células eh sensibles a la insulina como
16:38el músculo, el hígado o el tejido
16:40adiposo.
16:41Aquí les comento esto porque justamente
16:44esa particularidad, esta tendencia que
16:46tiene la insulina para formar exámeros y
16:49que estos sean estabilizados en
16:51presencia de ionesc va a explicar pues
16:54muchas de las modificaciones
16:56estructurales que se han hecho a nuevas
16:57formulaciones o análogos de insulina y
16:59por qué el zinc suele estar presente en
17:02las formulaciones.
17:06insulina actúa como un tratamiento de
17:09reemplazo hormonal principalmente en
17:11pacientes con diabetes. Eh recordemos
17:14que la diabetes se clasifica eh en dos
17:16tipos principales, aunque hay otras
17:18subdivisiones. Tenemos la diabetes
17:20mellitus tipo 1, que esta es una
17:21enfermedad autoinmune donde eh se
17:24produce la destrucción casi completa de
17:26las células betapancreáticas por el
17:28sistema inmunológico de los pacientes,
17:30lo que lleva a una deficiencia absoluta
17:33de insulina. Por lo tanto, sin reemplazo
17:36exógeno, es decir, sin la eh insulina
17:38recombinante, los pacientes desarrollan
17:40hiperglucemia grave, cetosis y,
17:43finalmente, cetoacidosis diabética, que
17:45es una condición eh potencialmente
17:47mortal. Eh, entonces es indispensable
17:50como terapia de reemplazo para este tipo
17:52de pacientes. Por otro lado, para
17:54también se utiliza para el tratamiento
17:55de la diabetes tipo 2. Eh, en este tipo
17:58de diabetes existe inicialmente una eh
18:01resistencia periférica a la insulina, o
18:03sea, a diferencia de la diabetes tipo 1
18:04que tiene origen autoinmune. Esta pues
18:06es la diabetes tipo 2, es una enfermedad
18:09eh crónica que con el tiempo genera un
18:11deterioro progresivo de la secreción de
18:14insulina a través, o sea, por el
18:15páncreas. Hm. Y bueno, aunque muchos
18:18pacientes se controlan inicialmente con
18:20cambios en el estilo de vida,
18:22hipoglucemiantesales
18:24y una prop eh o sea, no es necesario que
18:27todos los pacientes con diabetes tipo 2
18:29eh requieran administración de insulina,
18:32una proporción significativa requiere
18:34eventualmente, especialmente en etapas
18:36más avanzadas de la enfermedad, pues
18:37terapia con insulina.
18:40Eh, también la insulina en la práctica
18:43clínica se puede utilizar para el
18:44tratamiento de la cetoacidosis diabética
18:47eh en emergencias, o sea, en hospitales
18:49por vía intravenosa, para reducir
18:51rápidamente eh la eh las concentraciones
18:55de de glucosa y suprimir la cetogénesis.
18:58durante cirugías, eh también pues
19:01especialmente cuando hay infecciones
19:03graves o estés metabólico, pues puede
19:05ser necesario utilizar la insulina para
19:07controlar eh controlar la la glucemia,
19:12las concentraciones de glucos en sangre
19:13y eh por reducir las complicaciones y
19:16mortalidad de estas enfermedades.
19:19También se puede utilizar la insulina en
19:22el embarazo y la diabetes gestacional.
19:25Eh, ya que durante el embarazo a veces
19:29la insulina puede no atravesar la
19:31placenta en cantidades significativas y
19:34pues presenta una mayor eh o sea, se
19:37utiliza como una estrategia de para
19:40asegurar el bienestar de eh el feto y es
19:43mucho más efectivo que otros eh
19:45antidiabéticos o hipoglucemiantes
19:47orales. Hm.
19:50Como ya mencioné, la insulina se secreta
19:52en respuesta, o sea, por las células del
19:54páncreas, principalmente en respuesta al
19:57al incremento en la glucosa en sangre
20:00tras la ingesta de alimentos y actúa
20:02como una señal anabólica.
20:05Aquí en la en la figura que que se
20:08muestra en la diapositiva tenemos dos
20:10gráficas que si se fijan no quiero decir
20:12que son exactamente iguales, pero
20:15muestran el mismo patrón de
20:17concentraciones en sangre. La de arriba
20:19es la concentración de insulina y la de
20:21abajo la concentración de glucosa a lo
20:23largo a lo largo del día. Entonces, aquí
20:26pues básicamente lo que vemos es que va
20:28a a la par, obviamente con un ligero
20:30desfase entre pues la concentración de
20:33una y otra para ver el efecto
20:34terapéutico que sería la reducción de
20:36los niveles de glucosa, es que pues
20:38conforme aumentan los niveles de glucosa
20:41va a aumentar la concentración eh de
20:43insulina en sangre, pues para tratar de
20:44controlarlos hasta llegar un punto eh en
20:47que mantengamos los niveles de glucosa
20:49en un estado eh basal o óptimo para el
20:52funcionamiento del cuerpo.
20:54E
20:56la insulina funciona principalmente a
20:59nivel hepático y en el músculo, donde
21:02pues van a estimular la captación de
21:06glucosa por estos tejidos y a su vez va
21:08a estimular la gluconiogénesis,
21:11inhibe la producción endogenada de
21:13glucosa, incrementa la captación de
21:15glucosa en tejido adiposo
21:18eh y simultáneamente favorece la
21:20síntesis de triglicéridos, proteínas
21:22mientras suprime procesos catabólicos
21:24como lipisis o proteisis. Eh, entre los
21:29posibles efectos adversos que se han
21:30reportado o riesgos hacia el uso de
21:33insulina, pues tenemos pues el el más
21:35obvio que es la hipoglucemia. eh es el
21:38efecto adverso más frecuente y se
21:40produce cuando la concentración de
21:41insulina excede pues las necesidades
21:43metabólicas donde lo bajamos más allá de
21:47estos eh niveles niveles basales.
21:53Y pues esto reduce principalmente
21:56y peligrosamente la glucemia y puede
21:58provocar confusión, pérdida de
22:00conciencia, convulsiones incluso la
22:02muerte porque puede restringir los
22:04niveles, o sea, la cantidad de glucosa
22:06disponible para el sistema nervioso
22:08central.
22:10Otro efecto que se ha reportado es el
22:12aumento de peso. Al mejorar la captación
22:15de glucosa, pues esto puede incrementar
22:17la eficiencia metabólica y y favorecer
22:19la eh la síntesis de grasa. También eh
22:23eh puede ocurrir la hipodistrofia en el
22:25sitio de inyección.
22:27Eh, es decir, que eh como es una
22:30administración repetida, como vemos
22:32estos picos de glucosa que se ven a lo
22:34largo del día, que están eh determinados
22:36principalmente por la ingesta de
22:38alimentos, pues un paciente con diabetes
22:40pues tiene que inyectarse eh la insulina
22:42varias veces al día, ¿no? Entonces, si
22:44se fijan, pues muchos pacientes con
22:46diabetes tienen que estar rotando los
22:48sitios de inyección, porque si se hace
22:50se hacen administraciones repetidas en
22:51la misma zona, pues esto puede eh
22:54inducir estas alteraciones locales como
22:57lipoatrofia y eso también puede estar
22:59asociado a reacciones inmunológicas, lo
23:01cual a su vez van a alterar cómo es que
23:04se absorbe eh se absorbe la insulina.
23:07Por eso se recomienda rotar los sitios
23:09de inyección.
23:10También puede haber eh eritema o
23:12enrojecimiento, dolor, edema en el sitio
23:15de aplicación, pero estos son eh cuadros
23:17pues generalmente leves. Eh en algunos
23:20casos eh pues reacciones de
23:23inmunogenicidad. Actualmente ya no ya
23:26esto ya no ocurre como ocurría antes de
23:28la tecnología del ADN recombinante donde
23:30se utilizaba eh pues insulina de origen
23:33bobino, de origen por sí. Ahorita pues
23:34como la recombinante es completamente
23:36humana, pues esto ya no tiene tanta
23:38relevancia clínica.
23:44Eh, con respecto a las plataformas o las
23:46estrategias de producción del insulina,
23:48dado que a que esta eh hormona pues es
23:51relativamente pequeña y no tiene eh
23:53glicosilaciones, pues se pueden utilizar
23:55sistemas microbianos como bacterias eh o
23:58levaduras para su producción, lo que
24:00pues esto ah pues reduce costos y
24:02aumenta los rendimientos. La plataforma
24:05más común esikoli.
24:07Eh, en esta en esta plataforma
24:11generalmente se va la acumulación a
24:13cuerpos de a cuerpos de inclusión, eh,
24:16que esto no necesariamente es algo
24:18negativo, simplemente pues requiere
24:21etapas eh posteriores durante
24:24proceso de de purificación como
24:26solubilización en los cuerpos eh de
24:28inclusión y replegamiento. Esto les digo
24:31no necesariamente es malo. puede ofrecer
24:32una ventaja de proteger a la proteína de
24:35proteis intracelular y también pues
24:37facilita la recuperación eh y
24:39concentración de la insulina que se
24:41puede recuperar.
24:44E es decir, que es más fácil aislar los
24:46cuerpos de inclusión y obtener eh una
24:48insulina con una muy alta pureza en un
24:51estado tal vez no bien plegado, pero que
24:53con en el procesamiento downstream pues
24:55se puede se puede recuperar esto.
24:58E
25:03y bueno, en cuanto a la el el proceso,
25:09la síntesis y la producción, como se
25:11muestra aquí en la en la figura,
25:14se produce eh en Ecoli.
25:17Eh, de hecho, aquí se pueden utilizar
25:21dos estrategias. Como les mencionaba, la
25:23insulina está constituida por dos
25:25cadenas unidas por dos fuentes de
25:27sulfuro. Eh, entonces aquí eh a nivel
25:31industrial se han implementado dos
25:32estrategias. Una es sintetizar la
25:37insulina
25:39eh en dos reactores diferentes. Uno eh
25:43donde una ecoli que sintetiza la cadena
25:46A, otra ecoli que sintetiza la cadena B,
25:48se purifican y luego ya en el
25:50procesamiento dstream se promueve la
25:52formación de puentes de sulfuro eh para
25:54que se para que se ensamblen
25:56correctamente. Esta es el caso de la
25:58insulina eh CRB.
26:01Eh, por otro lado tenemos la insulina
26:03PRB, que es más bien donde lo que
26:06sintetiza el coli es la es la secuencia
26:09de la proinsulina, que y de hecho es la
26:11que se muestra aquí en el en el diagrama
26:13de producción,
26:15donde eh como parte del procesamiento
26:18dstream se incluye eh un paso de una
26:21proteisis enzimática eh si no me
26:23equivoco es con tripsina para liberar a
26:27la insulina ya ensamblada con sus
26:29puentes def sulfuro y a la que ya se
26:31elimina eh el peptido C. Aquí algo
26:34también que vale la pena mencionar es
26:36que bueno, obviamente estas
26:38formulaciones también eh contienen
26:40contienen zinc y eh pues que para la
26:45recuperación, perdón, para la producción
26:47pues incluso se pueden utilizar técnicas
26:50diría yo poco convencionales para la
26:52purificación de biofarmacéuticos, que es
26:54la cristalización. ahí nada más como
26:57dato. Y bueno, tenemos cromatografías
27:00como eh intercambio iónico y en fase
27:03reversa.
27:07En cuanto a las propiedades
27:08farmacocinéticas eh de la insulina,
27:11particularmente la absorción, la
27:13insulina presenta una situación muy
27:15particular, es decir, que la eliminación
27:18plasmática es relativamente rápida, como
27:20ya vimos en el en las diapositivas
27:23previas, donde cómo se ven los picos. de
27:25insulina a lo largo del día, pero el
27:28inicio, la intensidad y la duración del
27:31del efecto van a estar eh marcados
27:34principalmente por qué tan rápido se eh
27:37se absorbe la insulina. hablando como
27:38medicamento.
27:40Eh, principalmente la insulina se
27:43administra por vía subcutánea,
27:45acuérdense, en forma de eh exámero, las
27:49formulaciones eh que contienen que está,
27:51o sea, se encuentra la insulinaal en
27:52forma de exámero, eh por lo que la
27:55insulina no entra inmediatamente a la a
27:57la circulación sanguínea. Primero debe
27:59eh para empezar difundirse desde el
28:02depósito, desde el sitio de aplicación
28:03formado en el tejido hacia capilares
28:05sanguíneos.
28:07Eh, pero para esto tiende eh, o sea, se
28:11tiene que disociar este este complejo,
28:13¿no?, este examero de insulina. Eh, algo
28:16que también vale la pena eh mencionar
28:18que la insulina, además de formularse en
28:20presencia de zinc, también eh se formula
28:23en presencia de excipientes fenólicos
28:25como el memecresol, fenol o metil
28:27paraveno, lo cual tiende a estabilizar
28:31más esos exámeneros. Entonces, eh esto
28:34retrasa
28:36el tiempo que le toma ese examero en
28:39disociarse para que se pueda eh absorber
28:42eh difundir a través del epitelio
28:44capilar.
28:46Eh,
28:48en cuanto a la distribución, debido a su
28:50tamaño pequeño y su naturaleza altamente
28:52hidrofílica, su distribución es
28:54relativamente eh simple comparada con
28:57otros biofarmacéuticos de mayor tamaño.
28:59Se distribuye principalmente en el
29:01espacio extracelular y presenta un
29:03volumen de distribución bajo. no
29:06atraviesa membranas lipídicas ni penetra
29:09tejidos profundos porque además su
29:11acción o su efecto
29:13fisiológico pues va a depender de la
29:15unión a receptores específicos que van a
29:18estar en la superficie de las células
29:20blanco como músculo, hígado y tejido
29:23adiposo.
29:27El metabolismo de la insulina eh ocurre
29:29principalmente por degradación
29:30proteítica. Eh, una vez que la insulina
29:33se une al receptor de la célula blanco,
29:35el receptor eh o más bien este complejo
29:38hormonal receptor se internaliza por
29:40endocitosis, por la misma célula y la
29:42molécula es degradada en los lisosomas.
29:45Eh, el hígado y el riñón son los órganos
29:47más importantes para su eliminación y
29:49aclaramiento. En condiciones
29:51fisiológicas, eh, una gran parte de la
29:54insulina endógena se depura como incluso
29:56como parte del metabolismo del primer
29:59paso hepático. Sin embargo, cuando se
30:01administra por vía subucánea, este
30:03efecto se reduce se reduce más. Em, el
30:07tiempo de vida media de la insulina de
30:09la insulina libra libre, perdón, es de
30:11apenas unos minutos.
30:14Eh, esto significa que si la absorción
30:16fuera instantánea, la hormona
30:18desaparecería rápidamente de la sangre.
30:21Paradójicamente, lo que vemos aquí en la
30:24en la tabla que se muestra es que el
30:25efecto clínico dura muchas más horas,
30:28dado que la absorción y no la
30:30eliminación gobiernan el perfil temporal
30:33después de su después de su
30:35administración. También en esta tabla eh
30:37se muestran pues las e los tiempos de
30:40duración del efecto de algunos análogos
30:43de insulina. Tenemos insulinas de acción
30:45rápida, de acción intermedia y de acción
30:49prolongada. Entonces, obviamente estos
30:51no son los datos de la insulina normal.
30:53Aquí estaría eh el tiempo de aparición
30:57del efecto, pues en entre unos 15
31:00minutos, una hora. Después llegamos a un
31:02pico, eh, que la insulina normal sería
31:05después de las 4 horas y después un una
31:09bajada, pero que es bastante eh no no
31:12digo pronunciada, sino que al contrario
31:14eh pues dura mucho tiempo. Eh donde el
31:16efecto puede ser pues hasta unas 6 horas
31:20e 6 8 horas. Entonces, si se fijan aquí
31:24las modificaciones eh que se pueden
31:26hacer a la estructura de la insulina
31:28para alterar sus propiedades
31:29farmacocinéticas, podríamos llevarnos
31:31dependiendo de la dosis eh pues
31:33administraciones que sean eh que ayuden
31:36a controlar los niveles de glucosa en
31:37pacientes hasta 24 horas o 48 horas. Por
31:40ahí incluso se ha hablado de que se ha
31:43trabajado en formulaciones eh de
31:45insulinas eh semanales, pero bueno, esto
31:47ya es para un nicho de pues pacientes
31:49muy particular, ¿no?
31:54Entonces, se han desarrollado ya a lo
31:56largo del tiempo, como ya este
31:57medicamento tiene mucho tiempo en el
31:58mercado, análogos eh de insulina que van
32:01a conservar esencialmente eh la misma
32:04afinidad por el receptor de insulina,
32:06pero con y obviamente el mismo mecanismo
32:09de acción. Pero lo que va a cambiar es
32:11la velocidad con la que alcanzan eh la
32:13circulación en sangre y la duración de
32:16su efecto. En la tabla que se muestra
32:18aquí arriba viene la primera fila que es
32:22la insulina humana o el nombre comercial
32:24de la umulina de ilili y por ahí hay
32:26otras otras formulaciones de insulina
32:29humana recominante donde eh se describe
32:34eh por ejemplo el aminoácido 21 de la
32:36cadena A, el 3, 28 29 30 31 y 32 de la
32:42cadena B y ahí viene el residuo de
32:44aminoácidos, o sea, el tipo de
32:45aminoácido que va a venir en esa
32:46posición. Entonces, en la insulina
32:49humana, eh, pues son las que se muestran
32:51acá arriba y eh las siguientes, los
32:55siguientes que están listados en la
32:56tabla son las insulinas, los análogos de
32:58insulina. Tenemos de acción rápida, de
33:00acción intermedia o de acción
33:01prolongada, donde pues los cambios son
33:03justamente en esos en esos aminoácidos.
33:06Aquí, por ejemplo, podemos tener cambios
33:08desde aminoácidos diferentes. A veces no
33:12son inversiones, sino que se cambia de
33:14lugar uno por otro. Eh, o eh incluso,
33:19como es el caso de la insulina glargina,
33:21adiciones eh de aminoácidos en el
33:23extremo eh en el extremo final de la
33:25cadena B. En el caso de las insulinas de
33:29acción rápida, estas están diseñadas
33:31para que se administren cercano a las
33:34comidas.
33:36Eh, entre estos tenemos a la insulina
33:39Lis Pro,
33:41eh, que esta es una insulina, de hecho,
33:43de acción ultra rápida en la que la
33:45molécula de insulina en la secuencia se
33:48invierte el orden de los aminoácidos de
33:50la cadena B intercambiando una lisina
33:52por y una prolina en las posiciones 28 y
33:5529. Sí, por eso lispro. Este intercambio
33:58modifica eh la superficie de interacción
34:01intermolecular que va a ser responsable
34:03de la dierización y por ende la
34:05formación de los complejos
34:07de insulina. Al debilitarse estas
34:09interacciones, la eh aquí pues la
34:12insulina
34:13eh esta tendencia que tiene a formar
34:15dimeros y exámenos disminuye, por lo que
34:19van a predominar especies monoméricas en
34:21la formulación. Entonces, aquí como
34:24consecuencia, después de la
34:25administración la difusión hacia los
34:28capilares es más rápida, dado que no se
34:31tiene que disgregar este examero y por
34:33lo tanto el inicio de acción ocurre eh
34:36en pocos minutos. En la figura de eh
34:39arriba se muestra cómo sería pues el
34:41comportamiento de disociación del exámo,
34:45normal de la insulina eh recombinante,
34:49eh considerando también la presencia de
34:51los eh conservadores o excipientes
34:54fenólicos como el mcresol y también pues
34:56la presencia de zinc, ¿no? Entonces, si
34:59se fijan en la insulina lispro, pues ese
35:01exámero es menos estable, entonces se
35:03disocia mucho más rápido.
35:06Luego tenemos la insulina aspártica, que
35:08sigue una lógica de diseño pues similar
35:10al ISP Pro, pero en este caso lo que se
35:12sustituye es la prolina en la posición
35:1628 por un ácido aspártico. El ácido
35:18aspártico es un aminoácido cargado
35:20negativamente.
35:22Esto va a generar una repulsión
35:24electrostática entre las moléculas
35:25adyacentes de insulina, desestabilizando
35:29pues esa asociación en estos en estos
35:31complejos.
35:33Eh, entonces pues el resultado pues es
35:35algo muy parecido, ¿no? Es una insulina
35:36que se disocia rápidamente de los
35:38exámenos. Luego tenemos la insulina
35:40glulicina.
35:42En esta se incorporan dos
35:43modificaciones. En la cadena B se
35:46sustituye la asparajina por lisina en la
35:48posición eh en la posición tres y una
35:53licina por un ácido glutámico en la
35:55posición 29. Estas sustituciones van a
35:59alterar tanto la distribución de cargas
36:01y la conformación local de la insulina,
36:04reduciendo todavía más la estabilidad de
36:06estos agregados de exámeners. Como
36:09resultado, pues tenemos una formulación
36:11predominantemente monomérica, es decir,
36:14que no se, o sea, eliminamos todo este
36:15tiempo que eh eh que le requeriría a la
36:19insulina disociarse de los complejos
36:20examéricos para poder llegar a la
36:22circulación. Por lo tanto, la absorción
36:24es mucho más rápida.
36:29Y bueno, tenemos por otro lado las
36:31insulinas de acción prolongada, que
36:33estas tienen como objetivo eh
36:35principalmente generar un depósito
36:37subcutáneo o una manera de reservorio
36:40después de sus de su después de su
36:42administración que vayan liberando eh
36:45insulina lentamente durante muchas
36:47horas, o sea, a lo largo del día.
36:49En este caso, el objetivo es mantener
36:51las concentraciones plasmáticas
36:53relativamente constantes que traten de
36:56imitar la secreción basal pancreática de
36:59eh insulina. Aquí vale la pena también
37:02aclarar que el uso de insulinas de
37:04acción rápida o de acción prolongada
37:06pues va a depender de las necesidades
37:07del paciente, principalmente eh pues en
37:09pacientes eh con diabetes eh tipo dos,
37:13al menos los de insulina de eh de acción
37:15prolongada, pues es más común en
37:17pacientes diabetes tipo 2 que no e que
37:22todavía no tienen dificultades, tantas
37:24dificultades en la secreción de insulina
37:25endógena y que solamente necesitan eso
37:28para ayudarles a controlar sus niveles
37:30de glucosa.
37:31A diferencia, por ejemplo, eh de las
37:33insulinas de acción ultra rápida, que
37:34está probablemente eh como son para
37:37administrarse eh previo a las comidas,
37:40pues tal vez sea eh más necesario
37:43aplicarlos en pacientes con diabetes
37:45tipo 1 o también diabetes tipo 2, pero
37:47en situaciones ya más avanzadas de la
37:49enfermedad.
37:51E y bueno, entre estos tenemos ejemplo,
37:54yo creo que el más representativo es la
37:55insulina glargina.
37:57Aquí también se modifica la secuencia de
37:59aminoácidos sustituyendo en este caso
38:01una parajina por una glicina en la
38:05posición de la eh la posición 21 de la
38:07cadena A.
38:10Eh, por eso Glar, ¿no? Bueno, la G es GL
38:15es de glicina, perdón. Y en la cadena eh
38:19en la cadena B, en el extremo C terminal
38:22se añaden dos residuos de arginina. Por
38:24eso, o sea, este juego de palabras de
38:26glargina, ¿no? De la glicina y las dos
38:28arginas. Estas modificaciones lo que
38:31generan es un cambio en el punto
38:33isoeléctrico de la molécula de insulina
38:35hacia valores más neutros. Aquí vale la
38:38pena mencionar que la formulación se
38:40prepara en pH ligeramente ácido donde la
38:43proteína eh es soluble,
38:46eh al menos en esta formulación de la
38:48insulina glargina. Sin embargo, tras la
38:50inyección eh subcutánea, pues a pH
38:53fisiológico, que es eh pH 7.4,
38:57este cambio de pH induce su
38:59precipitación en forma de cristales.
39:02Entonces este precipitado actúa como un
39:04depósito sólido que se va disolviendo
39:07lentamente, liberando pequeñas
39:08cantidades de insulina eh
39:10aproximadamente 24 horas. Aquí se fijan
39:14eh pues no aparece tanto la presencia o
39:17importancia eh de la formación de los
39:19monómeros, sino lo que va haciendo que
39:20la liberación de la insulina sea más
39:22lenta es por la disociación de de estos
39:25cristales, porque acuérdense que
39:26habíamos mencionado que una
39:27característica también para que un
39:29medicamento se absorba y se distribuya
39:31adecuadamente en el cuerpo, pues es que
39:33tiene que estar eh soluble en algún
39:35medio, ¿no? No no no es como que se
39:37anden distribuyendo sólidos a través del
39:39cuerpo.
39:41Luego tenemos la insulina de Temir.
39:44En esta molécula de insulina se elimina
39:48el residuo terminal de la cadena B y se
39:50une covalentemente con una molécula de
39:53ácido graso de cadena larga. Es de 14
39:56carbonos, es decir, una molécula de
39:58ácido mirístico a una a la licina
40:01terminal. Eh, la agregación de esta
40:04molécula lipídica aumenta la afinidad de
40:07la insulina por la albumina plasmática.
40:10Entonces, tras la tras la
40:12administración, una fracción
40:13significativa de la insulina se une a la
40:15albúmina en el tejido subcutáneo y en la
40:18formulación. Entonces, ya habíamos
40:20mencionado que la unión de proteínas
40:22plasmáticas actúa como un reservorio y
40:25en este caso va a hacer que la insulina
40:28se vaya liberando lentamente
40:32eh una vez que está que está unida o a
40:36la a la insulina. El resultado va a ser
40:39una absorción mucho más prolongada y una
40:42eh menor variabilidad interindividual, o
40:44sea, entre los pacientes, mejores
40:46controles eh de glucosa. Luego tenemos
40:50la insulina de Gludec, que esta contiene
40:53una cadena lipídica todavía más larga,
40:56eh una sí, una cadena lipídica más larga
40:59y la inyección. Las eh moléculas de
41:02insulina forman de hecho complejos
41:04multiexaméricos
41:05solubles que se van a organizar en
41:08largas cadenas eh en el tejido
41:10subcutano. Entonces, estas estructuras
41:13es necesario que se disocien para, o
41:16sea, decíamos de de estos complejos de
41:18exámmeros a exámero, luego a dimero y
41:20luego a monómero para eh
41:24eh pues para que puedan ejercer del
41:25efecto. Entonces, en este caso, la
41:28liberación de los monómeros, pues es se
41:30ha reportado por incluso de más de 40
41:33horas.
41:34Además, también presenta una unión a la
41:38albumina plasmática, lo que también va a
41:39contribuir a una duración prolongada de
41:42su efecto y a un perfil muy plano de
41:45concentración a través del tiempo. O
41:46sea, aquí sí se logra una liberación muy
41:48sostenida de insulina con pocas eh
41:51administraciones.
41:56También tenemos insulinas de acción
41:58intermedia, que en este caso es la
42:00insulina protamina, la cual a diferencia
42:04de los análogos anteriores, la insulina
42:06protamina o que también se conoce como
42:08insulina NPH,
42:11eh, que hace alusión a neutral protamine
42:13Hagendorn.
42:16Aquí la modificación
42:18eh no se basa en la secuencia de
42:19aminoácidos. Eh, la modificación de la
42:22insulina, eh, protamina está se
42:25encuentra principalmente en la
42:26formulación.
42:28Aquí se pueden utilizar eh la insulina
42:30humana recombinante o incluso también
42:33análogos de insulina, ya sea de acción
42:35rápida o de acción lenta. Eh, pero aquí
42:38estas insulinas se combinan con una
42:41proteína que se llama protamina.
42:44La protamina es una proteína básica rica
42:47en argininas que forman complejos
42:48insolubles con la insulina.
42:50Por lo tanto, estos complejos van a
42:52precipitar tras la inyección subcutánea
42:54y se van a disolver gradualmente,
42:56liberando insulina de forma eh
42:59retardada. La protamina actúa como
43:02tanto, por lo tanto, como un agente de
43:04liberación sostenida, aunque no tan eh
43:07tan sostenida como las insulinas de
43:09acción prolongada.
43:11Eh, y bueno, este ya actualmente ya creo
43:15que las insulinas de acción prolongada
43:18más modernas han ido desplazando la
43:20insulina protamina.
43:22Eh,
43:24sin embargo, durante décadas pues fue la
43:26principal forma de insulina de eh de
43:29acción intermedia. Aquí, ¿por qué
43:30también se ha disminuido su uso? porque
43:33eh la protamina pues proviene de eh si
43:36no me equivoco son proteínas de pescado
43:38y eso también pues se asociado con
43:40ligeras eh reacciones inmunogénicas.
43:42Entonces, por esto se ha optado por irse
43:45eh por las formulaciones eh bueno,
43:47estrategias en la en la en el diseño de
43:50la insulina que sean más seguras como la
43:52insulina glargina o la insulina de de
43:56Gludec, etcétera.
44:01En esta tabla se muestra nada más una
44:03primera parte. Eh, no son todos los
44:05ejemplos de las insulinas eh de las
44:07formulaciones de insulina que están eh
44:09disponibles en el mercado. Nada más en
44:11una parte pueden eh consultar la tabla
44:13completa en el capítulo de Cromelin, que
44:15habla sobre la insulina. Eh, aquí pues
44:17vale la pena resaltar que las
44:19formulaciones eh comerciales de insulina
44:21se ofrecen ya sea como formulaciones en
44:25solución o suspensión acuosa. Van a
44:29estar estériles y listas para inyección
44:31subcutánea. Generalmente van a estar
44:33contenidas en viales multidosis,
44:36cartuchos para plumas precargadas o
44:38sistemas de difusión continua. Eh, si se
44:41fijan, la mayoría de los expientes,
44:43espero se alcance a ver, eh el zinc,
44:45pues es el expiente más característico
44:47en las formulaciones de insulina. Ya
44:49mencionamos que su función es
44:50estabilizar la estructura eh examérica.
44:54De manera particular, los Iones Sync
44:56coordinan eh, o sea, generan un un
44:58complejo coordinado entre los residuos
45:01deina presentes en la molécula de
45:03insulina, promoviendo la [carraspeo]
45:05formación de complejos más estables.
45:07Otro que decíamos son los conservadores
45:10fenólicos. [carraspeo]
45:11Eh, las formulaciones multidosis, como
45:14es el caso de la insulina, requieren
45:15agentes antimicrobianos que prevengan la
45:18contaminación tras múltiples punciones
45:20del vialogo del cartucho. Eh, en entre
45:23estos, pues los conservadores más usados
45:25son el fenol y el cresol.
45:28Eh, estos compuestos fenólicos además se
45:31ha visto, eso sería como un plus en
45:33cuanto a la formulación, o sea, no es
45:35no, o sea, no no sucede en otras en
45:38otras proteínas solo con la insulina. es
45:40que estos complejos, estos compuestos
45:41fenólicos se unen a sitios específicos
45:44del exámero y van a estabilizar la
45:46conformación del exámeno, conocida como
45:49un estado R, que es más compacta y menos
45:51propensa a desnaturalización.
45:54Por lo tanto, los conservadores también
45:56van a contribuir a la estabilidad
45:57conformacional de la proteína en la
45:59solución o en la suspensión. También
46:02tenemos agentes isotónicos como glicerol
46:04o cloruro de sodio para ajustar los
46:06molaridad a los valores cercanos a los
46:08fisiológicos para reducir el dolor o
46:11irritación tras la inyección.
46:13Tenemos también agentes amortiguadores
46:15como salas de fosfato, citrato o tris
46:19para mantener el pH en rangos
46:20compatibles para la estabilidad de la
46:22insulina y también para la
46:23administración, la tolerancia en los
46:25tejidos.
46:27Eh, ya mencionábamos que la insulina
46:29glargina eh de manera intencional el pH
46:31de la formulación es ligeramente
46:34ligeramente ácido, ¿no? Entonces esto
46:36cambia. También puede llegar a ver
46:38surfactantes
46:40como polisorbatos para reducir la
46:42absorción de la proteína a las
46:44superficies del envase o interfaces eh
46:46líquido líquido. Entonces, esto también
46:48es importante porque decimos que la
46:49insulina pues tiene esa tendencia a
46:52autoagregarse.
46:55Algo que también vale la pena mencionar
46:59que si se fijan, o sea, podemos tener eh
47:03combinaciones en una formulación entre
47:05análogos. Eh, aquí ya hemos mencionado
47:09que la liberación natural de insulina eh
47:13pues se caracteriza por dos componentes.
47:15Una es una liberación vasal continua, o
47:18sea, donde vamos a mantener los niveles
47:20de glucosa, pues principalmente entre 80
47:22y 100 mg por dclilitro en sangre.
47:24seguida de picos rápidos asociados a la
47:27ingesta de alimentos. ¿Cómo se puede
47:29reproducir esto? En una formulación. Si
47:32nada más administramos insulina eh
47:35recombinante o insulina de acción rápida
47:37o insulina de acción prolongada, ninguna
47:39de estas puede reproducir este patrón
47:41como tal. Por ello, en la práctica
47:43clínica se han utilizado eh
47:45formulaciones premezcladas de diferentes
47:48tipos de insulina.
47:50Por ejemplo, se pueden mezclar insulinas
47:52de acción rápida con insulinas de acción
47:54intermedia o prolongada para poder
47:57cubrir de manera simultánea los
47:59requerimientos basales y postprandiales,
48:01es decir, después de los alimentos. Eh,
48:04las formulaciones clásicas combinan la
48:06insulina regular con análogos eh
48:08rápidos, por ejemplo, en proporciones eh
48:1270 30 7525, como se muestra aquí en la
48:15figura, en la tabla, perdón. Más
48:17recientemente se han desarrollado
48:19combinaciones que combinan insulinas de
48:22acción ultralenta con una de acción
48:24ultra rápida para lograr eh perfiles más
48:27cercanos a los fisiológicos. Entonces,
48:29pues aquí tenemos muchas opciones en el
48:31mercado. Eh, pues aquí la necesidad de
48:33una formulación o de otra pues va a
48:35depender e principalmente en los
48:37pacientes con diabetes tipo 2, pues
48:39dependiendo del el estadio eh de la
48:41enfermedad y de qué tan finos tienen que
48:43ser eh el control de sus niveles eh de
48:46glucosa con la insulina.
48:51Bueno, ahora vamos a hablar eh de otra
48:54eh hormona que se utilizó, bueno, que se
48:57ha utilizado mucho como medicamento
48:59biotecnológico, que es la hormona del
49:01crecimiento. Esta pues prácticamente fue
49:03el segundo medicamento biotecnológico e
49:06en aprobarse. La hormona del crecimiento
49:08también se conoce como somatotropina
49:11y es una hormona utilizada en terapia de
49:15reemplazo endócreo. Originalmente, vale
49:18la pena mencionar, se obtenía de
49:20hipófisis humanas, es decir, pues del
49:23cerebro de cadáveres,
49:26eh dado que la hormona del crecimiento,
49:29perdón, eh se es muy es altamente
49:33específica de especie. Entonces, aquí en
49:35este caso, a diferencia de la insulina,
49:37que se puede utilizar la insulina bobina
49:40o porcina para obtener un efecto que
49:43puede estar asociado con eh un riesgo de
49:46reacciones de inmunogenicidad. En el
49:48caso de la hormona del crecimiento, esto
49:50no era posible. la administración de
49:52hormonas del crecimiento animales no
49:54generaban un efecto, por lo tanto se
49:56tenía que recurrir a cadáveres, lo que
49:59se asociaba para empezar con una una
50:02fuente limitada del hormona, así como
50:06también transmisión de enfermedades
50:08priónicas, particularmente eh una la
50:10enfermedad de Cruzfell Jacob, eh que
50:14esta pues tiene consecuencias bastante
50:17severas, es una enfermedad mortal.
50:20Entonces, el uso de la hormona de
50:21crecimiento recombinante marcó un
50:23referente para estándares de pureza,
50:27control microbiológico y estándares de
50:29calidad en los biofarmacéuticos.
50:31En cuanto a la estructura, pues la
50:33hormona del crecimiento es activa eh
50:36como un monómero de 191 aminoácidos,
50:40peso molecular de 22 kaltons, aunque eh
50:42se han reportado eh variantes en sangre
50:45de diferentes tamaños, pero esta de 22
50:47kaltons es la biológicamente eh activa y
50:49la que se utiliza en las eh la
50:51formulación de medicamentos.
50:53La secuencia contiene múltipas regiones
50:55hidrofóbicas, lo que va a favorecer
50:57interacciones eh intermoleculares no
51:00deseadas cuando la proteína se encuentra
51:02parcialmente desplegada. Esto eh lo
51:05vamos a entender más adelante que
51:06hablemos de eh pues de la formulación y
51:08los expientes que se utilizan.
51:11Eh, además que estas regiones son
51:12responsables de su marcada tendencia a
51:14la agregación.
51:16contiene eh dos enlaces de sulfuro
51:19internos que estabilizan el plegamiento.
51:23Eh no tiene glicosilaciones,
51:27eh lo cual pues es una ventaja, ya que
51:29permite su producción en sistemas eh
51:31sistemas bacterianos como como Ecoli. De
51:34hecho, pues es principalmente como se
51:35produce, aunque también se pueden
51:36utilizar plataformas eucariotas y o de
51:39mamífero.
51:41Su estructura tridimensional está
51:42dominada por cuatro hélices alfa
51:45antiparalelas, las cuales se agrupan
51:48generando un núcleo hidrofóbico
51:50compacto, eh, que es lo que le va a dar
51:52la estructura tridimensional. Esta eh
51:56también además es una proteína globular
52:00relativamente rígida
52:03eh lo que permite un reconocimiento
52:06específico del receptor de la hormona de
52:07crecimiento eh humana, lo que la
52:09altamente especifica entre especies. De
52:12hecho, los sitios que están encerrados
52:14en círculo son los que están son las
52:16porciones de la proteína que están
52:19involucradas con la interacción con el
52:20receptor en tejido blanco.
52:23La actividad biológica de la hormona del
52:26crecimiento depende de la interacción,
52:28deseamos, con dos moléculas del
52:30receptor. O sea, hay dos receptores que
52:32se van a unir con la hormona del
52:34crecimiento, van a formar, inducir una
52:36dierización
52:38e
52:39y pues generar el efecto. Entonces,
52:41cualquier alteración estructural que
52:44modifique esas regiones que están
52:47encerradas en un en un círculo, pues
52:49puede reducir drásticamente la actividad
52:53biológica del hormona de crecimiento
52:55recombinante.
52:59De manera natural, la hormona del
53:00crecimiento es secretada por las células
53:03somatótropas de la hipófisis de la
53:06hipófisis anterior
53:09bajo el control del eje hipotálamo
53:11hipófisis, que es un eje pues muy
53:13importante en la regulación de
53:14neurotransmisores y otras hormonas en el
53:16sistema nervioso central. Su liberación
53:19va a estar regulada de forma pulsátil
53:22por dos señales opuestas.
53:24Eh, del lado e derecho tenemos en la
53:29figura tenemos la hormona liberadora de
53:31la hormona del crecimiento o GH y RH que
53:34estimula la secreción de la hormona del
53:36crecimiento, como su nombre lo dice. Y
53:38por el lado eh contrario tenemos eh el
53:42lado izquierdo, lado rojo, a la
53:45somatostatina que inhibe la liberación
53:47del hormona del crecimiento. Este patrón
53:49pulsátil es importante porque va a
53:52evitar la desensibilización.
53:53sensibilización de los receptores y
53:56permite una regulación más fina del
53:58crecimiento.
54:00Los picos de secreción eh de la hormonal
54:02del crecimiento van cambiando a lo largo
54:04de la vida. Eh, los más intensos son
54:07durante la infancia y la pubertad por
54:08obvias razones, que son periodos eh de
54:10rápido crecimiento corporal y van
54:12disminuyendo progresivamente en la edad
54:14adulta, aunque nunca se deja de secretar
54:16eh la hormona del crecimiento.
54:19Eh, además, la liberación de hormona del
54:21crecimiento aumenta durante el sueño
54:23profundo, el ejercicio físico, el ayuno
54:25prolongado, situaciones de estrés
54:27metabólico y también pues yo incluiría
54:29el embarazo.
54:32Como función fisiológica,
54:34la hormona del crecimiento humana
54:37promueve el crecimiento lineal de los
54:39huesos largos y el aumento de masa
54:41muscular mediante la estimulación de la
54:43proliferación celular y síntesis
54:45proteica.
54:47Por otro lado, va a modular el
54:48metabolismo energético, favoreciendo la
54:50movilización de grasas y la conservación
54:52de glucosa, lo que va a garantizar el
54:54suministro energético necesario para
54:56procesos anabólicos. ¿Sí? Entonces, la
54:58hormona de crecimiento es una hormona
55:00anabólica.
55:02También vale la pena mencionar que
55:04muchos de sus efectos son mediados por
55:08factores de crecimiento secundario,
55:10principalmente por el factor de
55:11crecimiento insulinoide tipo 1 o I o Ig1
55:16que se muestra aquí en la figura,
55:18sintetizado primordialmente por el
55:20hígado. Tras la estimulación por la
55:22hormonía del crecimiento, el hígado
55:24produce el el factor de crecimiento
55:26insulinoide.
55:28que va a actuar de forma endócrina,
55:29digamos, como un segundo mensajero,
55:32eh, sobre hueso, cartílago y músculo. Y
55:35se ha visto que este este factor de
55:37crecimiento es responsable directo de
55:39gran parte del crecimiento de los huesos
55:41y de la proliferación celular que se
55:43observa por hormona de crecimiento.
55:46En el tejido adiposo, eh, tanto el
55:50factor de crecimiento insulinoide como
55:52la hormona del crecimiento van a
55:53estimular la lipólis incrementando la
55:55liberación de ácidos grasos libres a la
55:57circulación. En músculo aumenta la
56:00captación de aminoácidos y la síntesis
56:01de proteínas, favoreciendo la
56:03hipertrofia muscular. Aquí también pues
56:05donde se podía justificar el uso del
56:07hormonal del crecimiento eh pues para
56:10competencias deportivas.
56:12El hígado estimula la gluconiogénesis y
56:14reduce la estabilidad, la sensibilidad
56:16de insulina, generando un efecto
56:19antiinsulínico de leve. [carraspeo]
56:21Además, hm, bueno, la hormona de
56:24crecimiento se une a receptores en
56:26múltiples tejidos como eh
56:30eh, bueno, y de manera particular,
56:32perdón, estos receptores eh activan
56:36sinasas o quinasas citosólicas
56:39denominadas jack, que fosforilan a
56:42proteínas stat que posteriormente migran
56:44al núcleo, donde van a actuar como
56:46factores de transcripción que van a
56:47regular la expresión de genes de
56:49crecimiento y síntesis proteica. Y de
56:51ahí y de ahí el efecto.
56:56Y bien, dado que la actividad biológica
56:57de la hormona de crecimiento no depende
56:59de modificaciones postraduccionales
57:01complejas eh como glicosilaciones, pues
57:04puede producirse de manera eficiente
57:06utilizando microorganismos como Ecoli.
57:10Por esto pues fue uno de los de los
57:13primeros biofarmacéuticos en aprobarse
57:15justamente en esta en esta plataforma y
57:17sigue siendo el sistema de producción
57:19predominante.
57:22Sin embargo, para poder producirse en
57:24coli, pues es importante que se utilice
57:26un gen optimizado optimizado para
57:28codones bacterianos
57:30e y con la secuencia madura del hormona
57:33del crecimiento, porque de manera
57:35similar a la insulina,
57:38la cadena
57:41h peptídica que se genera a partir de la
57:44traducción del ARN mensajero de la
57:45hormona del crecimiento, no es como tal
57:47la hormona del crecimiento funcional.
57:50Entonces, eh pues básicamente eh pues se
57:52tiene que dar la secuencia de de la
57:54hormona del crecimiento funcional. En
57:57algunos casos se utilizan protizo señal
57:58para dirigir la proteína hacia el
58:00periplasma eh bacteriano, donde el
58:02ambiente es más oxidante y esto va a
58:04favorecer la formación de puentes de
58:06sulfuro.
58:07Sin embargo, la mayor parte de la
58:09producción industrial se basa en la
58:10acumulación de la hormona de crecimiento
58:12en cuerpos de inclusión, ya que esto
58:15simplifica la recuperación y reduce la
58:17degradación. la degradación proteítica.
58:22Eh, también se han desarrollado procesos
58:24de producción en líneas celulares de
58:26mamífero, particularmente en la línea
58:28murina C17.
58:30Estas son una es una línea celular
58:32derivada de epitelio mamario de ratón
58:35que se utiliza por eh su estabilidad,
58:39facilidad de transfección y capacidad de
58:41secretar proteínas al medio
58:42extracelular.
58:44Esto de que se eh secreten eh las
58:46proteínas al medio extracelular
58:48simplifica enormemente la recuperación.
58:51Eh, además esta línea proporciona un
58:53entorno intracelular más parecido al
58:55fisiológico humano,
58:57dado que el retículo endoplásmico de
58:59estas células
59:01ofrece condiciones oxidantes adecuadas
59:04y además contiene chaperonas que van a
59:06favorecer el plegamiento correcto de las
59:09cuatro hélices alfa que se tienen que
59:10ensamblar, ¿no? Eh,
59:14entonces, pues decíamos que la secreción
59:16extracelular tiene implicaciones
59:18operativas relevantes.
59:20El sobrenadante contiene menos proteínas
59:22contaminantes comparado con un lisado
59:24celular. Además, también se evita la
59:27presencia de endotoxinas que van a estar
59:29presentes en plataformas bacterianas
59:31como ecoli, cuya eliminación requiere
59:33etapas adicionales eh de purificación. E
59:36entonces, pues al final se pueden
59:38utilizar eh ambas plataformas
59:41biológicas.
59:45En cuanto a las propiedades
59:46farmacocinéticas, eh la vía de
59:48administración más común de la hormona
59:49del crecimiento es la subcutánea, aunque
59:52también pues se pueden utilizar otras
59:54otras vías de administración. Debido a
59:56su tamaño, esta hormona se absorbe más
59:59lentamente que peptidos pequeños, como
1:00:00la insulina, es más grande, pero más
1:00:02rápidamente que moléculas como los
1:00:05anticuerpos, que es así, son todavía
1:00:07mucho más grandes, ¿no? Eh, la hormona
1:00:09del crecimiento se administra como un
1:00:11monómero soluble y la biodisponibilidad
1:00:14reportada para vía subcutánea es alta de
1:00:17entre el 70 y 80%.
1:00:20Una vez en la circulación se va a
1:00:22distribuir en el espacio extracelular y
1:00:24la acción farmacológica eh depende de la
1:00:27interacción, decíamos, con receptores
1:00:29específicos de membrana, por lo que no
1:00:31necesita atravesar membranas
1:00:32plasmáticas, o sea, no necesita
1:00:34absorberse dentro de la célula.
1:00:37eh tiene eh cierta afinidad a proteínas
1:00:40plasmáticas y de hecho pues hay una
1:00:42proteína eh endógena en sangre que es la
1:00:45proteína fijadora de la hormona del
1:00:46crecimiento,
1:00:48eh
1:00:52que pues es la que
1:00:55ay, perdón, que eh va a prolongar el
1:00:59tiempo de vida media liger ligeramente,
1:01:01¿no? De de la del crecimiento. El
1:01:04volumen de distribución suele
1:01:06aproximarse al volumen extracelular, lo
1:01:08que indica pues que es una distribución
1:01:09relativamente restringida. O sea, no es
1:01:12un medicamento que difunda rápidamente o
1:01:14pase muy bien barreras biológicas, pero
1:01:16de nuevo el efecto suele estar fuera de
1:01:18las células.
1:01:20Hm. En cuanto al metabolismo y
1:01:22eliminación, la eliminación se produce
1:01:24por degradación proteítica eh en los
1:01:27tejidos eh que en los que se une el
1:01:29receptor, pero también una parte por
1:01:31filtración renal.
1:01:33Eh, decíamos que su peso molecular eh
1:01:36dado a esto puede atravesar el glomérulo
1:01:38renal
1:01:40eh con relativa facilidad y ser
1:01:43degradada en los túbulos proximales a
1:01:46través del metabolismo peritubular.
1:01:49Eh, simultáneamente la internalización
1:01:51mediada por el receptor y la proteíolis
1:01:53lisosomal contribuyen a su eliminación.
1:01:57El tiempo de vida media de la hormona
1:01:59del crecimiento administrada por vías
1:02:00subucánea suele ser de 2 a 4 horas.
1:02:04Sin embargo, el efecto biológico
1:02:05persiste por mucho más tiempo y decíamos
1:02:07que esto se debe a este a al efecto
1:02:10indirecto o el segundo mensajero que es
1:02:12el factor de crecimiento insulinoide
1:02:13tipo uno, cuyo tiempo de vida media es
1:02:16más prolongado. Entonces existe aquí no
1:02:19hay como tal una disociación, una
1:02:21asociación directa entre el perfil
1:02:23farmacocinético con el perfil
1:02:24farmacodinámico.
1:02:27Entre otros factores, la farmacocinética
1:02:29hormona del crecimiento puede verse
1:02:30influenciada por la edad, la composición
1:02:32corporal, la obviamente la función
1:02:34renal, ya que decíamos que esta
1:02:35contribuye a su metabolismo y
1:02:37eliminación y al estado endócrino en
1:02:40general. Se ha reportado que en niños
1:02:44suele ser mayor el aclaramiento debido a
1:02:47una mayor actividad metabólica, lo que
1:02:49puede requerir ajustes de dosis. En
1:02:51pacientes con insuficiencia renal, la
1:02:53eliminación disminuye prolongando el
1:02:55tiempo de exposición.
1:03:00En cuanto a las formulaciones, ya
1:03:01habíamos mencionado que la hormonal del
1:03:03crecimiento posee regiones hidrofóbicas
1:03:05relativamente expuestas y que estas son
1:03:08parte de las que interaccionan eh con el
1:03:10receptor en las células blanco para
1:03:12ejercer un efecto. Eh, estas regiones
1:03:15hidrofóbicas pueden interaccionar entre
1:03:17sí cuando la proteína se somete a
1:03:19agitación, cambios de temperatura o
1:03:21ciclos de congelación y descongelación.
1:03:24Obviamente estas interacciones van a
1:03:26favorecer la formación de agregados
1:03:30eh agregados amorfos, además de pérdida
1:03:32de actividad biológica y aumento
1:03:34potencial de reacciones inmunogénicas.
1:03:38Eh, entonces también se menciona que
1:03:41como no es al no tener glicoscilaciones,
1:03:43pues esta ausencia de grupos hidroxilo
1:03:47eh que están presentes en las en las en
1:03:49los residuos de carbohidratos, pues no
1:03:51le van a dar protección estérica y
1:03:53solvatación adicional eh a comparación
1:03:56de eh proteínas que sí están glicosadas.
1:03:59Entonces, esto hace que la hormona de
1:04:01crecimiento sea más eh sea más inestable
1:04:03que otro tipo de proteínas.
1:04:06E entonces, pues de aquí se van a
1:04:08explicar pues algunas de las de los
1:04:11expientes eh o de las formas e de
1:04:14envasado y formulación que se utiliza en
1:04:15las eh en la en la horona de
1:04:17crecimiento.
1:04:19Eh, en cuanto a los excipientes que se
1:04:22utilizan
1:04:24son utilizarse amortiguadores, ya que la
1:04:26hormona del crecimiento presenta una
1:04:28mayor estabilidad cercano al pH neutro o
1:04:31ligeramente ácido. Por ello, vamos a ver
1:04:34que se utilizan amortiguadores como
1:04:36fosfato, citrato o isidina para mantener
1:04:38el pH en un rango donde la
1:04:41desnaturalización y la agregación sea
1:04:42mínima. Un pH inadecuado puede inducir
1:04:45desamidación de residuos sensibles, eh
1:04:49lo cual deseamos es un cambio químico
1:04:50irreversible
1:04:52y eh aumento de interacciones
1:04:54electrostáticas que pueden favorecer la
1:04:56degradación.
1:04:58Entonces, pues aquí es importante el
1:05:00control del pH en la formulación.
1:05:03Eh, para evitar dolor en el sitio de eh
1:05:06de inyección, también se utilizan
1:05:08agentes isotónicos como el cloro de
1:05:09sodio, manitologlicerol.
1:05:12Eh, también se pueden utilizar azúcares,
1:05:14azúcares o polioles como sacarosa,
1:05:17trealosa o polioles como el manitol como
1:05:21agentes estabilizantes.
1:05:23Entonces, estos van a a interactuar
1:05:25preferentemente con el agua y van a
1:05:27promover el fenómeno eh de exclusión
1:05:31preferencial para que no se deshidrate y
1:05:33desnaturalicen la proteína. Durante la
1:05:36leofilización, estos excipientes van a
1:05:38actuar como crioprotectores y
1:05:40lioprotectores.
1:05:42También tenemos surfactantes no iónicos
1:05:45porque la hormona del crecimiento puede
1:05:48abs absorberse fácilmente a superficies
1:05:51de vidrio plástico, especialmente cuando
1:05:53está en estado sólido. Eh, y hay también
1:05:56a interfaces aire líquido cuando está se
1:05:59somete a agitación rigurosa.
1:06:02Entonces, para minimizar esto eh y por
1:06:06ende también eh disminuir la agregación,
1:06:08se emplean surfactantes eh como el
1:06:10polisorbato 20 o polisorbato 80. También
1:06:14en presentaciones multidosis se pueden
1:06:15incorporar agentes antimicrobianos como
1:06:17el fenolmol. Esto es algo común en este
1:06:20tipo de de formulaciones, no es algo
1:06:22exclusivo de la insulina.
1:06:25Eh, y bueno, las formas farmacéuticas eh
1:06:28más utilizadas tenemos soluciones
1:06:30acuosas, listas para inyección, polvos
1:06:32liofilizados para reconstitución, plumas
1:06:34autoinyectables, cartuchos y sistemas y
1:06:37sistemas precargados.
1:06:40Eh, de hecho, no me no estoy segura si
1:06:43aparece aquí en la en la tabla de las
1:06:46formulaciones, pero también algo para
1:06:48prevenir
1:06:49eh o para asegurar la estabilidad de las
1:06:53formulaciones de hormonal del
1:06:54crecimiento. En algunos casos
1:06:57estas formulaciones se envasan y se
1:06:59ensayan en atmósferas de nitrógeno para
1:07:02disminuir la concentración de oxígeno y
1:07:04prevenir la oxidación de aminoácidos en
1:07:07la secuencia.
1:07:11En cuanto a las aplicaciones clínicas,
1:07:14eh la hormona del crecimiento se utiliza
1:07:17para el déficit de hormona de
1:07:18crecimiento en población pediátrica.
1:07:20Esta es la indicación más eh importante
1:07:24o la más usada de la hormona del
1:07:25crecimiento. Aquí eh como dato eh Lionel
1:07:29Messi de niño recibió hormona del
1:07:31crecimiento justamente por esta
1:07:33condición.
1:07:34Eh, esta condición de déficit de
1:07:36hormonal crecimiento puede deberse a
1:07:38alteraciones congénitas, tumores en la
1:07:40hipófisis, lesiones eh traumáticas como
1:07:43consecuencia de la radiación o por
1:07:45causas idiopáticas, causas desconocidas.
1:07:48Entonces, en en niños que tienen
1:07:50deficiencia de hormona del crecimiento,
1:07:52pues la administración exógena de la
1:07:54hormona va a restaurar los niveles
1:07:56circulantes del factor de crecimiento
1:07:57insulinoide, que recuérdense que es el
1:07:59segundo mensajero del efecto del hormón
1:08:01en el crecimiento, y va eh reactivar la
1:08:04proliferación eh de los conditos en los
1:08:07huesos largos como resultado aumentando
1:08:10la velocidad de crecimiento y mejora la
1:08:12estatura final de los niños en la edad
1:08:15en la edad adulta, ya que llegan a la
1:08:17edad adulta.
1:08:18También se puede utilizar en adultos eh
1:08:20que también presentan deficiencia del
1:08:22crecimiento.
1:08:24Eh, este déficit se asocia con un
1:08:26aumento de grasa visceral, disminución
1:08:27de la masa muscular, fatiga,
1:08:30alteraciones metabólicas y mayor riesgo
1:08:32cardiovascular. Entonces, utilizar
1:08:34hormona del crecimiento exógena puede
1:08:36mejorar la composición corporal,
1:08:38incrementar eh la cantidad de músculo,
1:08:41reducir tejido a deeposo y mejorar
1:08:42parámetros metabólicos.
1:08:45Eh, también se puede utilizar en
1:08:48síndromes genéticos y trastornos de
1:08:50crecimiento.
1:08:51Estos síndromes, perdón, estos estas
1:08:54alteraciones genéticas incluyen el
1:08:55síndrome de Turner, síndrome de Parad
1:08:58Willy, que pues eso es básicamente son
1:09:02varios tipos de nanismo
1:09:05en pacientes con infusiencia,
1:09:07insuficiencia, perdón, renal crónica,
1:09:10tanto en niños
1:09:13eh niños pequeños para para la edad
1:09:16gestacional que no presentan
1:09:17recuperación del crecimiento, eh
1:09:19etcétera.
1:09:23Eh, entre otras aplicaciones tenemos,
1:09:25por ejemplo, el síndrome de intestino
1:09:26corto o estados catabólicos severos.
1:09:28Aquí la hormona del crecimiento se ha
1:09:30utilizado para favorecer el anabolismo y
1:09:33la recuperación tisular.
1:09:38Y bueno, con respecto a los efectos
1:09:39adversos, eh estos efectos del hormonal
1:09:42del crecimiento se derivan
1:09:43principalmente de una intensificación
1:09:47excesiva de las acciones fisiológicas.
1:09:50Entre estos tenemos eh la retención eh
1:09:53retención crítica de líquidos y edema.
1:09:56Este es uno de los efectos más
1:09:57frecuentes, especialmente en adultos.
1:10:00Aquí esto se da porque la hormona de
1:10:02crecimiento favorece la reabsorción de
1:10:04sodio y agua, lo que puede provocar el
1:10:06edema periférico, es decir, la
1:10:08acumulación de líquidos en extremidades,
1:10:11aumento de peso transitorio y sensación
1:10:13de distensión.
1:10:15También tenemos artralgias y mialgias,
1:10:17es decir, eh dolor en músculo y
1:10:20articulaciones.
1:10:22El incremento de la síntesis de tejido y
1:10:24también la retención de líquidos puede
1:10:26provocar presión sobre tejido conectivo
1:10:28y articulaciones produciendo dolor. Eh,
1:10:31aunque puede ser leve, esto puede
1:10:33limitar la tolerancia al tratamiento.
1:10:35Esto va a depender de cada de cada
1:10:36paciente.
1:10:38También tenemos el síndrome de túnel
1:10:39carpiano. Esto se da porque el
1:10:41crecimiento de tejidos blandos en la
1:10:43muñeca puede comprimir el nervio mediano
1:10:46causando debilidad y parestesia. Este
1:10:49efecto es más común en adult en adultos
1:10:52tratados con dosis altas. También
1:10:54tenemos alteraciones metabólicas y
1:10:56resistencia a la insulina. Ya habíamos
1:10:58mencionado que la hormona del
1:10:59crecimiento puede tener un efecto
1:11:01antiinsulínico,
1:11:03es decir, que la hormona del crecimiento
1:11:04puede producir resistencia periférica a
1:11:06la glucosa, hiperglucemia o incluso
1:11:09desenmascarar diabetes en pacientes que
1:11:11están predispuestos.
1:11:14Eh, también tenemos hipertensión
1:11:15intraclaneal benigna. En niños se han
1:11:18descrito casos raros de aumento de la
1:11:19presión intraclaneal con dolor de
1:11:21cabeza, náuseas y alteraciones visuales.
1:11:24Eh, aunque este es un efecto eh poco
1:11:26frecuente, pero es importante porque
1:11:28requiere vigilancia médica.
1:11:30Y pues también tenemos eh la
1:11:32inmunogenicidad.
1:11:34La hormona de crecimiento recombinante
1:11:36tiene baja inmunogenicidad dado que pues
1:11:38no está glicosilada. eh no suele haber
1:11:40eh variaciones o diferencias pues por
1:11:43las plataformas de expresión y no es muy
1:11:46grande, o sea, en cuanto a tamaño, no es
1:11:49una proteína grande, pero eh pues
1:11:51decíamos que es una proteína eh
1:11:53relativamente inestable y que pues
1:11:55tiende a agregarse. Entonces, estos
1:11:56agregados eh puede inducir la formación
1:11:59de anticuerpos.
1:12:01Y bueno, en cuanto a precauciones
1:12:03clínicas, eh pues el tratamiento con la
1:12:06hormona del crecimiento debe
1:12:07individualizarse según edad, peso y
1:12:09respuesta clínica. O sea, no hay una
1:12:11dosis estándar, o sea, esto ya depende
1:12:14de cada caso y cada aplicación.
1:12:16Eh, obviamente se recomienda durante su
1:12:19administración y más a lo largo
1:12:21dependiendo de la edad en la que se
1:12:22aplique, eh, monitorizar el crecimiento,
1:12:26eh cuantificar los niveles del factor de
1:12:28crecimiento insulinoide, la glucosa, la
1:12:31función y la función tiroidea. Eh,
1:12:34también eh como dato se tiene que en
1:12:36pacientes con tumores activos o
1:12:37antecedentes oncológicos
1:12:40eh pues debe de limitarse el uso de la
1:12:42hormona del crecimiento debido a que
1:12:44tiene pues un efecto proliferativo. Esto
1:12:46sería como darle un combustible a un
1:12:48posible eh proceso neoplásico. Entonces,
1:12:50se tiene que evaluar.
1:12:55Bien, ahora vamos a hablar de otro tipo
1:12:57de medicamento biotecnológico, entre
1:12:59muchos otros que hay. Eh, yo escogí eh
1:13:02este porque es una enzima que se utiliza
1:13:04para el tratamiento de una enfermedad
1:13:06genética. eh no como tal como una
1:13:08terapia o estrategia de reemplazo, pero
1:13:10pues sí como un eh tratamiento para
1:13:13aliviar eh los síntomas de esa
1:13:15enfermedad genética, particularmente es
1:13:18para el tratamiento de la fibrosis
1:13:20quística, esta enzima se llama desoxir
1:13:22ribonucleasa.
1:13:24El nombre comercial eh del producto es
1:13:26Dorna Alfa y eh y es eh comercializada
1:13:31por la empresa Genentec, que ahora ya se
1:13:32ha fusionado con Roche.
1:13:36La desoxirribonucleasa
1:13:381 o DNA 1 es una enzima
1:13:43es una proteína monomérica de 260
1:13:46aminoácidos
1:13:49eh con un peso molecular de entre 30 y
1:13:5337 kaltons. Tampoco es una proteína muy
1:13:55grande,
1:13:57pero está glicosilada.
1:13:59La secuencia de aminoácidos incluye
1:14:01múltiples residuos cargados y polares
1:14:03que favorizan la solubilidad en medios
1:14:05acuosos. Sin embargo, también tiene
1:14:08regiones hidrofóbicas internas que
1:14:09conforman el núcleo estructural
1:14:11responsable de un plegamiento estable.
1:14:14Está compuesta por una combinación de
1:14:16hélices alfa y láminas beta organizadas
1:14:18en dominios globulares compactos con una
1:14:21cavidad bien definida donde se localiza
1:14:23el sitio activo. Además contiene varios
1:14:26puentes defuro intramoleculares que
1:14:28estabilizan la estructura
1:14:30tridimensional. Posee varios sitios de n
1:14:32glicosilación.
1:14:34Eh, aunque se ha visto que eh las
1:14:37glicosilaciones no son importantes o no
1:14:39son responsables en la en la catálisis,
1:14:42o sea, en la actividad de la enzima,
1:14:44pero aumentan eh la solubilidad de la
1:14:46proteína, protegen frente a proteisis y
1:14:48reducen la agregación y la y estabilizan
1:14:51a la proteína. Mm, estas
1:14:54glicosilaciones, además, eh pueden
1:14:55influir en el tiempo de vida media y en
1:14:57la inmunogenicidad. Entonces, aquí ya
1:14:58nos podemos dar una idea de en qué
1:15:02plataforma biológica se va a producir
1:15:03esta enzima,
1:15:05eh, que no se puede utilizar organismos
1:15:07procaliotos.
1:15:08E en cuanto seguimos hablando de la
1:15:10estructura, el sitio catalítico de la
1:15:12DNA1 contiene eh residuos que coordinan
1:15:17residuos de aminoácidos que coordinan
1:15:18iones divalentes principalmente calcio y
1:15:20magnesio. Entonces, estos iones
1:15:23van a estabilizar la conformación global
1:15:25de la proteína, van a participar
1:15:27directamente
1:15:29en la hidrólis del sustrato y pues es
1:15:32importante que estén presentes en las
1:15:33formulaciones.
1:15:38Y bueno, como el nombre del producto lo
1:15:40dice, la desoxirribonucleasa
1:15:42es una enzima que degrada ADN. Sí. Eh,
1:15:46en condiciones eh normales, el organismo
1:15:49libera constantemente ADN extracelular
1:15:51como consecuencia de procesos como
1:15:53apoptosis, necrosis o respuestas
1:15:55inflamatorias. Este material genético
1:15:58libre puede acumularse en fluidos
1:16:00biológicos como sangre, en secreciones
1:16:03respiratorias o en exudados tisulares.
1:16:06El ADN es capaz de formar redes extensas
1:16:09mediante interacciones electrostáticas y
1:16:11entrelazamiento físico, lo cual va a
1:16:13generar un incremento significativo de
1:16:15la viscosidad y el fluidos biológicos.
1:16:20Si no se elimina adecuadamente ese ADN
1:16:22extracelular, puede interferir con
1:16:24procesos fisiológicos normales,
1:16:25favorecer la inflamación o dificultar la
1:16:28[carraspeo] eliminación de secreciones.
1:16:31Esto eh decíamos que el DNA1 se aplica
1:16:35para el tratamiento de la fibrosis
1:16:37quística y esa es justamente la razón
1:16:38por la que se aplica. La fibrosis
1:16:40quística es una enfermedad autosómica
1:16:42recesiva causada por mutaciones en el
1:16:45gen CFTR, que va a alterar los
1:16:48transportadores de cloruro y sodio en
1:16:51los epitelios. Como consecuencia, los
1:16:54pacientes con fibrosisquística producen
1:16:57secreciones respiratorias más espesas.
1:17:00Eh, existe inflamación crónica e
1:17:02infecciones bacterianas recurrentes que
1:17:04van a generar infiltración masiva de
1:17:06neutrófilos y hasta aquí se vuelve pues
1:17:09un círculo vicioso. Cuando los
1:17:11neutrófilos eh mueren en estos eh
1:17:16en estos fluidos, van a liberar a su vez
1:17:20grandes cantidades de ADN y van a formar
1:17:23una red que va a incrementar todavía más
1:17:25lael la viscosidad del moco.
1:17:28Entonces, o sea, si bien la DNA 1 no es
1:17:33un tratamiento para curar la fibrosis
1:17:37quística, pues ayuda como un agente
1:17:39muolítico, va a ayudar a e
1:17:45a reducir la severidad de estos
1:17:46síntomas.
1:17:48Eh, aquí por ejemplo la DNA1 se
1:17:51administra eh de manera h creo que el
1:17:54término correcto es tópico, pero es
1:17:56tópico refiriéndose a inicituía
1:18:00inhalatoria porque justamente grand gran
1:18:03parte de las complicaciones en los
1:18:04pacientes con fibrosis crística eh pues
1:18:07es acumulación excesiva de con las vías
1:18:09respiratorias.
1:18:10Entonces, la ADNASA fragmenta estas
1:18:13cadenas de ADN y van a disminuir la
1:18:15viscoelasticidad del esputo, ¿no?, de
1:18:17las secreciones.
1:18:19Esto se va a traducir a nivel clínico
1:18:21como una mejoría de la función pulmonar,
1:18:24reducción de eh las extiones infecciosas
1:18:27y menor necesidad de hospitalizaciones.
1:18:30Entonces decíamos, como tal, la el
1:18:32tratamiento con DNA no cura la fibrosis
1:18:34quítica, pero mejora la calidad de vida
1:18:36de los pacientes.
1:18:39[tos]
1:18:39[carraspeo] E
1:18:45y permítanme, entonces el mecanismo de
1:18:48acción del ADNAS es estrictamente
1:18:50catalítico, es decir, son enzimas y
1:18:52depende de la interacción directa con el
1:18:54sustrato que va a ser el ADN
1:18:55extracelular que va a estar exacervado
1:18:57en pacientes con fibrosis quística.
1:18:59Entonces, esto implica que aquí no hay
1:19:01receptores, segundos mensajeros,
1:19:03cascadas de señalización intracelular.
1:19:05Eh, pues el efecto pues es ahí en el
1:19:07sitio donde se aplica.
1:19:09Eh, particularmente la enzima reconoce
1:19:11el ADN bicatenario mediante
1:19:13interacciones electrostáticas y
1:19:15estructurales entre su superficie
1:19:18cargada positivamente y el esqueleto
1:19:20negativo fosfato del ADN.
1:19:23Eh, y bueno, pues en cuanto a la
1:19:26catálisis, eh, la orientación del ADN
1:19:29dentro del sitio catalítico posiciona un
1:19:31enlace fosfodiéster específico para su
1:19:33ruptura, o sea, corta a través del
1:19:35enlace fosfodiéster. Los iones
1:19:37divalentes que habíamos mencionado
1:19:39polarizan eh este enlace y facilitan el
1:19:41ataque nucleofílico del agua. Como
1:19:44resultado, pues hay una hidrólis en el
1:19:46enlace fosfodiéster que fragmenta la
1:19:47cadena de ADN en segmentos más cortos.
1:19:51Entonces, al final, el efecto biológico
1:19:53de la DNA1 eh provoca una reducción en
1:19:56la viscosidad del moco, por lo tanto se
1:19:58considera un agente eh mucolítico.
1:20:03E y bueno, como ya habíamos mencionado
1:20:05también eh la DNA1 contiene varios
1:20:08enlaces de sulfuro intramoleculares cuya
1:20:10formación requiere de un ambiente
1:20:12oxidante y la acción de chaperonas
1:20:13especializadas.
1:20:15Además, presenta sitios de neglicación
1:20:17que contribuyen a la estabilidad,
1:20:19solubilidad y protección frente a
1:20:20proteisis. Es por esto eh pues que la
1:20:24producción en Ecoli eh se dificulta
1:20:27eh dado que el citoplasma
1:20:30eh dificulta la formación de puentes de
1:20:32sulfuro correctorrectos.
1:20:34Eh además pues la la glicosilación no
1:20:37puede reproducirse en sistemas
1:20:38procariotas.
1:20:40Eh, entonces pues aquí no, o sea, no, la
1:20:43Ecoli no es una plataforma viable.
1:20:46En este caso, eh, para la producción de
1:20:48la DNA1, la plataforma que se que se
1:20:51utiliza son las células CHO, células de
1:20:53ovario de hamster chino. Eh, en realidad
1:20:56es las células show la plataforma de
1:20:59producción dominante en la industria
1:21:00biofarmacéutica, especialmente para
1:21:02proteínas recomendantes complejas como
1:21:04las que tienen glicosilaciones, como la
1:21:07de como la DNA. Hm. Se utiliza porque
1:21:12las células cho ofrecen un buen
1:21:14equilibrio entre estabilidad genética,
1:21:17adaptabilidad en cultivo, en suspensión,
1:21:20capacidad de crecer en medios libres de
1:21:21suero y una maquinaria de glicosilación
1:21:23lo suficientemente similar a la humana
1:21:26como para producir glicoproteínas
1:21:28funcionales con bajo riesgo
1:21:30inmunogénico.
1:21:32Y bueno, la estrategia de producción
1:21:35para la DNA1 en las células show
1:21:37consiste en diseñar una construcción con
1:21:40un peptido señal de secreción, de modo
1:21:41que la proteína se secrete al medio
1:21:43extracelular para eh que sea más
1:21:47fácilmente recuperable del sobrenadante.
1:21:49Aquí se evita de esta manera se evita la
1:21:51lisis celular y se se reduce la carga de
1:21:54impurezas intracelulares.
1:22:00Entonces, con respecto a las propiedades
1:22:02farmacocinéticas, la DNA1 se administra
1:22:05por vía inhalatoria mediante
1:22:07nebulización, dado que eh, o sea, lo que
1:22:10se quiere aquí es generar aerosoles de
1:22:13partículas con un diámetro adecuado para
1:22:15alcanzar las vías respiratorias
1:22:17inferiores en los pulmones, ¿no? La
1:22:19eficiencia terapéutica
1:22:22va a depender en gran medida de la
1:22:23deposición pulmonar, la cual va a estar
1:22:26influida por el tamaño de la partícula
1:22:27que se nebuliza, el patrón respiratorio
1:22:30del paciente y el dispositivo que se
1:22:32utiliza. Entonces, aquí, por ejemplo, la
1:22:34eh los dispositivos de nebulización pues
1:22:37van a influir pues en gran parte en el
1:22:39efecto. Una vez que se deposita en los
1:22:42bronquios, eh la enzima pues va a
1:22:44degradar el moco que recubre el epitelio
1:22:47respiratorio. Sí.
1:22:50Eh, entonces hm en cuanto a las
1:22:53formulaciones, la DNA se presenta como
1:22:56una solución estéril para lista para
1:22:59neubularización en ampollas monodosis.
1:23:01La formulación es relativamente
1:23:03sencilla, va a contener agua para
1:23:05inyección, cloro de sodio eh para
1:23:08mantener la isotonicidad, cloruro de
1:23:10calcio como un excipiente crítico,
1:23:12porque hemos dicho que eh el calcio pues
1:23:14actúa como un cofactor, un agente
1:23:16estabilizante de la conformación de la
1:23:17enzima y participa en la actividad
1:23:19catalítica. Entonces tiene que estar
1:23:21presente en la formulación.
1:23:24Hm. No se emplean conservadores
1:23:26antimicrobianos agresivos ni
1:23:27surfactantes en concentraciones elevadas
1:23:29porque estos podían afectar la actividad
1:23:31enzimática e irritar la mucosa
1:23:34respiratoria.
1:23:35El pH es APH fisiológico.
1:23:39Y bueno, eh sobre la absorción,
1:23:43la absorción del ADN asa eh por
1:23:45administración pulmonar o respiratoria
1:23:48es mínima. la mayor parte de la proteína
1:23:51permanece en el tracto respiratorio y
1:23:53ahí es donde actúa localmente. Entonces,
1:23:54aquí toda esta cuestión de la e pues de
1:23:57la farmacocinética pues no es tan
1:23:59relevante. Sin embargo, una fracción
1:24:02pequeña sí puede atravesar el epitelio
1:24:03pulmonar hacia la circulación.
1:24:06Eh, sin embargo, eh, debido a su tamaño
1:24:09eh pues el paso es es limitado.
1:24:14Eh, la pequeña fracción que pudiera
1:24:16llegar a sangre es rápidamente degradada
1:24:18por proteas en el plasma, en la sangre o
1:24:21ya sea eliminada por mecanismos
1:24:22generales de catabolismo eh proteico. El
1:24:26tiempo de vida media es corta,
1:24:27generalmente del rango de minutos a
1:24:29pocas horas. de nuevo, porque pues la
1:24:32absorción aquí no es no es tan
1:24:34relevante, es una administración,
1:24:35insito.
1:24:38Y la eliminación ocurre por proteas
1:24:40presentes en las secreciones,
1:24:42aquí sí ya en las secreciones
1:24:44respiratorias.
1:24:46y se presenta en menor medida
1:24:48eliminación mucosciliar, donde el moco
1:24:51es tratado, el moco tratado es
1:24:52desplazado hacia la faringe y
1:24:54posteriormente deglutido eh hacia el
1:24:57hacia el estómago, donde ahí se va a
1:24:59degradar o espectorado a través de
1:25:02esputo.
1:25:04sobre la vida media,
1:25:07aunque la enzima puede degradarse
1:25:08relativamente rápido en circulación, su
1:25:10efecto pues persiste mientras esta
1:25:12permanezca activa en el moco
1:25:14respiratorio y haya un sustrato
1:25:16disponible. Entonces, aquí pues no
1:25:17podríamos hablar de parámetros
1:25:19farmacocinéticos eh pues comunes, ¿no?
1:25:22Hm. También se ha visto que la respuesta
1:25:24del ADN asa puede variar según la carga
1:25:27pues de ADN, obviamente del sustrato en
1:25:30el esputo, el grado de inflamación, la
1:25:32técnica de nuvolización y la adherencia
1:25:34al tratamiento.
1:25:36Eh, también la farmacocinética o el
1:25:38grado de proteína que se pudiera
1:25:39absorber por vía pulmonar hacia la
1:25:41sangre se va a ver influida por el
1:25:43estado de hidratación del moco y la
1:25:44función pulmonar del paciente. Y también
1:25:46pues si estamos hablando de pacientes
1:25:48con fibrosis quística, pues es
1:25:50dependiendo de el estadio de la
1:25:52enfermedad eh pues esto puede variar,
1:25:55¿no? En cuanto a reacciones adversas,
1:25:58debido a su administración local y
1:25:59mínima absorción sistémica, los efectos
1:26:02adversos son predominantemente
1:26:03respiratorios y pues verdaderamente
1:26:06realmente leves. Los efectos más
1:26:08frecuentes incluyen irritación de la
1:26:10faringe, disfonía y tos.
1:26:13Eh, y estos estos procesos o efectos
1:26:16suelen estar relacionados más con el
1:26:17proceso eh de nebulización más que con
1:26:20la toxicidad como tal de la proteína. La
1:26:23inmunogenicidad es baja, eh lo cual
1:26:26puede atribuirse a que se trata de una
1:26:27proteína humana recombinante y a su baja
1:26:29exposición pues sistémica.
1:26:35Bien, ahora vamos a hablar de otro tipo
1:26:37de biofarmacéuticos. Eh, vamos a
1:26:39adentrarnos un poquito en las citinas o
1:26:42moléculas de sistema inmunológico,
1:26:44particularmente los interferones y las
1:26:48interleucinas.
1:26:49Eh, estas en su mayoría pues son
1:26:51proteínas pequeñas, van a ser producidas
1:26:54por células del sistema inmune,
1:26:55principalmente linfocitos,
1:26:58eh cuya función es coordinar la
1:27:02comunicación en durante respuestas
1:27:04inflamatorias antivirales y
1:27:06antitumorales. Aquí pues la aplicación
1:27:10terapéutica, los efectos adversos, pues
1:27:12van a estar eh mediados obviamente pues
1:27:14del tipo de respuesta inmunitaria que
1:27:16genere. Como ya habíamos mencionado,
1:27:19pues podemos tener dentro de esta
1:27:20familias, estas familias de citosinas de
1:27:23la misma clasificación encontrar efectos
1:27:26opuestos. Entonces, pues va a depender
1:27:28del tipo del que estemos hablando. Vamos
1:27:31a comenzar hablando de los interferones.
1:27:33Eh, estos constituyen una familia eh de
1:27:36citinas con que principalmente se
1:27:38utilizan por sus propiedades
1:27:39antivirales, antiproliferativas e
1:27:41inmunomoduladoras.
1:27:43Son proteínas relativamente pequeñas,
1:27:45ricas en hélices alfa. eh globulares,
1:27:48compactas y con superficies específicas
1:27:52diseñadas para interactuar interactuar
1:27:54con receptores de membrana específicos.
1:27:58se clasifican en tres grandes grupos,
1:28:00eh,
1:28:02y dependiendo también pues de la
1:28:04estructura y al receptor al que se unen.
1:28:07Tenemos, por ejemplo, el interferón tipo
1:28:09uno o los interferones tipo uno que
1:28:11incluyen múltiples subtipos de
1:28:13interferón alfa y una forma principal de
1:28:15interferón beta. Todos ellos comparten
1:28:18un receptor heterodimérico común
1:28:21denominado IFNAR
1:28:24o
1:28:26eh receptor de interferón alfa beta,
1:28:29¿no? Esta familia es la más utilizada
1:28:31clínicamente.
1:28:33Son eh proteínas aproximadamente de 165
1:28:37a 170 aminoácidos en un peso entre 19 22
1:28:40kaltons, algo similar al peso del
1:28:42hormona de crecimiento. contienen
1:28:44cicoélices alfa antiparalelas conectadas
1:28:46por bucles flexibles.
1:28:49Eh, el interferón beta particularmente
1:28:51puede estar glicosilado en su forma
1:28:53natural y estas glicosilaciones van a
1:28:55influir en el tiempo de vida media,
1:28:57aunque no necesariamente por la
1:28:58actividad biológica. Y esto es relevante
1:29:00porque vamos a ver en algunas
1:29:02formulaciones se podemos encontrar
1:29:04algunas formulaciones en el mercado de
1:29:06interferones o interleucinas que no
1:29:07están glicosadas que se producen en
1:29:09ecoli y que eh pues son biológicamente
1:29:12activas, pero pues tienen propiedades
1:29:14farmacocinéticas alteradas.
1:29:16Luego tenemos los de los grupos del
1:29:18interferón tipo 2, que este está
1:29:20representado principalmente por el
1:29:21interferón gama, el cual se va a unir al
1:29:24receptor eh el receptor del interferón
1:29:27gama y su función eh va a estar dada
1:29:31principalmente asociada, perdón, a la
1:29:33activación de macrófagos y como un
1:29:36potenciador de la inmunidad celular. Es
1:29:38una proteína de 143
1:29:40eh aminoácidos que forma un homodímero
1:29:43funcional.
1:29:45Eh, cada monómero contribuye a la
1:29:46formación de un complejo activo y esta
1:29:49estructura es fundamental para su
1:29:50interacción con el receptor. Luego
1:29:52tenemos los interferones tipo tres, que
1:29:55estos incluyen a los llamados
1:29:57interferones lambda, que se unen a
1:29:59receptores diferentes con una
1:30:00distribución tisular más restringida eh
1:30:03principalmente en el tejido epitelial.
1:30:05Estructuralmente pertenecen a la familia
1:30:07de las citinas tipo IL10.
1:30:11Eh, algo que vale la pena resaltar es
1:30:12que todos los interferones tienen
1:30:14capacidad de inducir señalización
1:30:16intracelular a través de receptores
1:30:18asociados a las quinaas Jack Staat, como
1:30:21ya hemos mencionado eh en el caso de la
1:30:25hormona del crecimiento.
1:30:27De manera particular, los interferones
1:30:30se cuando se unen al receptor se
1:30:32fosforilan a proteínas STAT que migran
1:30:35al núcleo y van a activar la
1:30:36transcripción de genes estimulados pues
1:30:38por el interferón.
1:30:41En cuanto a las aplicaciones clínicas,
1:30:43el interferón alfa, por mencionar
1:30:45ejemplos, eh fue ampliamente utilizado
1:30:48en el tratamiento de hepatitis virales
1:30:50crónicas, especialmente hepatitis BIC.
1:30:54Eh, su efecto terapéutico eh se basa en
1:30:57inducir un estado antiviral en
1:30:59hepatocitos, aumentando la expresión de
1:31:01proteínas que van a inhibir la
1:31:02replicación viral y va a promover la
1:31:04eliminación de las células infectadas.
1:31:07Eh, antes de la llegada de los de los
1:31:09antivirales eh de acción directa para eh
1:31:12la hepatitis, el interferón alfa
1:31:14peguilado constituía eh un una
1:31:18estrategia terapéutica eh muy importante
1:31:20para el tratamiento de la hepatitis C.
1:31:23Eh, otra aplicación del interferen alfa
1:31:26es en la oncología,
1:31:28particularmente en neoplasias
1:31:30hematológicas, eh, como, o sea,
1:31:32leucemias,
1:31:34linfomas y en algunos tumores sólidos.
1:31:38Eh, aquí su mecanismo eh se basa en
1:31:40efectos antiproliferativos y activación
1:31:43del sistema inmunológico. Se utiliza
1:31:45para la leucemia crónica, linfomas de
1:31:47bajo grado, melanomas y carcinomas
1:31:49renales.
1:31:52En estos casos, el interferón inhibe la
1:31:54proliferación celular, aumenta la
1:31:56expresión de antígenos tumorales y
1:31:57potencial la actividad citóxica de los
1:32:00linfocitos T y de las células natural
1:32:02killer.
1:32:04El interferón beta se utiliza en el
1:32:06tratamiento de la esclerosis múltiple
1:32:08remitente recurrente, donde reduce la
1:32:11frecuencia de recaídas y ralentiza la
1:32:13progresión de la enfermedad. El
1:32:15mecanismo implica la modulación de la
1:32:17respuesta inmune,
1:32:19disminuyendo la activación de los
1:32:20linfocitos autorreactivos, reduciendo,
1:32:22por ende, la migración de células
1:32:23inflamatorias al sistema nervioso
1:32:25central. También va a inducir un perfil
1:32:28de citinas antiinflamatorio.
1:32:31Luego tenemos al interferón gama.
1:32:34que tiene aplicaciones más específicas,
1:32:36principalmente en efectos
1:32:40defectos en la inmunidad celular. Por
1:32:43ejemplo, la enfermedad granulomatosa
1:32:45crónica, donde existe una alteración en
1:32:47la capacidad de las células fagocíticas
1:32:49para generar especies reactivas de
1:32:51oxígeno. En estos pacientes, el
1:32:53interferón gama potencia la actividad
1:32:55microbicida de los macrófagos y mejora
1:32:57la defensa contra infecciones
1:32:59bacterianas y fungicas recurrentes.
1:33:02Eh, entonces, pues podemos ver que el
1:33:04panorama terapéutico del uso de los
1:33:06interferones ha cambiado con el tiempo.
1:33:10Actualmente pues han salido otros
1:33:13medicamentos, por ejemplo, fármacos
1:33:14antivirales, este, o terapias más
1:33:17específicas que sean mejor toleradas,
1:33:19pues han ido desplazando al uso de estos
1:33:21interferones. Sin embargo, su relevancia
1:33:23pues todavía es eh es relevante, siguen
1:33:26utilizándose eh en contextos muy
1:33:29específicos. ¿Por qué ha ido
1:33:31disminuyendo su uso? Principalmente por
1:33:33sus efectos adversos, no suelen ser muy
1:33:35bien tolerados. Eh, se pueden presentar
1:33:38síndomes pseudogripales. Esto esto
1:33:40incluye fiebre, mialgia, cefalea, fatiga
1:33:42y escalofríos. Esto se asocia con la
1:33:45inducción de citinas proinflamatorias
1:33:47como la interlucina 6 y el TNF alza.
1:33:50Fatiga intensa.
1:33:53Eh, esto es un efecto eh pues importante
1:33:56en terapias prolongadas dado que puede
1:33:58impactar eh la calidad de vida de los
1:34:00pacientes, pues es una factiga extrema,
1:34:02pues no permite una vida funcional.
1:34:05También se ha reportado alteraciones
1:34:06neuropsiquiátricas,
1:34:08eh incluso se ha asociado con eh con
1:34:12ideas suicidas, depresión,
1:34:16hay mielosupresión, disfunción tiroidea,
1:34:18hepatotoxicidad y reacciones
1:34:19autoinmunes. Entonces eh aquí el detalle
1:34:24con los interferones y también con las
1:34:26interleucinas es que eh pues no son tan
1:34:29selectivos los efectos o las
1:34:31aplicaciones. Entonces, pues los efectos
1:34:33secundarios pues sí son muy
1:34:34generalizados y por eso no son tan
1:34:36tolerados.
1:34:39Por otro lado, las interleucinas
1:34:41constituyen una familia eh amplia y
1:34:44estructuralmente diversa de citosinas,
1:34:46cuya función principal es regular la
1:34:48comunicación en las entre las células
1:34:50del sistema inmune. Estas eh abarcan más
1:34:54de 40 moléculas con arquitecturas
1:34:56moleculares variadas, funciones
1:34:59inmunológicas especializadas.
1:35:02Eh, las interleucinas se agrupan según
1:35:04su papel en la respuesta inmune,
1:35:06incluyendo interlousinas
1:35:07proinflamatorias,
1:35:09reguladoras del crecimiento
1:35:10linfocitario, antiinflamatorias y
1:35:13moduladoras de las respuestas
1:35:15específicas de los linfocitos T
1:35:17cooperadores.
1:35:19Eh, desde el punto de vista estructural
1:35:21se clasifican en citinas eh del tipo de
1:35:25as de cuatro hélices alfa.
1:35:27Estas comparten un plegamiento donde
1:35:29cuatro hélices alfa largas se organizan
1:35:32en un paquete compacto estabilizado por
1:35:34interacciones hidrofóbicas internas.
1:35:37Suelen ser relativamente pequeñas, entre
1:35:3915 a 20 kilaltons e interactúan con
1:35:42receptores multicomponente donde cada
1:35:44subunidad contribuye a la afinidad y
1:35:47especificidad de la señalización.
1:35:50Dentro de esta familia eh tenemos la
1:35:52interluina 2 4 7 9 15 y 21.
1:35:58E igual y si quieren pues revisar
1:36:00detalles de este tipo de intelucinas
1:36:02pueden regresar eh al video de eh
1:36:06reacciones de inmunogenicidad donde
1:36:08hablamos de los tipos eh de elementos de
1:36:10la respuesta inmune. Eh hay una tablita
1:36:12ahí donde se describen las funciones de
1:36:14diversas interlucinas y también de
1:36:15interferones.
1:36:17También tenemos las interlucinas tipo
1:36:19interlousina uno que estas están
1:36:22caracterizadas por en estructura con
1:36:25barriles beta caracterizados por láminas
1:36:28beta organizadas en una arquitectura
1:36:30simétrica.
1:36:31eh suelen presentar estabilidad térmica
1:36:33y susceptibilidad a proteisis y muchas
1:36:36interleucinas de este de esta familia
1:36:38requieren procesamiento proteolítico
1:36:40para activarse como la interlousina 1
1:36:43beta. Luego tenemos las interlousinas
1:36:46parecidas a la interlousina 6 que
1:36:48incluyen obviamente la interlucina 6, la
1:36:51interlucina 11 y otras citosinas con
1:36:53funciones hematopoyéticas o
1:36:55inflamatorias.
1:36:57Suelen ser glicoproteínas con estructura
1:36:59predominantemente de alfa hélice, pero
1:37:02con características distintas a las de
1:37:05el eh las del primer tipo de cuatro
1:37:07hélices.
1:37:09Aquí son proteínas glicosiladas en las
1:37:11cuales la la glicosilación es necesaria
1:37:14para la estabilidad y la actividad
1:37:16biológica.
1:37:19Eh, tenemos también las interleucinas
1:37:20heterodiméricas, que como su nombre lo
1:37:22dice, pues van a presentar eh dimeros de
1:37:25diferentes eh monómeros, entre las
1:37:28cuales se incluye la heterlusina 12 e
1:37:31interlucina 23, que son heterodímeros
1:37:34formados por dos cadenas distintas
1:37:36unidas no covalentemente mediante
1:37:37pantesis sulfuro. Su expresión va a
1:37:40requerir eh la expresión de células de
1:37:42mamífico, que también están glicosadas.
1:37:45Luego tenemos las familias de la
1:37:47interlucina tipo interlucina 17. Estas
1:37:51también forman dímeros y tienen
1:37:52funciones en inflamación crónica y la
1:37:55autoinmunidad como tal. Eh, bueno, no se
1:37:58utilizan como interlucinas terapéuticas,
1:38:00pero han sido eh este tipo interlucinas
1:38:03dentro de este grupo han sido blanco de
1:38:06anticuerpos eh monoclonanes, a ese sí,
1:38:08para aplicaciones terapéuticas.
1:38:10Entonces, aquí podemos decir que eh esta
1:38:11última familia de de inter de
1:38:15interleucinas pues están asociadas en
1:38:17procesos patológicos.
1:38:19Eh, entonces las interleucinas actúan
1:38:22con receptores específicos en la
1:38:24superficie celular.
1:38:26Eh, muchas utilizan, receptores
1:38:28multicomponente, donde diferentes
1:38:30cadenas receptoras van a modular la
1:38:32afinidad y la especificidad.
1:38:34En cuanto a las aplicaciones clínicas,
1:38:37eh, por ejemplo, la interleucina 2 eh al
1:38:41que se le llama aldesleuquina, es una
1:38:44proteína de 15 kaltons
1:38:46que forma parte de la familia de
1:38:48citosinas de as de cuatro hélices alfa y
1:38:50su función es estimular la proliferación
1:38:52y expansión clonal de los linfocitos de
1:38:55activados, así como potenciar la
1:38:56actividad de las células NK.
1:38:59Eh, esta fue una de las primeras, la
1:39:01interluina dos, una de las primeras
1:39:03inmunoterapias aproveadas aprobadas,
1:39:05perdón, para el tratamiento del cáncer,
1:39:07particularmente del melanoma metastásico
1:39:10y el carcinoma de células renales.
1:39:13Eh, sin embargo, el uso clínico de
1:39:15interleucina 2 a altas dosis está
1:39:17limitado por eh por su toxicidad.
1:39:20Últimamente la interlucinado se se ha
1:39:22utilizado como ayubante en terapias
1:39:24celulares como la transferencia adoptiva
1:39:26de linfocitos T o en la terapia de
1:39:28células carte.
1:39:31Eh, entonces en estos contextos, en este
1:39:33tipo de terapias, la interlocina se
1:39:35emplea para favorecer la expansión y
1:39:38supervivencia de las células inmunes
1:39:41administradas, por ejemplo, las células
1:39:42CART.
1:39:44Eh, luego la interlucina 11, eh
1:39:48recombinante se ha utilizado para
1:39:49prevenir la trombocitosenia
1:39:51trombocitopenia inducida por la
1:39:53quimioterapia, ya que estimulan la
1:39:56producción de megacariocitos y
1:39:57plaquetas.
1:39:59Eh, sin embargo, su uso ha disminuido
1:40:01debido a efectos adversos y
1:40:02disponibilidad de alternativas eh más
1:40:04seguras como la trombopolyetina.
1:40:08Eh, de manera general, eh los efectos
1:40:11adversos o el perfil de seguridad de las
1:40:14interleucinas va a estar determinado por
1:40:16la capacidad que estas tengan de activar
1:40:19de manera generalizada o sistémica el
1:40:22sistema inmunológico. En general, los
1:40:25efectos adversos más comunes o perdón,
1:40:27los más intensos, eh, o sea, son más
1:40:30intensos que los observados con los eh
1:40:33interferones. Entonces, pues también su
1:40:34perfil de seguridad es eh pues es menor,
1:40:38¿no? Se puede presentar el síndrome de
1:40:41fuga capilar. Este, por ejemplo, es el
1:40:43efecto adverso más característico de la
1:40:45interlucina 2 y es una condición grave
1:40:48caracterizada por un aumento de la
1:40:50permeabilidad vascular, extravaxación de
1:40:52líquidos y edema generalizado.
1:40:55Este este fenómeno puede producir
1:40:57hipertensión, insuficiencia renal, edema
1:40:59pulmonar y disfunción multiorgánica en
1:41:01casos severos. es un es un cuadro
1:41:03bastante bastante severo. También se
1:41:05puede presentar toxicidad cardiovascular
1:41:08debido a la vasodilatación sistémica y
1:41:10al desplazamiento de fluidos. Aquí, al
1:41:13contrario, puede presentarse
1:41:14hipotensión, taquicardia y en casos
1:41:16graves, eh un choque,
1:41:19o sea, choque cardíaco.
1:41:22Pueden también presentarse síntomas
1:41:23inflamatorios como fiebres, calofríos,
1:41:25malestar general, náuseas y vómitos.
1:41:29Estos eh síntomas inflamatorios son
1:41:31bastante frecuentes
1:41:33y eh pues son un reflejo de la
1:41:36liberación secundaria de citinas
1:41:38preinflamatorias inducidas por las
1:41:39interlucinas terapéuticas. Y esto de
1:41:42hecho lo describen algo similar como a
1:41:44una tormenta de citocinas eh moderada.
1:41:47Recordemos que una de las complicaciones
1:41:49que se presentaba con el COVID es
1:41:50justamente esta tormenta de citosinas,
1:41:52que a veces el problema no era la
1:41:54enfermedad viral, sino eh pues el efecto
1:41:57exacervado del sistema inmune.
1:42:00E también puede presentarse toxicidad
1:42:02pulmonar como disnea, infiltrados eh
1:42:06celulares a los pulmones, edema,
1:42:09eh en parte como consecuencia del
1:42:10síndrome de fuga capilar.
1:42:13E de manera particular la interlucina 2
1:42:17también se ha reportado que puede
1:42:18inducir eh alteraciones hematológicas
1:42:21como citenias, citopenias, perdón,
1:42:24leves, o sea, alterar eh la cuenta de
1:42:28glóbulos blancos, alteraciones hepáticas
1:42:30como elevación de transaminazas y
1:42:32alteraciones metabólicas.
1:42:35Eh, por otro lado, en la citerlucina se
1:42:37ha reportado neurotoxicidad.
1:42:39Eh, en algunos pacientes hay confusión,
1:42:42somnolencia o alteraciones cognitivas
1:42:45transitorias. Entonces, aquí pues
1:42:46podemos ver que tanto pues los
1:42:48interferones y las interlucinas eh pues
1:42:52el problema son los efectos secundarios
1:42:54y que pues no son tan específicos con
1:42:56los tratamientos.
1:43:02Muchos interferones y varias
1:43:03interleucinas eh habíamos mencionado que
1:43:05son proteínas eh no glicosiladas.
1:43:09complegamiento compacto dominado por el
1:43:11ICES alfa. Eh, en el caso de estas
1:43:15particulares, estas interlucinas
1:43:17interferones particulares, pues se
1:43:19pueden producir en sistemas bacterianos
1:43:21como eh como ecoli. Aquí, por ejemplo,
1:43:24en la figura eh se muestra eh la
1:43:26estrategia [resoplido] eh downstream de
1:43:29purificación del interferón eh del
1:43:31interferón beta producido en el coli.
1:43:39Algo que vale la pena resaltar,
1:43:42eh, y de hecho,
1:43:45eh, que es lo que se muestra aquí en la
1:43:47figura, es que muchas interluinas
1:43:50interferones producidas en el coli
1:43:51suelen acumularse en cuerpos de
1:43:53inclusión, que recordemos que son
1:43:55agregados insolubles que contienen eh
1:43:57proteínas eh parcialmente plegadas.
1:44:00Eh, en estos casos, pues el
1:44:02procesamiento downstream implica el uso
1:44:04de pasos de solubilización y
1:44:07replegamiento para recuperar la
1:44:09conformación activa de la proteína.
1:44:12Eh, particularmente en los sistemas
1:44:13bacterianos las construcciones suelen
1:44:15incluir promotores fuertes, codones
1:44:18optimizados a bacterias y señales para
1:44:20maximizar la acumulación proteica.
1:44:24En algunos casos se han explorado
1:44:26sistemas de expresión como en levaduras
1:44:28como pique pastoris, eh la cual ofrece
1:44:31una alternativa eh intermedia entre
1:44:35bacterias y células de mamífer, dado que
1:44:37las levaduras pueden realizar ciertas
1:44:39modificaciones postraduccionales y
1:44:41secretar proteínas al medio, lo que va a
1:44:43simplificar el proceso de purificación.
1:44:47Sin embargo, ya también hemos mencionado
1:44:48que las glicosilaciones en levadura
1:44:50suelen diferas,
1:44:53generando eh glicanos altos ricos en
1:44:56manosa, que pueden generar
1:44:57inmunogenicidad.
1:45:00E también eh cuando la glicosilación es
1:45:03importante para la estabilidad,
1:45:05actividad biológica o farmacocinética de
1:45:08la de las citinas, se recurría a
1:45:10plataformas de mamífero. En el caso del
1:45:12interferón eh beta,
1:45:15eh
1:45:17pues se puede producir tanto en ecoli
1:45:20como en células de mamífero. Cuando se
1:45:22presenta eh en ecoli, pues aquí lo que
1:45:25pasa es que la estabilidad eh se mejora.
1:45:29y se reduce la agregación, aunque las
1:45:31dos sean biológicamente activas.
1:45:34Por otro lado, las interleucinas
1:45:36heterodiméricas eh o glicoproteínas eh
1:45:42donde sí es importante la actividad
1:45:43biológica en las glicosaciones. También
1:45:45requieren sistemas de mamífero para
1:45:47asegurar el ensamblaje correcto y las eh
1:45:50modificaciones postraduccionales
1:45:52adecuadas.
1:45:53En estas plataformas de mamífero, las
1:45:55construcciones incluyen secuencia señal
1:45:57para secreción y selección de clonas de
1:45:59alta productividad.
1:46:02Y bueno, pasa hablando de la de las
1:46:05propiedades farmacocinéticas de las de
1:46:08las citosinas, los interferones de
1:46:09interluina se administran principalmente
1:46:11por viant parenteral, siendo las más
1:46:14comunes la subcutánea, intramuscular e
1:46:15intravenosa.
1:46:17la administración subcutánea o
1:46:19intramuscular, la absorción
1:46:21particularmente ocurre a través del
1:46:23sistema linfático y también a través de
1:46:25capilares locales. Debido a su tamaño
1:46:28relativamente pequeño, que hacemos
1:46:30aproximadamente de 20 kaltons, eh estas
1:46:34citinas pueden difundirse fácilmente a
1:46:36la circulación.
1:46:38La biodisponibilidad subcutánea suele
1:46:40ser moderada y verse afectada
1:46:44por factores como la perfusión tisular,
1:46:46la estabilidad local, degradación
1:46:49proteolítica en el sitio de inyección.
1:46:53Con respecto a la distribución, una vez
1:46:55en la circulación, los interferones
1:46:57interlucinas presentan un volumen de
1:46:59distribución eh relativamente bajo
1:47:03eh cercano al espacio extracelular.
1:47:06Debido a su naturaleza hidrofílica y
1:47:08ausencia de dominios lipofílicos, no
1:47:10atraviesan fácilmente membranas
1:47:11celulares por difusión pasiva. Eh,
1:47:15además, pues deseamos que los efectos
1:47:17van a estar mediados por interacciones
1:47:19con receptores eh celulares en la
1:47:21membrana celular.
1:47:23H las citosinas
1:47:25tienden a eh a concentrarse en tejidos
1:47:28ricos en células inmunes
1:47:31eh como el hígado, vaso y médula osea.
1:47:36En cuanto al metabolismo y eliminación,
1:47:38la unión a los receptores en los que
1:47:40ejercen las células inmunológicas puede
1:47:42inducir internalización por endocitosis
1:47:45y degradación en lisosomas, lo cual se
1:47:47conoce como aclaramiento mediado por el
1:47:49receptor.
1:47:52La magnitud de este proceso
1:47:55depende de la densidad de los receptores
1:47:56y del estado inmunológico del paciente,
1:47:58o sea, del número de células pues con
1:48:00las que pueda
1:48:02interaccionar las citinas y la cantidad
1:48:04de receptores que estén expresando. En
1:48:06situaciones de inflamación o activación
1:48:08inmune, la expresión de receptores puede
1:48:10aumentar, por lo tanto, modificando la
1:48:12farmacocinética.
1:48:15Las citosinas no modificadas presentan
1:48:17tiempos de vida media relativamente
1:48:19cortos, de minutos a pocas horas.
1:48:22Eh, el aclaramiento de este tipo de
1:48:24moléculas eh ocurre principalmente por
1:48:27filtración glomerular. Aquí también son
1:48:29moléculas eh pequeñas. Eh, entonces
1:48:32pueden pasar por el glomérulo,
1:48:33reabsorberse
1:48:35por las células peritubulares y que
1:48:38ocurra ahí eh la la degradación
1:48:42proteítica en estas células, en los
1:48:43túbulos renales.
1:48:45Eh, la degradación proteítica en plasma
1:48:47y tejidos va a ocurrir por acción de
1:48:49proteas extracelulares y endocíticas.
1:48:55Entonces, en cuanto a las formulaciones,
1:48:57eh pues decíamos que se van a
1:48:58administrar principalmente por vía
1:49:00parenteral. Entonces, se formulan
1:49:01principalmente como soluciones a cosas
1:49:04inyectables o polvos liofilizados listos
1:49:06para reconstitución.
1:49:09Eh, las formulaciones eh líquida,
1:49:13perdón, listas para para uso, las
1:49:14líquidas ofrecen ventajas en términos de
1:49:17comodidad
1:49:19eh y adherencia al tratamiento, pero
1:49:22requieren eh una estabilidad adecuada en
1:49:24largo plazo. Eh, algunas formulaciones
1:49:27de interferón beta presentan se
1:49:29presentan en jeringas precargadas y
1:49:30refrigeradas.
1:49:33Eh, habrá algunos interferones que sean
1:49:35más estables y puedan eh formularse en
1:49:37soluciones líquidas eh relativamente
1:49:40estables, mientras que otras eh son más
1:49:43lábiles y requieren liofilización.
1:49:44Entonces, pues aquí e pues hay de las
1:49:47dos, ¿no? Depende de cada caso.
1:49:50Hm las citosinas suelen formularse en
1:49:52concentraciones relativamente bajas
1:49:54debido a su alta potencia biológica, o
1:49:56sea, es muy poquito lo que se necesita
1:49:58para ejercer un efecto terapéutico.
1:50:01Sin embargo, esto en la formulación
1:50:03introduce pues un reto adicional, ya que
1:50:05las proteínas diluidas son más propensas
1:50:08a la absorción en en las paredes del
1:50:11envase y por tanto a la agregación
1:50:13interfacial y pues esa agregación ya
1:50:15sabemos que puede ser inmunogénica.
1:50:19Eh,
1:50:24e en cuanto a los expientes
1:50:29eh en las formulaciones líquidas a unos
1:50:33o algunos puntos que hay que controlar
1:50:35son es el pH, que muchas citocinas se
1:50:38van a formular en rangos de pH
1:50:42ligeramente ácido a neutro, por lo
1:50:45tanto, los amortiguadores más comunes
1:50:46van a incluir sales de fosfatos,
1:50:48acetatos o isidina.
1:50:52Entre los expientes más importantes
1:50:53también se encuentran azúcares y
1:50:55polioles que actúan como estabilizantes
1:50:57estructurales. Por lo por otro lado, en
1:51:00las formulaciones liofilizadas, los
1:51:02expientes van a incluir los crío y
1:51:04lioprotectores, como sacarosa y
1:51:06trealosa, las cuales van a formar
1:51:08matrices vitreas
1:51:10que van a inmovilizar a la proteína y
1:51:12preserven su estructura durante el
1:51:13secado. También se puede utilizar eh la
1:51:16glicina en las formulaciones
1:51:18liofilizadas para mejorar la apariencia
1:51:20y la estabilidad física del producto.
1:51:25Y bueno, ya habíamos mencionado en la
1:51:27diapositiva anterior que pues una
1:51:30característica de las farmacocinética de
1:51:32las de las citinas eh no modificadas, es
1:51:36decir endógenas o bueno, similares a las
1:51:39endógenas,
1:51:40es que tienen un tiempo de vida media
1:51:42corto y un aclaramiento relativamente
1:51:44rápido por lo en el orden de minutos,
1:51:47por lo cual eh pues, o sea, esto impulsó
1:51:50el desarrollo de estrategias de
1:51:52ingeniería molecular orientada a
1:51:54prolongar su permanencia en la
1:51:55circulación y mejorar, por lo tanto, su
1:51:57perfil terapéutico. Eh, principalmente
1:52:00el uso de la pegilación, ¿no? Ya
1:52:03acuérdense que la pegilación consiste en
1:52:06la conjugación covalente de cadenas de
1:52:09polietilen glicol a la proteína
1:52:11terapéutica. El polietilen glicol, pues,
1:52:13puede ser de diferentes eh de diferentes
1:52:16tamaños. Acá, por ejemplo, en la figura
1:52:18que se muestra en la diapositiva, en los
1:52:20incisos B, C y D, podemos ver cómo
1:52:22cambia el perfil de el perfil
1:52:25fármacocinético
1:52:26eh de del mismo interferón, el
1:52:30interferón alfa, con e, o sea, con
1:52:35pegiones de diferente tamaño, de 12, 15,
1:52:38perdón, 12, 5 y 40 konsons. Entonces,
1:52:41pues es obvio eh pues el efecto, ¿no?
1:52:46Principalmente el efecto de la
1:52:47pegilación
1:52:49eh lo que hace es el aumento del tamaño
1:52:50hidrodinámico aparente de la molécula.
1:52:54eh el volumen, es decir, que el volumen
1:52:57incrementa de manera significativa y por
1:52:59ende decíamos también que las citinas eh
1:53:02podían pasar eh por filtración
1:53:03glomerular y ahí eh aclararse,
1:53:06eliminarse. Eh al aumentar eh el volumen
1:53:10ya no eh pueden pasar por filtración
1:53:13glomerular y pues esto prolonga la el
1:53:16tiempo de vida media, ¿no? Si se fijan,
1:53:18pues también el perfil de distribución
1:53:19va a ser diferente. Además, el
1:53:21polietilen glicol forma una capa
1:53:23hidrofílica que protege a la proteína,
1:53:25la proteis, dependiendo de pues del
1:53:27sitio donde se ubique y puede reducir
1:53:29interacciones no específicas con
1:53:30superficies biológicas.
1:53:32Eh, este efecto pues también disminuye
1:53:34la inmunogenicidad en algunos casos al
1:53:37en el caso dependiendo dónde se una en
1:53:40si es que está enmascarando epítopos
1:53:43proteicos que podían ser inmunogénicos.
1:53:46Hm. Sin embargo, una consecuencia de la
1:53:48apegilación es que puede reducir la
1:53:50actividad biológica específica debido a
1:53:52impedimentos estéricos, eh lo cual va a
1:53:55dificultar
1:53:57eh la interacción con los receptores.
1:53:59Entonces, pues es una cosa por otra. Hm.
1:54:02Particularmente en el interferón alfa,
1:54:04las formulaciones peguiladas permitieron
1:54:06pasar de administraciones varias veces
1:54:08por semana, como se ve en el inciso A de
1:54:10la figura, a eh administr a esquemas
1:54:13semanales. Entonces, pues esto es algo
1:54:16eh pues importante en cuanto a la el
1:54:18desarrollo de nuevos de nuevos
1:54:19medicamentos y simplemente se está
1:54:21adicionando eh un polímero a la
1:54:23estructura de la de la proteína.
1:54:29Bueno, ahora vamos a hablar de otro tipo
1:54:32de eh de otra familia, otro grupo de
1:54:34medicamentos biotecnológicos que son eh
1:54:37los factores eh de crecimiento
1:54:39hematopoyéticos.
1:54:41Eh este constituye eh un grupo de
1:54:46medicamentos biotecnológicos que actúan
1:54:49como hormonas. Algunos de estos podrem
1:54:52este podrían algunas citosinas, por
1:54:54ejemplo, también podrían considerarse
1:54:55factores de crecimiento hematopoyéticos.
1:54:58Eh, y pero pues estos tienen un objetivo
1:55:01eh muy particular que es estimular la
1:55:04hematopoyesis, o sea, regulan la
1:55:06proliferación, diferenciación y
1:55:08supervivencia de las células
1:55:11precursoras, de las células sanguíneas
1:55:13en la médula ósea. Entonces, la
1:55:16hematopoyesis es un proceso altamente
1:55:18regulado que ocurre principalmente,
1:55:21decíamos, en la médula ósea y da origen
1:55:22a todas las células sanguíneas. Esto va
1:55:25a estar controlada por una red de
1:55:27factores de crecimiento que actúan sobre
1:55:29las células madreematopoyéticas y
1:55:31progenitores comprometidos
1:55:33y van a mantener el equilibrio ante las
1:55:36demandas fisiológicas o patológicas como
1:55:38pueden ser infecciones, hemorragias o
1:55:40hipoxios. Si habrá situaciones en las
1:55:42que se requiera que incremente la
1:55:44población eh de plaquetas o de glóbulos
1:55:47blancos o de eritrocitos, glóbulos
1:55:49rojos, ¿no?
1:55:51Eh, la hematopoyesis
1:55:54se organiza en una jerarquía celular que
1:55:57inicia con las células madre
1:55:58hematopoyéticas pluripotentes
1:56:00localizadas en las en la médula ósea.
1:56:03Estas células tienen una alta capacidad
1:56:06de autenovación
1:56:08y de diferenciarse en todos los linajes.
1:56:10eh hematológicos, que es la primera el
1:56:13primer grupo celular que se muestra a la
1:56:15izquierda de la figura. A partir de
1:56:17estas células madres surgen progenitoris
1:56:20multipotentes que progresivamente van
1:56:22perdiendo su plasticidad y se van a
1:56:24comprometer hacia dos grandes linajes.
1:56:27Tenemos el linaje mieloide, que son las
1:56:29que aparecen como CMP, que van a dar
1:56:32lugar a eh pues a células sanguíneas
1:56:36diferentes a los linfocitos y al linaje
1:56:39mieloide. linfoide, perdón, que es el
1:56:41CLP.
1:56:43Eh,
1:56:45el linajemialoide va a dar origen a los
1:56:46eritrocitos, megacarocitos y
1:56:48eventualmente plaquetas, granulocitos
1:56:51como neutrófilos, eucinófilos, basófilos
1:56:55y monocitos y macrófagos.
1:56:57Por otro lado, el linaje linfoide va a
1:56:59generar principalmente los linfocitos B,
1:57:01los linfocitos T y las células, que
1:57:03recordemos que es un tipo de linfocito
1:57:05T.
1:57:06Eh, aquí pues cada etapa de
1:57:08diferenciación va a estar regulada por
1:57:10señales, principalmente hacemos
1:57:12citosinas y factores de crecimiento
1:57:14hematopoyéticos.
1:57:15Estos en su conjunto van a determinar la
1:57:17proliferación, supervivencia o
1:57:19diferenciación a los diferentes tipos de
1:57:21células sanguíneas.
1:57:23Eh, entonces decíamos que eh pues este
1:57:27es un sistema, el sistema hematopoyético
1:57:29es un sistema altamente reactivo. Eh,
1:57:32por ejemplo, en condiciones de hipoxia o
1:57:33bajas concentraciones de oxígeno, el
1:57:35riñón va a incrementar la producción de
1:57:38un factor de crecimiento hematopoyético,
1:57:40que es la eritropoyetina, estimulando la
1:57:42eritropoyesis y, en consecuencia
1:57:45aumentando eh la población de glóbulos
1:57:48rojos y mejorando el transporte de
1:57:49oxígeno.
1:57:52Durante infecciones bacterianas, por
1:57:53ejemplo, se incrementa la producción de
1:57:56el factor de crecimiento de
1:57:58granulocitos, favoreciendo la
1:58:01neutrofilia, la formación de
1:58:02neutrófilos.
1:58:04En cuanto a las aplicaciones eh
1:58:07clínicas del control de eh de la
1:58:09hematopoyesis, una de las aplicaciones
1:58:11más importantes es para el tratamiento
1:58:14de la anemia mediante la eritropolyetina
1:58:16recominante. Esto, por ejemplo, es
1:58:18particularmente importante para
1:58:20pacientes que presentan enfermedad renal
1:58:22clónica. Es algo que a mí siempre se me
1:58:23ha hecho muy interesante que el riñón
1:58:26produzca una una hormona que estimula la
1:58:30producción de glóbulos rojos en la
1:58:31médula ósea. Pero entonces eh pues aquí
1:58:34en consecuencia si no funciona bien el
1:58:36riñón, hay diferencia de eritropoyetina
1:58:38y entonces va a haber eh va a haber a va
1:58:41a haber anemia, ¿no? Eh también el uso
1:58:44de factores estimulantes de colonias
1:58:46granulocíticas.
1:58:48Eh, aquí por ejemplo este eh su
1:58:51producción a nivel eh biotecnológico
1:58:53revoluciona el manejo de la neutropenia
1:58:55inducida por la quimioterapia.
1:58:58La neutropenia severa es un factor
1:59:00limitante importante en la oncología.
1:59:03Eh, o sea, es una consecuencia de la
1:59:06radio y la quimioterapia en pacientes
1:59:07con cáncer que, o sea, en consecuencia
1:59:10disminuye la cuenta de eh de glóbulos
1:59:12blancos, lo cual aumenta el riesgo a el
1:59:15riesgo de infecciones potencialmente eh
1:59:17mortales
1:59:19tras un trasplante de médula ósea o
1:59:22trasplante de, o sea, usualmente este
1:59:23tipo de pacientes requieren un
1:59:25trasplante de médula ósea, un trasplante
1:59:26de células hematopoyéticas en las cuales
1:59:29la recuperación de las células
1:59:30sanguíneas es lenta. Por lo tanto, el
1:59:32uso de los factores de crecimiento
1:59:34hematopoyético aceleran la
1:59:35reconstitución de las células
1:59:37sanguíneas. O sea, no es que se utilicen
1:59:38para curar el cáncer, sino para tratar
1:59:40de eh contrarrestar los efectos
1:59:43secundarios de la quimia y la
1:59:44radioterapia.
1:59:47Eh, y bueno, la mayoría de los factores
1:59:49de crecimiento
1:59:50pertenecen a la familia de las citinas
1:59:52de clase uno. Eh, están caracterizadas
1:59:56por un eh plegamiento dominado por
1:59:58hélices alfa en un núcleo compacto
2:00:00estabilizado por interacciones
2:00:02hidrofóbicas internas y puentes de
2:00:03sulfuro.
2:00:06Este tipo de plegamiento lo tiene
2:00:08laitropolyetina, el factor de
2:00:11estimulante de colonias de granulocitos
2:00:14y de macrófagos,
2:00:15incluso interleucinas.
2:00:18El tamaño eh el tamaño molecular de este
2:00:21tipo de factores de crecimiento suele
2:00:23están entre 18 y 35 kaltons.
2:00:26Eh, pero eh en cuanto a la cadena
2:00:29peptídrica, la mayoría de estos factores
2:00:30de crecimiento eh pues están
2:00:33glicosilados. Entonces, pues también eso
2:00:34cambia el peso molecular.
2:00:37M
2:00:40eh, por ejemplo, en la eritropolyetina,
2:00:42las glicosilaciones van a dar
2:00:43estabilidad, solubilidad e influir en el
2:00:45tiempo de vida media. En el factor
2:00:47estimulante de colonias granulocíticas
2:00:50es importante para la actividad
2:00:51biológica.
2:00:54Eh,
2:00:57en general,
2:00:59el mecanismo de acción de los factores
2:01:01de crecimiento hematopoyético va a
2:01:02depender de su interacción con
2:01:04receptores específicos localizados en la
2:01:06superficie de células progenitoras en la
2:01:08médula, o sea, al igual que las
2:01:09citosinas o el hormona del crecimiento,
2:01:12todas las los ejemplos que hemos visto,
2:01:14excepción de la DNAs, ¿no? Estos
2:01:16receptores, particularmente los del
2:01:17crecimiento matopoyético, pertenecen a
2:01:21la familia de receptores de citinas tipo
2:01:231 oanusquinasa, o sea, las Jack, las
2:01:26Jack Staat, las cuales pues activan
2:01:30rutas intracelulares como MAPK, eh la
2:01:35Vía PI3K, AKT, eh que están relacionadas
2:01:39con la proliferación celular,
2:01:40supervivencia y el metabolismo.
2:01:43Entonces, la activación combinada de
2:01:45todas estas rutas generan una respuesta,
2:01:47deamos, de expansión celular de las
2:01:49células progenitoras, inhibición de
2:01:51apoptosis, por lo tanto, aumento de la
2:01:53supervivencia y promoción de
2:01:56diferenciación específica a ciertos
2:01:57linajes o tipos celulares.
2:02:00E
2:02:02aquí, por ejemplo, se ha visto que la
2:02:05especificidad de los factores
2:02:06hematopoyéticos,
2:02:08más que de verse a diferencias en los
2:02:11mecanismos en cómo actúan, más bien el
2:02:14el que el cómo van a definir
2:02:17que se vaya que una diferenciación se
2:02:19vaya hacia un tipo celular hacia otro
2:02:21tiene que ver con la expresión
2:02:22diferencial de los receptores de los
2:02:24receptores en distintos estadios de la
2:02:27maduración celular. O sea, esos
2:02:28receptores van cambiando conforme se va
2:02:30van madurando las células.
2:02:34Eh, entonces, pues dentro de los
2:02:35factores de crecimiento
2:02:37hematopoyético eh que se utilizan en en
2:02:41la terapia, pues tenemos, yo creo que
2:02:43los más importantes son la
2:02:44eritropoyetina y los factores el factor
2:02:46estimulante de de colonias de
2:02:48granulocitos, pero también tenemos los
2:02:50que estimulan a monocitos macrófagos eh
2:02:54y a la trombopoyetina
2:02:57que se estimula la formación de
2:02:58plaquetas. Aquí también te quisiera yo
2:03:01mencionar que hay otros factores eh de
2:03:03crecimiento celular, no necesariamente
2:03:05matopoyéticos, que también se pueden
2:03:06utilizar en la terapéutica. Eh, por
2:03:09ejemplo, hm, factores de crecimiento de
2:03:11fibroblastos o eh factores de
2:03:15crecimiento de keratinocitos, que eso se
2:03:17utilizan, por ejemplo, para favorecer la
2:03:18cicatrización o reparación de úlceras,
2:03:21por ejemplo, en el tratamiento del pie
2:03:23diabético.
2:03:28Y bien, hablemos primero de eh la
2:03:30eritropoyetina como uno de los factores
2:03:32de crecimiento hematopoyético pues más
2:03:34aplicados en la terapéutica. Esta es una
2:03:37glicoproteína de 165 aminoácidos con un
2:03:40peso molecular de 30 34 kaltons. Está en
2:03:43su eh tiene tres sitios de glicosilación
2:03:46y un sitio de de n glicosilación y un
2:03:48sitio de o glicoscilación.
2:03:50Eh, aquí, por ejemplo, se ha reportado
2:03:52que los carbohidratos representan
2:03:54aproximadamente 40% del peso molecular
2:03:58eh total de la de la eritropolyetina,
2:04:01por lo tanto eh pues necesita producirse
2:04:05en células en células de mamífero,
2:04:08plataformas de mamífero.
2:04:10Se ha visto que la eliminación o
2:04:12reducción de las glicosilaciones no
2:04:14afecta significativamente la afinidad
2:04:16por los receptores, o sea, no afecta la
2:04:17actividad biológica, pero sí reduce este
2:04:21drásticamente su tiempo de vida media.
2:04:24Entonces, o sea, sí tiene un efecto
2:04:26significativo en el tiempo del efecto.
2:04:28Entonces, pues de aquí se que se opte
2:04:29primero por eh plataformas de mamífero.
2:04:33En cuanto la función fisiológica, esta
2:04:36es producida, decíamos, principalmente
2:04:38por las células de riñón, las células
2:04:40peritubulares,
2:04:43en respuesta a la hipoxia. Su función es
2:04:46estimular la eritropoyesis promoviendo
2:04:48la proliferación, diferenciación y
2:04:50supervivencia de los progenitores
2:04:52eritroides en la médula ósea. Como
2:04:54consecuencia, hay un aumento de la
2:04:56producción de los eritrocitos maduros,
2:04:58lo que eleva la cantidad de hemoglobina
2:05:00y por lo tanto la capacidad de
2:05:02transporte de oxígeno.
2:05:04Las aplicaciones clínicas, la más
2:05:06importante es para la anemia asociada a
2:05:09la enfermedad renal crónica. En estos
2:05:11pacientes el daño a los riñones va a
2:05:13reducir la producción fisiológica de la
2:05:15eritropolyetina, generando una anemia
2:05:17normocítica, normocrómica. Es decir, que
2:05:20los glóbulos rojos, o sea, hay pocos,
2:05:22pero los que hay eh pues son normales.
2:05:25La administración de eritropellatina
2:05:27recombinante puede restaurar el
2:05:28eritropois y reducir la necesidad de
2:05:31transfusiones en este tipo de pacientes.
2:05:33También se utiliza en la anemia inducida
2:05:35por quimioterapia en pacientes
2:05:36oncológicos, donde decíamos la supresión
2:05:38de la médula ósea limita la producción
2:05:40de, en este caso en particular de de
2:05:43glóbulos rojos, aunque también pues de
2:05:45glóbulos blancos. Además, la
2:05:47eritropolyetina eh tiene relevancia
2:05:50fuera de del ámbito clínico
2:05:53debido a su uso en el dopaje deportivo.
2:05:57Eh aquí ah se presenta una situación eh
2:06:01muy particular porque, bueno, como
2:06:03decíamos, al final si esta hormona lo
2:06:05que hace es estimular la producción de
2:06:08glóbulos rojos, mejora la oxigenación,
2:06:10mejora el rendimiento de los
2:06:11deportistas. Entonces, eh así como
2:06:13algunos deportistas se van, por ejemplo,
2:06:15a Toluca o a ciertas regiones en el
2:06:17mundo, pues, de gran altitud, donde hay
2:06:20menor concentración de oxígeno y por eso
2:06:22se estimula la producción de glóbulos
2:06:23rojos y por ende eh su resistencia eh
2:06:27pues el con el uso de la eritropolyetina
2:06:29recombinante pues ya no es necesario que
2:06:30hagan todo esto. Entonces esta es una
2:06:33práctica eh pues que se ha detectado en
2:06:35muchos deportistas y por lo cual pues ya
2:06:37está forma parte del esquema de dopaje.
2:06:40Hm. Aquí también eh
2:06:44esto ha implicado retos tecnológicos en
2:06:47el dopaje porque pues al final estamos
2:06:49hablando de proteína, o sea, una
2:06:51proteína recomendante de qué tan
2:06:53diferente va a ser de la de la
2:06:54eritropoyetina endógena.
2:06:57Eh, entonces aquí el reto está en cómo
2:06:59diferenciar la eritropolyetina endógena
2:07:01de la recombinante, eh, que sí hay
2:07:04métodos eh y prácticamente eh bueno,
2:07:07ahorita no los conozco, pero sí sé que
2:07:09sí que sí existe, pero pues es algo que
2:07:11ya se que ya se vigila. Eh, en cuanto a
2:07:16las variantes terapéuticas o las que
2:07:17están en el mercado, no se conocen como
2:07:19tal como eritropolyetinas, sino como
2:07:22epuetinas. Y de estas tenemos eh de
2:07:25diferente generación. Por ejemplo, de la
2:07:27primera generación tenemos la alfa, la
2:07:29beta y la teta. Eh, que estas son
2:07:32prácticamente idénticas a la
2:07:33eritropolyetina humana.
2:07:36Eh, también tenemos a la
2:07:38darepuetina alfa, la cual incorpora
2:07:41mutaciones que aumentan el número de
2:07:42sitios de glicosilación, prolongando
2:07:45significativamente el tiempo de vida
2:07:46media.
2:07:48También tenemos eposcera,
2:07:50eh, que creo que, eh, que es más que
2:07:53según yo es la que aparece como mircera
2:07:56eh al final de la tabla. consiste en una
2:07:58conjugación entre metox y polietil
2:08:00glicol puetina beta, eh, o sea, sería
2:08:04como una versión
2:08:06peguilada de la eritropolyetina que
2:08:09presenta un tiempo de vida media mucho
2:08:10más prolongado, permitiendo incluso la
2:08:13administración mensual en algunos
2:08:14pacientes.
2:08:17En cuanto a las plataformas de
2:08:18producción, la eritropoyetina suele
2:08:20producirse en sistemas eucariotas,
2:08:21principalmente hacemos en células cho
2:08:25se formula principalmente como una
2:08:26solución inyectable para administración
2:08:28subcutánea o intravenosa.
2:08:31Es una eh en forma de glicoproteína es
2:08:34tiene una muy buena estabilidad.
2:08:37Entonces, de hecho, pues las
2:08:38formulaciones suelen líquidas,
2:08:41perdón, suelen estar listas para sus
2:08:43entre los expientes tenemos fosfatos,
2:08:45isidina como amortiguadores,
2:08:48sacarosa, manitol, glicina como
2:08:50estabilizantes o polisorbatos como
2:08:52surfactantes. Hay algunas formulaciones
2:08:55que incluían albúmina como agente
2:08:57estabilizante, pero su uso ha disminuido
2:09:00por las consideraciones de seguridad,
2:09:02principalmente la formación de agregados
2:09:06y y por ende reacciones inmunogénicas.
2:09:11Eh, en cuanto a la farmacocinética, esta
2:09:13ya decíamos que va a estar fuertemente
2:09:15ligada eh por la glicosilación.
2:09:19Eh, el tiempo de vida media suele ser de
2:09:21varias horas a más de un día.
2:09:24Eh, la absorción subcutánea es
2:09:25relativamente lenta con una
2:09:27biodisponibilidad moderada.
2:09:29Por otro lado, tras la administración
2:09:31intravenosa, la eliminación ocurre
2:09:32principalmente por la captación mediada
2:09:34por receptor y degradación proteítica,
2:09:38la filtración renal contribuye eh menos
2:09:40al aclaramiento eh debido al tamaño
2:09:43conferido por las glicosilaciones, o
2:09:44sea, no suele eliminarse tanto por el
2:09:45riñón.
2:09:47En cuanto a los efectos adversos, el
2:09:49principal riesgo asociado al uso de de
2:09:52la eritropolyina es el aumento al riesgo
2:09:54trombótico. O sea, esto se da porque el
2:09:56exceso, o sea, un incremento en la
2:09:59población e de eritrocitos y por ende
2:10:02hemoglobina puede incrementar la
2:10:03viscosidad sanguínea y predisponer a
2:10:06eventos tromboíticos.
2:10:08También un efecto raro pero
2:10:10significativo es la aplasia pura de
2:10:12células rojas mediada por acciones
2:10:15inmunogénicas por la formación de
2:10:16anticuerpos antiep.
2:10:18Eh, este fenómeno eh se ha asociado
2:10:21históricamente a cambios en las
2:10:22formulaciones, por ejemplo, el uso de la
2:10:24albúmena y la presencia de agregados,
2:10:25como ya había mencionado.
2:10:28Eh, aquí también pues la particularidad
2:10:30de estas reacciones eh inmunogénicas
2:10:32pues es que eh esta aplasia pura de
2:10:35células rojas, es decir, hay una anemia
2:10:37porque eh se está no hay, o sea, los
2:10:40anticuerpos neutralizan a la
2:10:42eritropoyetina, entonces no pueden
2:10:43ejercer su efecto. Y además se ha visto
2:10:46que en muchos casos estos anticuerpos
2:10:48pues son presentan una reactividad
2:10:50cruzada contra la eritropoyetina
2:10:52endógena. Entonces ya ni la ni la ni la
2:10:54exógena ni la endógena funciona.
2:11:00El factor de de crecimiento
2:11:02granulocítico o GS GCS
2:11:05CSF es de eh factor estimulante de
2:11:09colonias. Es una proteína de
2:11:11aproximadamente 174 aminoácidos con un
2:11:13peso molecular de 19 kaltons en su forma
2:11:16no glicosilada.
2:11:18Eh, aquí, por ejemplo, a diferencia de
2:11:20la eritropolyetina, el núcleo
2:11:22estructural de este factor de
2:11:23crecimiento es suficiente para conservar
2:11:26la actividad biológica. Eh,
2:11:29es decir que no necesariamente e
2:11:32necesita esta glicosilada.
2:11:35eh
2:11:37esta, o sea, puede estar glicosilada,
2:11:40pero esta glicosilación no es esencial
2:11:41para la interacción con el receptor ni
2:11:43para la actividad biológica en vitro
2:11:46e en vivo. Hm. En cuanto a la función
2:11:49fisiológica, el factor de crecimiento
2:11:52granulocítico es producido por eh por
2:11:55diferentes tipos celulares como
2:11:56macrófagos, fibrolastos, células
2:11:58endoteliales, especialmente en respuesta
2:12:01a infecciones bacterianas e inflamación.
2:12:04Por lo tanto, su función es regular la
2:12:07granulopoyesis, es decir, la
2:12:09proliferación, diferenciación y
2:12:11supervivencia eh de los progenitorios
2:12:14meloides hacia neutrófilos maduros.
2:12:17Además, estimula la liberación de
2:12:19neutrófilos desde la médula ósea hacia
2:12:21la circulación.
2:12:23En cuanto a las aplicaciones clínicas,
2:12:25eh pues la principal aplicación es la eh
2:12:28la prevención y el tratamiento de la
2:12:30neutropenia, que es justamente la baja
2:12:32cuenta de neutrófilos.
2:12:34Después, principalmente inducida por
2:12:36quimioterapia.
2:12:38Eh, la neutropenia aumenta el riesgo de
2:12:40infecciones potencialmente mortales, por
2:12:42lo que su prevención es crítica en la
2:12:44oncología.
2:12:46Otra aplicación es la movilización de
2:12:48células madreopoyéticas hasta la sangre
2:12:50periférica,
2:12:52facilitando su recolección mediante
2:12:53aféresis para transplantes eh de medula
2:12:56ósea o transplantes autólogos
2:12:57ologénicos.
2:12:59También se utiliza en la neutropenia
2:13:01congénita severa,
2:13:03en la neutropénica neutropenia crónica
2:13:06idiopática y para la recuperación
2:13:09hematológica postransplante de
2:13:10medulaosa.
2:13:13Eh, en cuanto a las plataformas de
2:13:14producción,
2:13:16eh la forma recombinante más utilizada
2:13:20eh se llama filasin, la cual se produce
2:13:23en en esquiriquiacolacoli, la cual no
2:13:26está glicosilada.
2:13:27Eh, sin embargo, también existen
2:13:29versiones producidas en células en
2:13:31células show como lenograstín, que sí
2:13:34van a presentar eh glicoses.
2:13:38En cuanto a la formulación, el factor de
2:13:40crecimiento granulocítico se forma
2:13:42principalmente como una solución
2:13:43inyectable
2:13:45eh para administración subcutánea o
2:13:47intravenosa.
2:13:49Los excipientes más comunes incluyen
2:13:52sales de acetato fosfato, azúcares como
2:13:55solbitolosacarosa que ayudan a preservar
2:13:57la conformación de la proteína, también
2:13:59sufactantes no iónicos como el
2:14:01polisorbato 80 para prevenir la
2:14:03absorción y la agregación.
2:14:05En cuanto a la farmacocinética, el
2:14:07factor de crecimiento granulocítico
2:14:09presenta una farmacocinética
2:14:11relativamente corta en su forma no
2:14:13modificada.
2:14:15Eh, tras administración subcutánea, la
2:14:17absorción es rápida y la vida plasmática
2:14:19suele ser de pocas de pocas horas.
2:14:23Su aclaramiento o eliminación depende en
2:14:25gran medida de la cuenta de neutrófilos,
2:14:27eh los cuales pues van a expresar
2:14:29también este estos mismos receptores.
2:14:32Y pues aquí nos damos una idea que en
2:14:34cuanto al metabolismo y eliminación pues
2:14:36esto va a estar mediado al aclaramiento,
2:14:37mediado por receptores.
2:14:39Sin embargo, también puede haber
2:14:41eliminación por degradación proteítica.
2:14:44eh y el menor de medida por filtración
2:14:47renal.
2:14:49Eh, dado a el tiempo de vida media corto
2:14:54del filgrín, que es el eh la molécula
2:14:57más común del factor de crecimiento
2:14:59granulocítico,
2:15:01eh existen ya también versiones
2:15:03versiones peguiladas que son el CPFIL
2:15:05grasín, que aumenta, deseamos, el tamaño
2:15:07hidrodinámico aumentando el volumen y eh
2:15:12reduciendo el aclaramiento de la
2:15:13eliminación y aumenta el tiempo de vida
2:15:15media.
2:15:16De hecho, esto es el
2:15:19el pecilastin, perdón. Eh, de hecho, yo
2:15:21creo que se utiliza más que el
2:15:23propiofilgrastín.
2:15:25Entre los efectos adversos, el más común
2:15:27es el dolor óseo atribuido a la
2:15:29expansión rápida de la médula ósea
2:15:30durante la estimulación hematopoyética,
2:15:33pero también pueden observarse eh
2:15:35leucocitosis transitoria, pues lo cual
2:15:37pues es un efecto pues obvio dado el el
2:15:40mecanismo de acción de del filtam.
2:15:43Eh, otros efectos incluyen la
2:15:45esplenomegalia, es decir, el
2:15:47agrandamiento de eh del vaso o ruptura
2:15:50del vaso, ¿no?, que es la ruptura es
2:15:51plénica.
2:15:55En cuanto al factor estimulante de
2:15:57colonias granulocitos macrófagos,
2:16:00eh esta es una proteína de 127
2:16:02aminoácidos con un tamaño de hasta 23
2:16:05kaltos, dependiendo del grado de
2:16:07glicosilación.
2:16:09Eh, aquí la glicosilación no es
2:16:10absolutamente indispensable para la
2:16:12actividad biológica,
2:16:14pero sí influye en la estabilidad,
2:16:16solubilidad de farmacocinética.
2:16:19Eh, este pues va este factor de
2:16:21crecimiento va a estimular la
2:16:22diferenciación y producción eh
2:16:26desde granulitos, decíamos como hófilos
2:16:32y ocinófilos, pero también monocitos y
2:16:35células dendríticas.
2:16:37Eh, este factor de crecimiento se ha
2:16:40utilizado principalmente para acelerar
2:16:43la recuperación hematológica tras la
2:16:44quimioterapia o trasplante de médula
2:16:46ósea. De hecho, pues en realidad tanto
2:16:47la eritropoyetina como el factor de
2:16:49crecimiento granulocítico y este eh pues
2:16:53se pueden utilizar en combinación para
2:16:55justamente para este tratamiento.
2:16:57También se utiliza en la recuperación de
2:16:59células mieloides tras tras un
2:17:00transplante autólogo o halogénico de
2:17:02médula ósea.
2:17:04y particularmente se ha explorado como
2:17:06una ayubante en la inmunoterapia y en
2:17:08vacunas terapéuticas debido a su
2:17:10capacidad para activar las células
2:17:12dendríticas y potenciar la presentación
2:17:14antigénica. O sea, el uso de este factor
2:17:15de crecimiento ayuda a estimular las
2:17:17células inmunes
2:17:20en diferentes tipos de terapia celular
2:17:22contra el cáncer.
2:17:24Eh, el medicamento eh pues más
2:17:27representativo de este factor de
2:17:29crecimiento hematopoyético se llama
2:17:31sargramostín.
2:17:33Salgramos producido en levaduras,
2:17:37eh la cual presenta una glicosilación
2:17:40distinta a la humana. También tenemos el
2:17:42molgram
2:17:44e producido en sistemas bacterianos, el
2:17:46cual no está glicosilado. Entonces, se
2:17:48fijan aquí pues puede pues las eh las
2:17:50plataformas pueden ser diferentes.
2:17:54En cuanto a las formulaciones, pues
2:17:55también son soluciones eh inyectables
2:17:58o oleofilizadas también para
2:18:00inyectables.
2:18:02Entre los expientes, pues tenemos sales
2:18:05de acetato, fosfato, sacarosa, manitol,
2:18:09eh polisorbatos.
2:18:11La administración suele ser subcutánea o
2:18:13intravenosa.
2:18:16En cuanto a la farmacocinética,
2:18:18el factor de estimulante de colonias de
2:18:21granulocitos y macrófagos tiene una vida
2:18:23media relativamente corta en su forma no
2:18:25modificada.
2:18:26También igual que la eritropolyina y el
2:18:30estimulante de granulocitos
2:18:33eh es de pocas horas.
2:18:35El aclaramiento ocurre principalmente
2:18:37por degradación proteítica e
2:18:39internalización mediada por el receptor.
2:18:42Se fijan, todos tienen eh mecanismos
2:18:44farmacocinéticos similares.
2:18:46Eh, igual también la farmacocinética se
2:18:49ve influenciada por el número de células
2:18:51diana disponibles.
2:18:53Eh, y bueno, los efectos adversos más
2:18:55comunes incluyen fiebre, fatiga,
2:18:58mialgias y reacciones locales en el
2:18:59sitio de inyección, también leucocitosis
2:19:02y aumento de ocinófilos. En algunos
2:19:05casos se se ha presentado eh retención
2:19:07de líquidos, síntomas inflamatorios más
2:19:09pronunciados y puede exacervar procesos
2:19:12inflamatorios subyacentes.
2:19:15Eh, aquí también yo quisiera mencionar
2:19:17que
2:19:19pues uno de los efectos adversos que
2:19:21también pudiera presentarte presentarse
2:19:23con los factores de crecimiento, tanto
2:19:26hematopoyéticos o de otros tipos
2:19:27celulares, eh pues son procesos
2:19:30neoplásicos, ¿no? O sea, se pueden
2:19:31producir, o sea, una estimulación en la
2:19:35proliferación
2:19:36de precursores sanguíneos o o digamos de
2:19:40otros linajes celulares, sí puede eh
2:19:43promover eh pues algún tipo algún tipo
2:19:46de cáncer, aunque estos pues dependerá
2:19:49de la dosis, la duración del
2:19:50tratamiento, estos suelen ser menos
2:19:51frecuentes, pero pues sí también hay un
2:19:53riesgo de esto.
2:19:57Y bueno, la trombopoyetina, que pues
2:19:59esta estimula la producción e de
2:20:02megacarioitos y ponen de plaquetas, es
2:20:05una glicoproteína de 332 aminoácidos,
2:20:08esta es más grande. Eh, presenta una un
2:20:13dominio n terminal con hemología
2:20:15estructural hacia la elitropolyetina y
2:20:17además tiene un sitio eh funcional de
2:20:20unión al receptor y el dominio C
2:20:22terminal está altamente glicosilado y es
2:20:25menos conservado. Esta región contiene
2:20:27múltiples sitios de neglicos y
2:20:29constituye contribuye significativamente
2:20:31al peso molecular de la proteína
2:20:34e
2:20:36que puede alcanzar de hasta 70 y 95 kW.
2:20:40Esta sí pues es mucho más grande. Eh,
2:20:43esta es la TPO es producida así como la
2:20:46eritropoyetina se produce en el hígado,
2:20:48en el riñón, perdón. La trombopoyletina
2:20:50se produce en el hígado, aunque también
2:20:52se sintetiza en riñón y en médula ósea.
2:20:55El efecto biológico es la
2:20:56megacariopoyesis, es decir, eh la
2:20:59madura, proliferación y maduración de
2:21:01megacariocitos, lo que finalmente
2:21:03aumenta en la producción de plaquetas.
2:21:06Eh,
2:21:08aquí
2:21:10e
2:21:12como tal
2:21:15se ha mencionado que la eritropoyotina
2:21:17recombinante inducía una la aparición e
2:21:21de anticuerpos
2:21:23neutralizantes que reconocían tanto a la
2:21:26trombopoyetina recombinante como a la
2:21:27endógena, lo cual eh se veía esto
2:21:32traducido en una trombocitopenia.
2:21:35severa, algo así como sucedía con la eh
2:21:37aplacia de células rojas con la
2:21:39eritropolyetina,
2:21:40lo que eh frenó el desarrollo de formas
2:21:43recombinantes de la trombopoyetina
2:21:48humana idéntica. Como consecuencia, eh
2:21:51pues más bien se reorientó hacia el
2:21:53desarrollo de agonistas del receptor de
2:21:55trombopolyetina. Por eso aquí no vemos
2:21:57en la TPO como tal, sino eh
2:22:01agonistas del receptor de
2:22:02trombopoyetina.
2:22:05eh que no compartieran la homología
2:22:07estructural como tal natural de la de la
2:22:10trombopoyetina para reducir esas
2:22:11reacciones inmunogénicas.
2:22:14Entonces, el general este tipo de
2:22:16agonistas permitió que pues se pudiera
2:22:18activar el receptor eh de la misma
2:22:21manera sin replicar la secuencia del
2:22:23hormona y reducir las reacciones de
2:22:25inmunogenicidad.
2:22:27Entre estos el ejemplo más relevante es
2:22:29el romiplostim, que es una proteína de
2:22:32fusión que contiene los dominios capaces
2:22:34de activar al receptor unido a un
2:22:36fragmento FC de un anticuerpo o
2:22:38inmunoglobulina.
2:22:40Esta estrategia aumenta el tiempo de
2:22:41vida media
2:22:43eh mediante reciclaje mediado eh por el
2:22:47receptor neonatal de la porción FC, que
2:22:49eso lo vamos a ver en el siguiente tema.
2:22:51Eh, y reduce la inmunogenicidad cruzada.
2:22:54También tenemos otro fármaco que se
2:22:56llama el trombopac,
2:22:59eh, que es una pequeña molécula oral que
2:23:01se une al sitio, a un sitio distinto del
2:23:03receptor y actúa como un agonistaérico.
2:23:06Pero este, tengo entendido, o sea, es es
2:23:08un fármaco de síntesis química, no es un
2:23:10biotecnológico.
2:23:13En cuanto a las plataformas
2:23:14recombinantes para producir el Romy Plus
2:23:16Team, e, bueno, originalmente para
2:23:20producir la TPO se hacía en células de
2:23:22mamífero, pero ahora el Romiplos Team se
2:23:25produce pues también en células de
2:23:27mamífero, ¿no? O sea, para ambas. Em,
2:23:30esto permite plegamiento adecuado y la
2:23:32glicosilación del fragmento FC de la
2:23:34inmunoglobulina.
2:23:36Eh, hay otros agonistas peptídicos que
2:23:39pueden producirse en sistemas
2:23:40bacterianos o como decía eh eh por
2:23:43síntesis química.
2:23:46Los agonistas del del TPO, del receptor
2:23:48de TPO, se formulan principalmente para
2:23:51la administración subcutánea y estos
2:23:54incluyen eh tampones fisiológicos como
2:23:56sale de coluro de sodio, eh sales de
2:23:58fosfato, estabilizantes eh proteicos
2:24:01similares a utilizados en otros
2:24:03biofármacos como azúcares y sufactantes
2:24:05no iónicos.
2:24:07En cuanto a las aplicaciones clínicas,
2:24:09los agonistas de TPO, del receptor de
2:24:11TPO, se utilizan principalmente en el
2:24:13tratamiento de trombocitopenas crónicas,
2:24:15obviamente, especialmente en la púrpura
2:24:18trombocitopénica eh inmune, que esto es
2:24:20un cuadro que suele eh presentarse
2:24:24por ejemplo en mujeres eh embarazadas RH
2:24:29negativo, este que tienen bebés eh con
2:24:32un tipo sanguíneo diferente y presentan
2:24:33una reacción inmunogénica. De esto
2:24:35también vamos a hablar eh más adelante
2:24:38de de ejemplos o de casos, perdón, de
2:24:41aplicaciones terapéuticas.
2:24:43Eh, también se emplean en la
2:24:44trombocitopenia asociada a la enfermedad
2:24:46hepática crónica o síndromes
2:24:48mielodisplásicos.
2:24:50entre los efectos adversos, el efecto
2:24:53más relevante es el riesgo de trombosis
2:24:55asociado a un aumento excesivo de
2:24:57plaquetas, que creo que pues este es un
2:24:58efecto adverso, pues eh obvio, algo como
2:25:02lo que sucede con la con la
2:25:03eritropolyina.
2:25:09Bien, ahora vamos a pasar al último tipo
2:25:11de medicamentos biotecnológicos que
2:25:13vamos a revisar en este en esta sesión,
2:25:16que son eh aquellos que ayudan a regular
2:25:19la hemostasia.
2:25:21Eh, la hemostasia se entiende como este
2:25:24proceso en el cual
2:25:26se maneja eh el estado óptimo de la
2:25:31sangre. Eh, que esto pues principalmente
2:25:34se regula cuando eh hay una lesión
2:25:37vascular, o sea, cuando hay un corte
2:25:39donde los vasos sanguíneos y la sangre
2:25:40quedan eh quedan expuestos, que esto
2:25:43puede provocar una pérdida una pérdida
2:25:45de sangre.
2:25:47eh donde pues en la hemostasia
2:25:49participan en equilibrio diferentes
2:25:51procesos que tenemos la cascada de
2:25:53coagulación donde al final pues se forma
2:25:56un cuágulo eh un tapón de fibrina con
2:25:59plaquetas y restos celulares. Eh, sin
2:26:03embargo, pues este mecanismo no puede
2:26:05estar presente, la formación del coágulo
2:26:07no puede estar presente todo el tiempo,
2:26:08para lo cual también participan estos
2:26:10mecanismos fibrinolíticos o de
2:26:12degradación de el cuágulo de del cuágulo
2:26:15de fibrina.
2:26:17Esto es un eh un sistema eh altamente
2:26:20regulado que utiliza tanto mecanismos
2:26:23celulares eh enzimáticos y de otras
2:26:26proteínas. Hm. Obviamente hay
2:26:29alteraciones
2:26:31en la en la hemostasia que están
2:26:33asociados eh con enfermedades. Por
2:26:36ejemplo, si hay una coagulación
2:26:37excesiva, pues se generan trombosis y
2:26:40esto puede estar relacionado con
2:26:41accidentes cerebrovasculares o embolias.
2:26:45eh o cuando hay una baja una baja
2:26:49regulación de la coagulación, pues se
2:26:50producen eh hemorragias, como es lo que
2:26:52sucede con los pacientes eh con
2:26:55hemofilia. Entonces, en general, la
2:26:56hemostasia es un proceso que está
2:26:58diseñado para activarse localmente y y
2:27:01que pues dure cierto número de tiempo.
2:27:05E podríamos nosotros clasificar a la
2:27:08hemostasia en hemostasia,
2:27:12a ver, permítanme, en la hemostasia
2:27:15primaria y la hemostasia secundaria. La
2:27:19hemostasia primaria
2:27:22eh se inicia mediante, o sea, o sea, que
2:27:24tiene que ver con todo este proceso de
2:27:26coagulación cuando hay una lesión
2:27:28vascular. La disrupción de los vasos
2:27:31sanguíneos, decíamos eh expone eh
2:27:33componentes principalmente provenientes
2:27:36del endotelio como el colágeneno y otros
2:27:39factores de coagulación como señales de
2:27:42activación plaquetaria. Las plaquetas
2:27:44que están circulando en la sangre se
2:27:46adhieren al sitio de la lesión.
2:27:49Eh, y esto desencadena la activación de
2:27:52plaquetas, que incluye cambios
2:27:53morfológicos, liberación de gránulos eh
2:27:57y de histófolípidos
2:28:00cargados negativamente en su membrana.
2:28:03Las plaquetas activadas van a liberar
2:28:05mediadores como tromboxanos eh o
2:28:07serotonina que van a amplificar la
2:28:09agregación plaquetaria y van a reclutar
2:28:12más plaquetas al sitio de la lesión.
2:28:15eh así como pues la activación de
2:28:17factores de coagulación y eh el
2:28:20resultado es la formación de un tapón
2:28:22plaquetario primario eh relativamente
2:28:24inestable.
2:28:26Eh, luego tenemos la hemostasia
2:28:27secundaria, que es la cascada de
2:28:29coagulación como tal, donde hay una
2:28:32serie de reacciones eh proteíticas en
2:28:34cadena que van a culminar en la
2:28:36generación de la trombina, eh que es una
2:28:40enzima que va a eh a formar eh redes de
2:28:46fibrina.
2:28:48Eh, los factores de coagulación circulan
2:28:50como simógenos inactivos, es decir, que
2:28:53eh pues son enzimas que están inactivas
2:28:55que para poder activarse necesitan haber
2:28:57otro un corte proteítico por otra
2:28:59enzima, ¿no? Eh, históricamente la
2:29:02cascada de coagulación se describía en
2:29:05en diferentes
2:29:07eh en diferentes etapas como la vía
2:29:10intrínseca y la vía extrínseca, que al
2:29:12final convergen en una vía común.
2:29:15Eh, aunque este modelo lo pueden
2:29:16encontrar en la literatura y sigue
2:29:17siendo útil para explicar cómo funciona
2:29:19la la coagulación, actualmente se se
2:29:22reconoce eh otro modelo eh basado en
2:29:26fases que la coagulación la podríamos
2:29:29como tal entender como un proceso de
2:29:31iniciación, amplificación y propagación.
2:29:34Ahorita lo vamos a platicar con más
2:29:35detalle. Eh, luego tenemos eh la
2:29:39fibrinolisis. Decíamos que este es el
2:29:41proceso mediante el cual el organismo
2:29:43degrada el coágulo una vez cumplida su
2:29:45función. Esta eh la fibrinolisis va a
2:29:48estar mediada principalmente por una
2:29:50enzima que se llama plasmina, que
2:29:52obviamente pues o sea, su papel es
2:29:54digerir a la fibrina.
2:29:57La plasmina se genera a partir del
2:29:59plasminógeno mediante activadores como
2:30:02el activador tisular del plasminógeno o
2:30:04TPA como viene aquí en la en la figura y
2:30:07otros factores como laquinasia. Estos
2:30:10activadores van a estar eh van a estar
2:30:13regulados por inhibidores que van a
2:30:16modular la intensidad de la
2:30:17fibrinolisis. Entonces, eh el equilibrio
2:30:20entre la formación de la fibrina por la
2:30:22cascada de coagulación y la degradación
2:30:24de esta por la fibrinolisis va a
2:30:26determinar la estabilidad de los
2:30:28cuágulos. Deseamos que una fibrinólis
2:30:30excesiva eh o o también por otro lado
2:30:34una ausencia de coagulación puede
2:30:36generar hemorragias excesivas, mientras
2:30:38que una fibrinolisis insuficiente puede
2:30:40favorecer trombosis.
2:30:43Eh,
2:30:45las diferencias en factores de
2:30:46coagulación, por ejemplo, como la
2:30:48hemofilia A, que es una deficiencia del
2:30:50factor 8, o la hemofilia B, que es una
2:30:53deficiencia del factor nu, conducen a
2:30:55sangrados prolongados. Por otro lado,
2:30:57también hay estados patológicos
2:30:59procoagulantes que pueden resultar eh en
2:31:02una hiperactividad plaquetaria,
2:31:04deficiencias en sistemas auticoagulantes
2:31:06naturales o inflamación sistémica, todo
2:31:09contribuyendo a la trombosis venosa o
2:31:12arterial.
2:31:15Eh, bueno, al final eh la cascada de
2:31:17coagulación e pues como tal lo pretendo
2:31:20que la memoricemos, pero eh pues sí que
2:31:22entendamos eh cómo es esta cascada o
2:31:26esta secuencia eh de pasos o de
2:31:29activación.
2:31:31Eh, les había mencionado de que se puede
2:31:34explicar también la cascada de
2:31:35coagulación en un modelo eh clásico
2:31:38tradicional donde se divide la
2:31:40coagulación en vías extrínsecas o
2:31:42intrínsecas.
2:31:44Hm. La vía eh extrínseca se activa por
2:31:49la exposición del factor de coagulación
2:31:52eh tres, que creo que no viene aquí
2:31:54señalada en la diapositiva, pero el
2:31:56factor de coagulación 3 se conoce como
2:31:59el factor eh factor tisular, que es una
2:32:02proteína transmembranal que se expresa
2:32:04en las células eh subendoteliales, está
2:32:07en una capa antes de la que tiene el
2:32:08contacto directo con la sangre en el
2:32:10vaso sanguíneo.
2:32:12Cuando hay una laceración, hay un corte,
2:32:15una alteración vascular, el factor
2:32:17tisular se une al factor
2:32:22al factor 7 activado y forma un complejo
2:32:25que va a activar al factor 10.
2:32:28Eh, y luego esto va a llevar a lugar a
2:32:31la activación de la vía intrínseca, que
2:32:33se inicia mediante la activación de
2:32:35factores eh plasmáticos en contacto con
2:32:37las superficies cargadas negativamente
2:32:39de las de las de los factores de
2:32:41coagulación. Esto va a incluir la vía
2:32:44como tal eh intrínseca de la cascada de
2:32:46coagulación. va a incluir la activación
2:32:49secuencial de los factores eh
2:32:53de los factores 12,
2:32:559,
2:32:5711 y 8, que finalmente van a activar al
2:33:01factor eh al factor 10.
2:33:05Ambas vías, tanto intrínseca como
2:33:07extrínseca, convergen en una vía común
2:33:09donde el factor 10a, que es el que se ve
2:33:11ahí en la diapositiva, convierte a la
2:33:13protrombina,
2:33:15que es el eh que es el factor dos, en la
2:33:18trombina, que sería el factor 2
2:33:20activado, eh el cual es el evento
2:33:23central en la coagulación, la activación
2:33:24de la trombina.
2:33:26Por otro lado, en el modelo celular,
2:33:29este es un modelo eh que describe a la
2:33:31coagulación como un proceso dependiente
2:33:33de superficies celulares más que de vías
2:33:36aisladas como la vía extrínseca o
2:33:38intrínseca. Decíamos que este se dividía
2:33:40en tres fases: iniciación, amplificación
2:33:42y propagación. En la fase de iniciación,
2:33:45la exposición del factor tisular a
2:33:47través de esta lesión vascular genera
2:33:50pequeñas cantidades de trombina mediante
2:33:53un complejo que se forma entre el factor
2:33:54tisular y el factor 7A, que de hecho es
2:33:58el que se ve en la diapositiva. Durante
2:34:00la amplificación,
2:34:02esta trombina inicial va a activar
2:34:04plaquetas y cofactores como el factor 5,
2:34:07el factor 8 y el factor
2:34:1111.
2:34:12preparando al sistema para una respuesta
2:34:14pues más robusta, más contundente.
2:34:17En la fase de propagación se va a
2:34:19generar una producción masiva de
2:34:21trombina sobre la superficie de las de
2:34:23plaquetas activadas, lo que va a
2:34:24conducir a la conversión de fibrinógeno
2:34:27en fibrina.
2:34:30Pero bueno, independientemente de cómo
2:34:32veamos la cascada de coagulación,
2:34:34decíamos que el actor final en el que
2:34:36todo converge es en la activación de la
2:34:38trombina.
2:34:40Eh, la tromina es una serín proteasa que
2:34:43actúa como un amplificador del sistema
2:34:45hemostático.
2:34:47Su función más conocida, decíamos, es la
2:34:48conversión del fibrinógeno soluble
2:34:51a redes de fibrina insoluble.
2:34:54Eh, sin embargo, la deseamos también que
2:34:56la fibrina puede activar componentes
2:34:59adicionales como factor el factor 5, 8,
2:35:0111 y 8, generando pues un loop, un
2:35:05circuito de retroalimentación positiva,
2:35:07o sea, que se vaya propagando,
2:35:09intensificando.
2:35:10Además, también es capaz de actividad
2:35:13activar, perdón, eh plaquetas, lo que va
2:35:15a reforzar la agregación plaquetaria y
2:35:17la generación de superficies
2:35:19procoagulantes.
2:35:21Al final, la fibrina generada se
2:35:23polimeriza formando una red que
2:35:25estabiliza el tapón plaquetario.
2:35:28Posteriormente, el factor 13a va a
2:35:31generar un entrecruzamiento de las
2:35:33fibras de fibrina, aumentando la
2:35:35resistencia mecánica del cuadro.
2:35:38Eh, de nuevo, no pretendo que
2:35:40memoricemos esto, pero a lo que quiero
2:35:42llegar con toda esta explicación es la
2:35:45importancia de los factores de
2:35:46coagulación en la hemostasis.
2:35:49Los factores de coagulación son un
2:35:51conjunto de moléculas, en su mayoría
2:35:54proteínas, enzimas que participan en una
2:35:57red de reacciones proteíticas
2:35:59destinadas, deseamos, a generar la
2:36:00fibrina y estabilizar el coágulo
2:36:02sanguíneo.
2:36:04También ya había mencionado que la
2:36:05mayoría circula en forma de simógenos
2:36:08inactivos que se activan por proteis
2:36:11limitada en respuesta a una lesión
2:36:13vascular. Esto es importante, eh, porque
2:36:17los factores de coagulación ya están
2:36:19libres de forma eh soluble en el plasma,
2:36:22pero pues tiene que estar de forma
2:36:23inactivada porque, pues, la coagulación
2:36:26eh pues es un proceso que debe ocurrir
2:36:28solo cuando haya una lesión vascular.
2:36:32Eh,
2:36:34los factores de coagulación constituyen
2:36:36eh principalmente serín proteas, aunque
2:36:39también incluye cofactores que funcionan
2:36:41de manera secuencial y altamente
2:36:42amplificada.
2:36:44Ahorita vamos a platicar de la
2:36:45estructura que pues son relativ bastante
2:36:47bastante grandes y complejas.
2:36:50Eh, aunque tradicionalmente se numeran
2:36:51con números romanos del 1 al 13, pues
2:36:54esta nomenclatura, si se fijan, no
2:36:56necesariamente representa un orden, más
2:36:58bien eh un orden en la no representa un
2:37:01orden en cómo va funcionando en la
2:37:02cascada, sino es más bien el orden
2:37:04conforme se fueron descubriendo.
2:37:07La mayoría de los factores de
2:37:08coagulación son glicoproteínas
2:37:10sintetizadas en el hígado en el hígado y
2:37:13secretadas al plasma. se activan como
2:37:16simógenos mediante un corte proteítico
2:37:18que va a exponer su sitio catalítico y
2:37:20eso va a permitir que se ensamblen en
2:37:22complejos funcionales.
2:37:31Eh, un rasgo distintivo en los factores
2:37:34de coagulación,
2:37:36pues es que tienen dominios catalíticos
2:37:37mediados por una triada de serina,
2:37:40isidina y aspartato,
2:37:43eh la cual le permite eh
2:37:47generar pues un
2:37:50perdón, o sea, poder catalizar la
2:37:52hidrólis de sustratos específicos dentro
2:37:54de la cascada.
2:37:56Además, eh tiene dominios con diferentes
2:37:59residuos de ácidos glutámicos
2:38:01modificados que van a ser dependientes
2:38:03de vitamina K, que al final eh esas
2:38:06modificaciones van a permitir la unión a
2:38:08superficies fosfolípídicas cargadas
2:38:10negativamente, como ya como ya habíamos
2:38:12mencionado, que vienen de las membranas
2:38:14de las plaquetas activadas, lo cual es
2:38:17esencial para la función correcta de la
2:38:19de la coagulación. Entonces, tenemos
2:38:22aquí eh una serie eh de factores de de
2:38:26caagulación entre la mayoría pues poseen
2:38:30eh una organización estructural
2:38:32altamente conservada eh que forman eh
2:38:36pues complejos
2:38:38eh
2:38:42y eh que pues también dentro de los
2:38:44factores de coagulación podemos tener
2:38:46cofactores que no sean eh enzimáticos.
2:38:48también, por ejemplo, el calcio puede
2:38:50funcionar por eh se [carraspeo]
2:38:51considera eh un factor de un factor de
2:38:54coagulación.
2:38:55Eh, aquí a lo que quiero llegar es que
2:38:58eh pues las alteraciones
2:39:01eh en la coagulación pues están eh y de
2:39:04otros procesos de la hemostasia como la
2:39:06fibrinolisis, fibrinolisis, perdón,
2:39:10eh van a estar relacionados con eh pues
2:39:13con enfermedades, decíamos con
2:39:15hemorragias prolongadas. eh o la
2:39:18formación de o la formación indeseada eh
2:39:22de coágulos.
2:39:26Podemos presentar diferentes desórdenes
2:39:28eh de la coagulación, o sea, se han
2:39:30identificado en la práctica clínica.
2:39:32Muchos de estos eh pues son enfermedades
2:39:35genéticas que tienen diferentes
2:39:37incidencias en la población. La más
2:39:40común, creo yo, que es la hemofilia A.
2:39:43Esta se debe a la deficiencia o
2:39:44disfunción del factor 8o y presenta una
2:39:48herencia ligada al cromosoma X, por lo
2:39:49que afecta principalmente a varones.
2:39:52Se caracteriza eh también las
2:39:54diferencias en las alteraciones en los
2:39:56eh en los factores de coagulación van a
2:39:58estar representados en el fenotipo
2:40:01eh en el fenotipo de sangrado. En el
2:40:03caso de los pacientes con hemofilia, su
2:40:06fenotipo se caracteriza por hemorragias
2:40:08profundas, especialmente en
2:40:09articulaciones, hematomas musculares y
2:40:12sangrado prolongado tras traumatismos o
2:40:14cirugías.
2:40:16Eh, la hemofilia B está causada por la
2:40:18deficiencia del factor 9 y también
2:40:20presenta una herencia ligada al
2:40:21cromosoma X. Eh, clínicamente es similar
2:40:24a la hemofilia A, pero esta es menos
2:40:26frecuente. También tenemos otras
2:40:28alteraciones como la enfermedad de Bon
2:40:31Wheelbrand, la cual se debe a la
2:40:33deficiencia del factor von Willbran.
2:40:36Eh, aquí lo que sucede es que se reduce
2:40:38la adhesión plaquetaria y la estabilidad
2:40:40del factor 8 en plasma. Este fenotipo se
2:40:43manifiesta con sangrados mucocutáneos,
2:40:46eh menorragia y sangrado posquirúrgico.
2:40:50Existen otras deficiencias menos comunes
2:40:52como la deficiencia del factor 7, eh la
2:40:54deficiencia del factor 10 o incluso
2:40:56también se ha reportado deficiencia
2:40:58genética del fibrinógeno. Estas
2:41:00condiciones pueden generar sangrados
2:41:02variables dependiendo del factor
2:41:03involucrado y pues su papel en la
2:41:05cascada de de coagulación.
2:41:08Eh, también podemos tener trombofilias
2:41:11hereditarias.
2:41:13La más común es la mutación del factor
2:41:145, que genera resistencia eh a la
2:41:17proteína C activada
2:41:20eh y una mutación en el gen de la
2:41:22protrombina que va a incrementar sus
2:41:24niveles plasmáticos. Estas condiciones
2:41:26van a predisponer a la a la trombosis.
2:41:29Entonces, eh
2:41:32aquí pues se tiene que identificar muy
2:41:34bien cuáles son las alteraciones
2:41:38en la cascada de coagulación. En el caso
2:41:40de las enfermedades eh genéticas como la
2:41:43hemofilia, donde hay una deficiencia de
2:41:45un factor de coagulación, obviamente la
2:41:47terapia más obvia es la terapia de
2:41:49reemplazo en la que se otorga eh se
2:41:51administra eh el factor el factor
2:41:54ausente.
2:41:56Esto pues también el con la el uso de la
2:41:59biotecnología o los factores de
2:42:01coagulación recombinantes pues ya no es
2:42:02necesario depender
2:42:05de transfusiones,
2:42:07que esto es algo que pues será una
2:42:09condicionante para los pacientes con
2:42:10hemofilia y que eso también a su vez
2:42:12está asociado con un alto riesgo de eh
2:42:16de transmisión eh de enfermedades a
2:42:18través de la sangre, como por ejemplo
2:42:20hepatitis o VIH.
2:42:22Y bueno, en el mercado existen una serie
2:42:24de factores de coagulación terapéuticos.
2:42:27Hm. Aquí pues en este caso pues el eh la
2:42:31deficiencia o la alteración en el en la
2:42:34cascada de coagulación más común es la
2:42:36hemofilia A. Entonces, este es el más
2:42:38utilizado eh que en este caso pues es el
2:42:41tratamiento sería eh la administración
2:42:44exógena del factor 8o recombinante.
2:42:47Eh de aquí eh del factor 8o pues tenemos
2:42:50eh varias generaciones eh pues
2:42:52terapéuticas, o sea, del factor 8o
2:42:54recombinante.
2:42:56Eh estas se producen en células cho
2:42:58porque estas enzimas pues además de que
2:43:00son grandes, eh pues están glicosiladas.
2:43:04Eh, posteriormente se han desarrollado
2:43:07eh familias o variantes del factor de
2:43:09coagulación ocho en las que se les ha
2:43:11deletado un dominio, particularmente el
2:43:13dominio B, para mejorar la eficiencia de
2:43:15la producción eh de la proteína eh a
2:43:18nivel industrial sin afectar
2:43:20necesariamente la actividad coagulante.
2:43:23Eh, aquí pues el tiempo de vida media va
2:43:25a variar, si se fijan aquí en la tabla,
2:43:28eh, pues está entre el rango entre 8 y
2:43:3112 horas. es lo más común, pero por ahí
2:43:33podemos tener eh factores de coagulación
2:43:36modificados con un tiempo de vida media
2:43:37más prolongado.
2:43:39La eliminación de los del factor de
2:43:41coagulación 8 está influenciada por la
2:43:43interacción con el factor von Wilebrand
2:43:45y mecanismos de captación hepática.
2:43:48Hm. Las formulaciones suelen ser
2:43:50liofilizadas para mejorar la
2:43:51estabilidad.
2:43:53Eh, y se incluyen leoprotectores como
2:43:54sacarosa, trelosa, aminoácidos y
2:43:57surfactantes no iónicos para prevenir la
2:43:59agregación. Aquí algo que vale la pena
2:44:02mencionar es que las variantes donde se
2:44:05les ha deletado, perdón, el dominio B
2:44:08suelen ser inmunogénicas.
2:44:10Entonces, aquí también, ¿en qué caso se
2:44:12utilizan estos factores de coagulación
2:44:14exógenos en pacientes con hemofilia? Eh,
2:44:16pues principalmente previo eh a cirugías
2:44:19o después a algún eh accidente o
2:44:21traumatismo, pues donde haya un sangrado
2:44:24pues ya inminente, ¿no?
2:44:28Eh, también tenemos el factor nueve. eh
2:44:30recombinante terapéutico que este se
2:44:32utiliza para el tratamiento de la
2:44:33hemofilia B. Su producción también eh
2:44:36requiere plataformas eucariotas porque
2:44:39pues también está glicosilada,
2:44:40principalmente células cho. El tiempo de
2:44:43vida media eh puede está entre las 18 y
2:44:49las 24 horas. Las formulaciones también
2:44:52suelen ser leofilizadas. Existen
2:44:54variantes peguiladas del factor nueve.
2:44:58Eh, y también
2:45:01eh variantes fusionadas con albumina.
2:45:05Hm.
2:45:07También tenemos como un agente
2:45:08terapéutico el factor 7A activado
2:45:11recombinante. Este se utiliza
2:45:13principalmente como un agente
2:45:14hemostático en situaciones donde eh
2:45:17tanto el factor 8 o el factor 9 no son
2:45:20eficaces. Por ejemplo, en pacientes que
2:45:22han desarrollado anticuerpos
2:45:23neutralizantes ante estos factores,
2:45:26eh es como, digamos, brincarnos un paso,
2:45:29irnos un paso más abajo en la cascada de
2:45:31coagulación.
2:45:33Este factor activa directamente al
2:45:34factor 10, incluso en ausencia de la
2:45:36bien intrínseca tradicional, por lo cual
2:45:39eh pues le confiere una utilidad como
2:45:41agente de bypass, o sea, como pues de
2:45:43brincarse, de asegurar la cascada de
2:45:45coagulación. Eh, también pues se
2:45:47producen células de mamífero para
2:45:49asegurar las modificaciones
2:45:50postraduccionales, aunque su estructura
2:45:52es más compacta que la del factor 8. Su
2:45:54tiempo de vida media ronda entre las 2 y
2:45:573 horas y requiere por lo cual requiere
2:46:00una administración repetida en contextos
2:46:01clínicos agudos.
2:46:04E
2:46:07y bueno,
2:46:11en otros casos, para asegurar la
2:46:12hemostasia, tal vez lo que se necesita
2:46:15no es estimular o activar la cascada de
2:46:17coagulación, sino más bien prevenirla.
2:46:20Para esto, eh bueno, en pacientes o
2:46:22personas que tienen esta predisposición,
2:46:24ya sea genética, farmacológica o de
2:46:27cualquier otro tipo a cuadros
2:46:29protrombóticos, pues es importante el
2:46:32uso, en este caso, de anticoagulantes,
2:46:35para los cuales existen anticoagulantes
2:46:37orales, o sea, fármacos de síntesis
2:46:38química, pero pues estos suelen tener e
2:46:41ventanas terapéuticas muy estrechas. En
2:46:44los últimos años ha surgido la
2:46:46oportunidad de producir anticoagulantes
2:46:49biológicos que incluyen proteínas o
2:46:52peptidos que inhiben componentes clave
2:46:54de la cáscada de coagulación, usualmente
2:46:57mediante la unión directa a las proteas
2:46:59como la trombina o al factor 10.
2:47:02Eh,
2:47:04entre los anticoagulantes biológicos más
2:47:07relevantes
2:47:09se encuentran los inhibidores directos
2:47:11de la trombina
2:47:12como la irudina y sus derivados o
2:47:15inhibidores naturales recombinantes como
2:47:17la antitrombina.
2:47:19Eh, y proteínas reguladoras de la
2:47:21coagulación como la trombomodulina. eh
2:47:23de manera particular, o sea, quisiera yo
2:47:25llamar su atención al caso de la eh de
2:47:28la irudina,
2:47:30que este es un péptido anticoagulante,
2:47:32originalmente aislado de la sanguijuela,
2:47:36de la saliva de la sanguijuela, que pues
2:47:38este animal lo utiliza pues para
2:47:41garantizar eh pues el flujo de la sangre
2:47:44mientras está se está alimentando.
2:47:47Esta molécula permite al parásito
2:47:49mantener la sangre del hospedero en el
2:47:50estado fluido durante la alimentación.
2:47:53Es entonces eh cuando se descubrió y que
2:47:56se descubrió que era una proteína
2:47:58se y que de hecho era eh pues un tamaño
2:48:01relativamente pequeño es de 65
2:48:02aminoácidos o 7 kilodaltons. Eh la
2:48:05probabilidad de que sea inmunogénica es
2:48:07menor si lo comparamos con otras eh
2:48:09potenciales proteínas anticoagulantes,
2:48:12además de que no está glicosilada, lo
2:48:14cual pues permite producirse en
2:48:16diferentes plataformas biológicas eh
2:48:19pues de manera pues rápida y eficaz.
2:48:23Eh, la irudina es un inhibidor directo y
2:48:26específico de la trombina. Su mecanismo
2:48:29implica un bloqueo simultáneo
2:48:32del sitio catalítico y del exocito de
2:48:34uno alfibrinógeno, lo cual va a impedir
2:48:36la impedir la conversión del fibrinógeno
2:48:39en fibrina y prevenir pues la formación
2:48:41del cuágulo. Además que también va a
2:48:44bloquear la activación de los factores
2:48:455, 8 y 13 y la activación plaquetaria.
2:48:51Eh, aquí pues podemos tener diferentes
2:48:53variantes terapéuticas, o sea, tenemos
2:48:55la irudina comercial,
2:48:58eh, y también la desirudina y la
2:49:00leirudina, que son versiones
2:49:02recombinantes, pues que conservan la
2:49:04estructura de la eh irudina natural,
2:49:06pero con pequeñas modificaciones en la
2:49:08secuencia para facilitar la expresión en
2:49:11los sistemas recombinantes.
2:49:13También tenemos la bivalirudina, que es
2:49:16un péptido diseñado que mantiene el
2:49:18principio de inhibición de la trombina
2:49:20que tiene la irudina, pero con una
2:49:21farmacocinética más controlable,
2:49:24controlable, perdón.
2:49:26Eh, en cuanto a las plataformas de
2:49:28producción, suele producirse en sistemas
2:49:30eh microbianos como ecoli y levaduras.
2:49:33Aquí el proceso de producción que se
2:49:35muestra en la diapositiva es utilizando
2:49:38levaduras como o saacaromis cerevici
2:49:43lo cual pues también permite la
2:49:45purificación de la proteína en el medio
2:49:48extra a partir del medio extracelular.
2:49:49Entonces no es necesario hacer una
2:49:51lisis.
2:49:52En cuanto a la farmacocinética,
2:49:55eh la administración parenteral,
2:49:57obviamente aquí pues estamos hablando de
2:49:58un proceso de inhibición de la
2:50:00coagulación.
2:50:03Eh, pues el tratamiento tiene que ser
2:50:04intravenoso, ¿no?
2:50:07Eh, aquí pues se distribuye rápidamente
2:50:10en los compartimentos vasculares y la
2:50:12eliminación ocurre principalmente por
2:50:14vía renal, o sea, porque pues puede
2:50:15pasar por filtración glomerular. El
2:50:18tiempo de vida media de la irudina es de
2:50:20algunas horas.
2:50:22Eh, la vivalirudina tiene un tiempo de
2:50:25vida media más corta para tener un mayor
2:50:27control clínico. En cuanto a las
2:50:29formulaciones, suelen ser formulaciones
2:50:31inyectables para la administración
2:50:32intravenosa o subcutánea y debido a su
2:50:35estabilidad no siempre van a requerir e
2:50:38liofilización.
2:50:40Se utiliza para el tratamiento de la
2:50:42trombocitopenia inducida por heparina y
2:50:44en angioplastías, o sea, en cirugías de
2:50:47vasos sanguinos. En cuanto a los efectos
2:50:49adversos, como cualquier anticoagulante,
2:50:51el principal riesgo pues es un sangrado
2:50:53excesivo. Además, se han reportado eh
2:50:57reacciones inmunogénicas, pues al ser
2:50:59una proteína de sanguíjuela, pues sí
2:51:00tiene potencial de ser inmunogénico,
2:51:02aunque por su pequeño tamaño y pocas
2:51:04modificaciones postraduccionales, pues
2:51:06tiene se presentan en menor frecuencia
2:51:08que con otros eh biofarmacéuticos.
2:51:14Otro agente anticoagulante eh producido
2:51:17por biotecnología decíamos es
2:51:18antitrombina, la cual es una proteína de
2:51:2158 kaltons. Esa pues está mucho más
2:51:24grande que la irudina con una estructura
2:51:27globular caracterizada por laminas beta
2:51:30y hélices alfa eh con varios hitos de
2:51:33glicosilación. Y estas glicosilaciones
2:51:36están ligadas a la estabilidad,
2:51:37solubilidad y propiedades
2:51:38farmacocinéticas.
2:51:41Eh, incluye un dominio específico de
2:51:42unioneparina cuya interacción modula su
2:51:45actividad anticoagulante.
2:51:47En cuanto a la función fisiológica, pues
2:51:48es inhibir eh las serín proteas de la
2:51:51cascada de coagulación, principalmente
2:51:54el factor 2, el factor 10, aunque
2:51:56también puede inhibir a otros.
2:51:59E
2:52:01se menciona que su mecanismo de acción
2:52:05implica un proceso de inhibición suicida
2:52:07en el que la proteína forma un complejo
2:52:09estable e irreversible con las proteas
2:52:11blanco. Eh, esta interacción ocurre
2:52:14mediante una región reactiva conocida
2:52:16como un loop reactivo que se inserta en
2:52:18el sitio activo de la proteas. Una vez
2:52:21que la enzima intenta cortar este
2:52:22segmento, queda atrapada en un complejo
2:52:24covalente e inactivo. Entonces, es un
2:52:27proceso irreversible.
2:52:30Eh, en cuanto a las plataformas de
2:52:31producción, e de hecho, pues existe
2:52:35antitrombina producida en plataformas de
2:52:37mamífero, de nuevo, porque está
2:52:39glicosilada y es una enzima es una
2:52:41proteína grande.
2:52:43Pero aquí lo que yo quisiera resaltar es
2:52:45que sea particularmente en al menos las
2:52:51empresas farmacéuticas que han producido
2:52:53la antitrombina se han dado la
2:52:54oportunidad de explorar plataformas eh
2:52:58de expresión eh diferentes
2:53:01eh
2:53:02que este en este caso pues sería
2:53:04animales transgénicos, aunque de nuevo
2:53:06también se produce de manera clásica en
2:53:08un biorreactor con células de mamífero.
2:53:11Les voy a hablar principalmente del caso
2:53:13del atrín, atrín, bueno, AT de
2:53:15antitromina,
2:53:17el cual fue el primer biofarmacéutico
2:53:19aprobado en el mercado producido en
2:53:22animales transgénicos, específicamente
2:53:24en cabras modificadas genéticamente para
2:53:27secretar la antitrombina humana en
2:53:29leche.
2:53:31Eh, aquí pues la estrategia consiste en
2:53:33introducir el gen humano de la
2:53:34antitrombina bajo el control de
2:53:37promotores específicos de las glándulas
2:53:39mamarias.
2:53:40Eh, principalmente son eh de
2:53:43lactoglobulinas o de la caseína de la
2:53:45leche. De esta manera, la proteína
2:53:47recominante se expresa durante la
2:53:49lactancia y se secreta en la leche, lo
2:53:52cual pues eso se puede eh generar pues
2:53:55con técnicas pues e
2:53:59eh iba a decir agrícolas, pero la
2:54:02palabra no es agrícolas, eh
2:54:06agropecuarias, sí. Eh, esta presenta una
2:54:10secuencia de aminoácidos idéntica a la
2:54:12humana, pero puede diferir ligeramente
2:54:15en los patrones de glicosilación, sin
2:54:16embargo, sigue siendo funcional.
2:54:19Eh, aquí pues lo importante que quisiera
2:54:22yo resaltar del hecho de que se produzca
2:54:24eh una proteína recominante humana en
2:54:27leche eh obviamente pues es la novedad
2:54:29de de esta plataforma de producción eh
2:54:33que pues el una vez que se se establece
2:54:36la línea de cabras transgénicas, pues se
2:54:39puede mantener pues con técnicas pues de
2:54:41crianza natural, o sea, en en granjas eh
2:54:46obviamente granjas especiales
2:54:49eh donde las eh los animales o en este
2:54:51caso las cabras pues es sean lo más
2:54:53sanas posibles. Eh, pero aquí lo
2:54:56interesante es también en cuestión lo
2:54:59que o sea el hecho de expresar proteínas
2:55:01en leche a nivel de producción eh pues
2:55:04qué implica, ¿no? O sea, para empezar
2:55:06poder utilizar plataformas industriales
2:55:09eh de ordeña para la colecta de
2:55:10biofarmacéuticos y que de ahí la
2:55:13purificación sea muchísimo más sencilla.
2:55:15para empezar, porque la leche es un
2:55:17fluido eh es un fluido estéril, es un
2:55:19fluido clase dos eh con una eh
2:55:23composición conocida. No quiero decir
2:55:25que no sea, o sea, que no tenga
2:55:27proteínas este ni otros agentes que pues
2:55:30se tengan que remover eh para purificar
2:55:33eh la proteína terapéutica. Eh, pero si
2:55:36se fijan aquí el proceso de producción
2:55:38es mucho más sencillo a los que hemos
2:55:39visto en otros ejemplos,
2:55:42eh, que pues básicamente es inducir la
2:55:45lactancia en la cabra, ordeñarla,
2:55:48filtración, una, dos, tres
2:55:50cromatografías y ya la proteína queda
2:55:52prácticamente pura, ¿no?
2:55:55Bueno, entonces sobre las propiedades
2:55:57farmacocinéticas de la antitrombina,
2:55:59especialmente la de la Trin, presenta un
2:56:02tiempo de vida media entre dos y 3 días
2:56:04en condiciones fisiológicas normales.
2:56:07Entonces, es un tiempo de vida media
2:56:09bastante largo. La administración
2:56:11intravenosa produce eh una rápida
2:56:14expansión en el comportamiento
2:56:15plasmático donde va a ejercer su efecto
2:56:16anticoagulante al neutralizar todas
2:56:18estas proteas activadas. La eliminación
2:56:21de la antitrombina va a ocurrir
2:56:22principalmente por eh degraduación
2:56:25proteítica
2:56:27y captación hepática. Eh, en cuanto a
2:56:31las formulaciones, suelen presentarse
2:56:33como productos leiofilizados para
2:56:34reconstitución intravenosa. En cuanto a
2:56:36las aplicaciones clínicas, pues es para
2:56:38el manejo en pacientes con deficiencia
2:56:40congénita eh de antitrombina que vayan a
2:56:43ser sometidos a procedimientos
2:56:44quirúrgicos, en partos o situaciones de
2:56:47alto riesgo trombótico. También se
2:56:49utilizan algunos casos en en pacientes
2:56:51con resistencia a la heparina, que la
2:56:53heparina es un anticoagulante oral,
2:56:55donde niveles bajos de antitrombina
2:56:56reducen la eficancia del anticoagulante.
2:56:59Puede emplearse en contextos
2:57:01seleccionados de coagulación
2:57:02intravascular diseminada en en el caso
2:57:04de algunas infecciones en sangre, aunque
2:57:07su uso en estos escenarios es algo más
2:57:09controvertido.
2:57:11En cuanto a los efectos adversos,
2:57:15se ha reportado que la antitrombina
2:57:17presenta un perfil de seguridad
2:57:19generalmente favorable.
2:57:21Los efectos adversos más comunes
2:57:23incluyen reacciones relacionadas con la
2:57:25administración, con la infusión, como eh
2:57:29fiebre o hipotensión leve.
2:57:31Eh, el riesgo esmorrágico pues es la
2:57:33principal preocupación, especialmente
2:57:35cuando se administra junto a coreparina
2:57:36u otros anticoagulantes.
2:57:38Eh, sin embargo, en cuanto en la a la
2:57:43inmunogenicidad, eh Atrina ha mostrado
2:57:45baja incidencia de anticuerpos
2:57:46neutralizantes en estudios clínicos.
2:57:48Entonces, pues en ese sentido pues es eh
2:57:50bastante segura.
2:57:54Y bien, ahora vamos a hablar de otro
2:57:57proceso de regulación de la hemostasis
2:57:59que es la fibrinolisis. O sea, ya una
2:58:01vez eh que se ha formado el cuágulo, la
2:58:04fibrinolisis se encarga de eliminarlos y
2:58:06tanto los cuágulos en las redes de
2:58:08fibrina una vez que la integridad eh
2:58:10vascular ha sido restaurada, que ya se
2:58:12ha pasado por este proceso de
2:58:14cicatrización. Esto permite restablecer
2:58:17restablecer adecuadamente el flujo
2:58:18sanguíneo y prevenir la formación de
2:58:21cicatrices intravasculares o trombos
2:58:23persistentes.
2:58:25Eh, la fibrinolisis está diseñada para
2:58:27activarse solamente en el sitio del
2:58:29coágulo y limitar su actividad al
2:58:31entorno
2:58:32fibrinoso, evitando la degradación
2:58:35sistémica de proteínas plasmáticas
2:58:36esenciales.
2:58:40Sobre esto, pues habíamos dicho que la
2:58:42plasmina es la serín proteasa
2:58:44responsable de degradar la fibrina. La
2:58:46plasmina se genera a partir de su
2:58:48precursor inactivo, también un simógeno
2:58:50que se llama plasminógeno. El
2:58:52plasminógeno es una glicoproteína
2:58:54plasmática sintetizada en el hígado.
2:58:56Contiene eh dominios tipo cringle que le
2:58:59permiten unirse a residuos de licina
2:59:01expuestos en la fibrina. Esta también es
2:59:03una proteína, aquí no viene la
2:59:04estructura, pero es una eh proteína
2:59:07también pues bastante bastante compleja.
2:59:09Tiene 527 aminoácidos, es bastante
2:59:12extensa y tiene varios hitos de
2:59:13glicosilación.
2:59:15Eh, cuando el plasminógeno se activa
2:59:17plasmina, adquiere actividad
2:59:19proteolítica, capaz de degradar la red
2:59:21de fibrina en fragmentos solubles
2:59:22conocidos como productos de degradación
2:59:24de la fibrina.
2:59:27Eh, la activación del plasminógeno va a
2:59:30estar mediada principalmente por
2:59:31activadores específicos que convierten
2:59:34al plasminógeno a plasmina. Los dos
2:59:37activadores fisiológicos más importantes
2:59:39son el activador tisular de plasminógeno
2:59:42o o TPA y la uroquinasa.
2:59:47Eh, el TPA es producido principalmente
2:59:49por las células endoteliales en los
2:59:51vasos sanguíneos y se libera eh en
2:59:54respuesta a estímulos como la trombina,
2:59:58la hipoxia o estrés mecánico. Tiene una
3:00:01alta afinidad por la fibrina, lo que le
3:00:02permite activar al plasminógeno
3:00:04preferentemente en la superficie del
3:00:06coágulo, o sea, favorece esa activación
3:00:08inituo. La auroquinasa, por otro lado,
3:00:11tiene menor afinidad por la fibrina y
3:00:13participa en procesos de remodelación
3:00:15tisular y migración celular, además de
3:00:17la fibrinolisis.
3:00:20Eh, aquí, bueno, la interacción entre el
3:00:22plasminógeno, fibrina y TPA genera un
3:00:25complejo que aumenta la eficiencia de la
3:00:27activación de pues de la fibrinolisis.
3:00:30Mm.
3:00:31Entonces, dado el potencial destructivo
3:00:35de la plasmina, el sistema fibrinolítico
3:00:37está regulado por múltiples inhibidores
3:00:39que van a limitar su actividad.
3:00:41Eh, ya ha mencionado que pues tenemos el
3:00:44activador del plasminógeno tipo uno que
3:00:46va a bloquear la actividad del TPA y de
3:00:48la y de la de la UPA, ¿no? La UPA que
3:00:53era la
3:00:56uroquina.
3:00:59Eh,
3:01:01es producida. Este inhibidor es
3:01:03producido por el endotelia o hígado y
3:01:05tejido adiposo y sus niveles pueden
3:01:06aumentar en estados inflamatorios o
3:01:08metabólicos.
3:01:09También tenemos la alfa antiplasmina,
3:01:13eh la alfa 2 antiplasmina que viene en
3:01:16la diapositiva, que va a inhibir
3:01:18directamente la plasmina libre en
3:01:19circulación.
3:01:21Eh, al final, pues todo esto evita la
3:01:23proteisis sistémica no controlada.
3:01:27Eh, bueno, entonces independientemente
3:01:30eh ya una vez que se en pacientes pues
3:01:32que tienen esta eh predisposición a
3:01:36formar cuágulos, decíamos en accidentes
3:01:38cerebros vasculares o embolias, una vez
3:01:41que se presenta, eh pues ha tenido mucho
3:01:45éxito en la práctica clínica eh el uso
3:01:48del TPA eh recombinante.
3:01:52Es una glicoproteína, el TPA es una
3:01:55glicoproteína, decíamos secretada por
3:01:57las células endoteliales
3:02:00e
3:02:0170 de 70 kil daltons en su forma
3:02:04glicosilada
3:02:06que seamos que presenta dominios eh
3:02:09cringer y dominios tipo finger que
3:02:11presenta homología con moléculas de
3:02:13adhesión y es responsable de su unión a
3:02:16la fibrina.
3:02:18Em,
3:02:23el TPA se une a la fibrina
3:02:26mediante a su dominio finger y dominio
3:02:28scringle, posicionándose en la
3:02:30superficie del cuágulo. Simultáneamente
3:02:32seamos también se una la fibrina para
3:02:34formar este complejo.
3:02:36Eh, y una vez activado el plasminógeno
3:02:40se convierte en plasmina y degrada la
3:02:41red de fibrina.
3:02:43El TPA entonces, por lo tanto, se
3:02:46utiliza eh principalmente eh pues en
3:02:48emergencias coronares
3:02:51para su producción. Eh, se produce en
3:02:54células de mamífero, principalmente en
3:02:55células cho, por las glicosilaciones y
3:02:59el plegamiento que tiene. Además, las
3:03:01glicosilaciones son importantes para la
3:03:03estabilidad y actividad y
3:03:05farmacocinética.
3:03:06Eh, principalmente el plegamiento, la
3:03:10formación de los puentes de sulfur.
3:03:13Hm. Sobre esto, pues tenemos varias eh
3:03:17variantes terapéuticas eh en el mercado.
3:03:20Tenemos eh el TPA idéntico al humano,
3:03:24que este se conoce como Alteplaza,
3:03:27que o sea, que es un TPA completo, pero
3:03:30también tenemos modificaciones
3:03:32estructurales como la Reteplaza y
3:03:34Teneecteplaza, que presentan
3:03:35modificaciones en ciertos dominios o
3:03:38introducen mutaciones para aumentar el
3:03:40tiempo de vida media o la resistencia a
3:03:42estos inhibidores que ya habíamos
3:03:44mencionado.
3:03:48Teneecteplaza
3:03:50incorpora mutaciones que aumentan la
3:03:52resistencia al inhibidor PAI1 y
3:03:55prolongan la vida media, permitiendo la
3:03:57administración en un solo en un solo
3:03:59bolo.
3:04:00En cuanto a la farmacocinética, el TPA
3:04:03nativo o el idéntico al humano presenta
3:04:05un tiempo de vida media de minutos
3:04:07debido a una rápida depuración hepática
3:04:10y también deseamos por la neutralización
3:04:12por los inhibidores que están en la
3:04:13sangre.
3:04:15Eh, por lo cual pues requiere una
3:04:16administración intravenosa continua en
3:04:19su forma recomendante original.
3:04:21Actualmente ya con las variantes
3:04:22modificadas como la TNECTEPLA el tiempo
3:04:24de vida media es más prolongado y
3:04:26permite esquemas de administración pues
3:04:28más sencillos.
3:04:30Hm. La biodistribución pues se va a
3:04:33limitar principalmente al espacio
3:04:34vascular, o sea, no suele difundirse a
3:04:36los tejidos e dado que pues tiene una
3:04:39rápida unión a la fibrina en presencia
3:04:41de trombos.
3:04:43En cuanto a las formulaciones,
3:04:45eh pues el TPA se formula generalmente
3:04:47como un producto oleofilizado para
3:04:49reconstitución intravenosa.
3:04:51Entre los expientes incluyen tampones
3:04:53fisiológicos, azúcares, eh
3:04:59y agentes lío y crioprotectores.
3:05:03Tras la reconstitución,
3:05:05eh una vez que ya se eh resuspende el
3:05:07producto oleofilizado, la estabilidad es
3:05:09limitada y requiere un uso inmediato en
3:05:11entornos hospitalarios. también pues por
3:05:12eso una de las razones es la que se
3:05:14administra en la medicina de urgencias.
3:05:17Una de sus aplicaciones más importantes
3:05:20es en el tratamiento de infarto agudo de
3:05:21miocardio, donde la disolución del
3:05:23trombo coronario puede restaurar el
3:05:25flujo sanguíneo, o sea, pues es debido a
3:05:27muerte.
3:05:28Eh, también se utiliza en accidente
3:05:30cerebrovascular isquémico agudo, donde
3:05:32la administración temprana puede mejorar
3:05:35significativamente los resultados eh
3:05:37neurológicos de los pacientes al el
3:05:39restaurar la perfusión o la eh
3:05:41circulación sanguínea en el cerebro.
3:05:44Otras indicaciones es para eh deshacer
3:05:47eh trombos en embolia pulmonar masiva,
3:05:50donde la trombolis eh puede ser
3:05:52necesaria en casos de compromiso
3:05:54hemodinámico.
3:05:56En cuanto a los efectos adversos, el
3:05:58principal riesgo asociado con el uso del
3:06:00TPA es la hemorragia, especialmente la
3:06:02hemorragia intracranial. También pueden
3:06:05presentarse sangrados en otros sitios
3:06:06como en el tracto gastrointestinal o en
3:06:08los sitios de la punción donde se hace
3:06:11la administración intravenosa.
3:06:13Eh, otros efectos incluyen eh
3:06:15hipotensión o reacciones alérgicas
3:06:17raras.
3:06:21Y bueno, con esto hemos llegado eh al
3:06:23final del video. Aquí eh pues yo
3:06:25quisiera retomar la pregunta eh inicial
3:06:28donde pues si podemos decir que todos
3:06:30los eh biofarmacéuticos son iguales o
3:06:33funcionan igual, pues obviamente pues
3:06:35claro que no. Eh, hay muchas formas
3:06:38entre, o sea, si bien podemos encontrar
3:06:40similitudes en cuanto tal vez la
3:06:42estructura, el origen biológico o cómo
3:06:44es que se producen hasta cierto punto,
3:06:47pues cada eh cada producto farmacéutico
3:06:50es eh es único y por ende sus
3:06:52aplicaciones terapéuticas también lo van
3:06:54a hacer. Hm. Existen muchas formas eh de
3:06:57clasificar los medicamentos eh
3:06:58biotecnológicos.
3:07:00Eh, principalmente lo que vimos en este
3:07:03en este video, pues es pues
3:07:05prácticamente la como que la naturaleza
3:07:07o la familia de proteínas y por ende la
3:07:09aplicación, o sea, cuáles son sus
3:07:11funciones.
3:07:13Entre estos pues vimos hormonas como la
3:07:15insulina
3:07:17o la hormona de crecimiento, factores de
3:07:19crecimiento, como también podríamos
3:07:21decir la hormona del crecimiento,
3:07:22factores de crecimiento
3:07:25eh moléculas de sistema inmunológico
3:07:28como las interleucinas y los
3:07:29interferones.
3:07:31Y por último, pues enzimas entre las que
3:07:34resaltamos la DNA1 y eh pues todos los
3:07:39eh las proteínas o enzimas que tienen
3:07:41que ver con eh la regulación de la
3:07:43hemostasia.
3:07:44Eh pues todas estas tienen estructuras
3:07:46eh diferentes y se aplican en diferentes
3:07:48contextos eh clínicos. Aquí obviamente
3:07:51no son los únicos medicamentos que
3:07:52existen, o sea, y de verdad no los vimos
3:07:54todos, o sea, no vimos con tanta
3:07:55profundidad eh las propiedades
3:07:57farmacocinéticas eh de los diferentes
3:08:00tipos, por ejemplo, de pues de variantes
3:08:02que existen de factores de coagulación,
3:08:05eh
3:08:09factores de coagulación, agentes
3:08:11trombolíticos,
3:08:13pero eh pues aquí el punto es resaltar
3:08:15eh los ejemplos más eh más relevantes.
3:08:19Eh, en cuanto a la aplicación a la
3:08:22ingeniería de bioprocesos, o sea, yo
3:08:24creo que aquí lo importante que hay que
3:08:26resaltar es la parte de la ingeniería de
3:08:28proteínas o el diseño de los
3:08:29medicamentos, ¿no? De cómo, si bien, o
3:08:32sea, cómo podemos hacer para que un una
3:08:35plataforma biológica filogenéticamente
3:08:38distante a nosotros pueda producir una
3:08:41proteína eh humana idéntica, pues es un
3:08:45logro bastante bastante importante en la
3:08:48práctica clínica. Pero pues también ya
3:08:50actualmente la tecnología permite ir ir
3:08:53más allá, ¿no?, de cómo podemos jugar
3:08:54con estas secuencias para obtener
3:08:57propiedades farmacocinéticas diferentes
3:08:59que vayan a facilitar hm ya la
3:09:03aplicación en la práctica clínica, o
3:09:04sea, el uso regular en los pacientes. O
3:09:06sea, ¿cómo podemos hacer eh que un
3:09:08paciente con diabetes
3:09:11pues no se tenga que estar administrando
3:09:12tres veces al día un poquito de
3:09:13insulina? Puede ser nada más una vez al
3:09:15día o incluso cada tr días o una vez a
3:09:18la semana, ¿no? Eh, ¿cómo podemos hacer
3:09:21más a fin la la molécula a su receptor o
3:09:25a su molécula blanco, no?
3:09:28E, o sea, hay muchas estrategias desde
3:09:30la ingeniería de bioprocesos que podemos
3:09:31hacer o como en el caso eh de la trín, o
3:09:35sea, de de la antitrombina eh producida
3:09:38en leche, pues que podemos utilizar
3:09:39plataformas pues poco convencionales y
3:09:41también es válido si demostramos que son
3:09:43seguros, eficaces y la podemos producir
3:09:45a escala eh industrial con buena
3:09:47calidad.
3:09:49Eh,
3:09:51a lo largo de la de esta unidad
3:09:54eh vamos a hablar de otro tipo de
3:09:56moléculas, o sea, o sea, esto lo estamos
3:09:58viendo tal vez como un conjunto porque
3:10:00son así algunos casos eh puntuales.
3:10:04Pero los siguientes temas, especialmente
3:10:07el de anticuerpos, es donde vamos a
3:10:08explorar mucho más cómo podemos jugar
3:10:10con la estructura y la aplicación
3:10:13pues de pues de los biofarmacéuticos,
3:10:16pues que son los más representativos en
3:10:17la en la actualidad. Al principio era la
3:10:20era la insulina por ser una molécula
3:10:21sencilla, pero ahorita ya podemos
3:10:23generar productos muchos más eh
3:10:25complejos como eh anticuerpos
3:10:27monoclonales completamente humanos, de
3:10:29la que no tenemos que depender de eh de
3:10:33plataformas animales para producirlas.
3:10:35Estamos hablando de la tecnología de
3:10:36hibridomas.
3:10:38Eh, incluso con el último tema de de la
3:10:40unidad vamos a hablar de eh pues de las
3:10:43terapias avanzadas, ¿no? De cómo podemos
3:10:46incluso ya con la tecnología modificar
3:10:48genéticamente células humanas con
3:10:50aplicaciones terapéuticas en las que
3:10:53pues incluso ya podremos decir que estas
3:10:55estrategias biotecnológicas de estos
3:10:57biofarmacéuticos eh por ejemplo la
3:10:59hormona del crecimiento, los factores de
3:11:01coagulación
3:11:03eh que se podían utilizar como terapia
3:11:05de reemplazo en enfermedades genéticas.
3:11:06Ahora ya con la terapia génica podemos
3:11:10pues eh
3:11:13eliminar de fondo la causa de la
3:11:15enfermedad, ¿no? Eh otorgar el gen eh el
3:11:19gen correcto en las células adecuadas,
3:11:21pues para poder revertir un fenotipo. Ya
3:11:23no es necesario producir la proteína y
3:11:25administrarla de manera exógena. Ya las
3:11:27células pueden producir las las del
3:11:29propio paciente eh pues la proteína
3:11:32correcta eh pues por tiempos por tiempos
3:11:35más prolongados.
3:11:37Entonces, pues al final eh en esta
3:11:39unidad yo espero que estos ejemplos pues
3:11:42también les ayuden a tener un panorama
3:11:44mucho más grande eh sobre cuáles son los
3:11:46alcances de la biotecnología
3:11:48farmacéutica y la ingeniería de
3:11:49bioprocesos y que incluso pues esto
3:11:51también les pueda ayudar a darles ideas,
3:11:54¿no?, eh para el desarrollo de su
3:11:56proyecto su proyecto del CURS.

About this transcript

This page contains the full transcript of 7 Clasificación de los biofarmacéuticos by Aída Jimena Velarde Salcedo, generated from the public captions YouTube serves with the video. The transcript has 26,971 words across 4,828 segments, with the original timestamps preserved so you can click any line to jump to that moment in the embedded player.

What you can do with it

Use the transcript to take notes, quote the speaker, build a study guide, generate a summary with ChatGPT or Claude via the YouTube Summary tool, or export it as a timed subtitle file with YouTube to SRT. You can also re-open it in the transcriber to translate the transcript into 100+ languages.

Free YouTube transcript tool

YouTube2Text is a free YouTube transcript generator — no signup, no daily limit. Paste any YouTube link and get the full transcript instantly, with timestamps, click-to-jump, translation to 100+ languages, AI prompts for ChatGPT, Claude, and Gemini, and exports to TXT, SRT, VTT, or Markdown.